基因毒性杂质培训及讨论-文档资料

《基因毒性杂质培训及讨论-文档资料》由会员分享，可在线阅读，更多相关《基因毒性杂质培训及讨论-文档资料（74页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、,基因毒性杂质培训及讨论,2015.10.20,一、基因毒性杂质基本信息 基因毒性杂质介绍 基因毒性杂质文件 二、ICH M7介绍及实例讨论 M7适用范围介绍 基因毒性杂质评估及分类 基因毒性杂质控制策略 三、问题讨论,目录,基因毒性杂质基本信息,杂质的分类： Q3A/B/C/D： 有机杂质：起始物料、副产物、中间体、降解产物等 无机杂质：重金属或其他残留金属、无机盐；其他（如滤纸、活性炭） 残留溶剂 M71.5g/天X25,550天=38.3mg 日摄入量可以高于平均终生日暴露量，而其风险水平仍与每日或非每日治疗方案相持平,单个杂质可以接受的摄入量时间剂量关系,表2是从上述概念得到的数据，其

2、中写出了临床研发阶段和上市阶段终生暴露LTL下可接受摄入量数值。 如果给药是间歇性的，则可接受日摄入量应根据给药总天数计算。例如，2年期间每周服用一次的药物（即104个服药天数），其可接受摄入剂量为每剂20 g。 该拟定的摄入水平一般大大低于计算值，在很短期治疗时，安全性更大，详见下图：,短于生命周期的可接受摄入量,不同治疗时长举例,LTL应用于临床阶段和已上市药物的情况-临床阶段,采用LTL概念，诱变性杂质的可接受摄入量在临床研究中的治疗期限最高为1个月、1-12个月及长于1年直到完成3期临床试验（表2）。保持早期临床风险水平为百万分之一，后期临床为十万分之一。 进一步地，经过调整的可接受摄

3、入量可以应用于14天的一期临床试验阶段。只有1类和2类，以及3类中关注序列杂质予以诱变性考虑。 仅仅只是含有警示结构（3类）不需要在一期临床试验期间进行评估 如果治疗时长不超过6个月，被接受的日摄入量符合100万分之一患癌风险水平。,LTL应用于临床阶段和已上市药物的情况-已上市药物,已上市药品的治疗时长分类与可接受摄入量在上表中列出。它可以用来预计绝大部分患者的暴露时长。 有些情况下，患者中一部分人群可能会延长治疗时长，延长治疗时长导致的风险增加（如上例，增加比例为1.5/100000）可以忽略。,在短期服用时，第1类，以及有特定阈值的也可以按上述的比例进行调整（临床阶段和已上市），或限制不

4、超过0.1%(ICH 3A)，取低者 例如，如果一个特定化合物的可接受服用量为终生暴露期15g/天，在短于终生时长暴露时的限度（表2）可以增加至100g（1-10年治疗进长），200g（1-12月）或1200g（1个月）。但是，对于具有最大日服用剂量的药物，例如，100mg，则1个月时长的可接受日服用剂量应受限于0.1%（500g），而不是1200g。,LTL应用于特定化合物的情况,多个杂质的可接受日总摄入量,单独应用于各个杂质。如果有两个2类或3类杂质，则限度是针对单个杂质的。如果原料药质量标准中有3个或更多3类或3类杂质，临床研发和已上市药品中的总诱变性杂质应根据表3进行限制。 在原料药质

5、量标准中，只有列出的2类和3类杂质才会被包括在总限度计算中，而第1类的杂质不应计入第2类和第3类杂质总限度。 还有，原料药中形成的降解产物要单独控制，不能计入总限度。,多个杂质的可接受日总摄入量-举例,瑞戈非尼基因毒性杂质控制：,IM2为降解杂质，单独控制；氯乙烷为1类，单独控制,相关概念介绍- M7 Addendum中PDE介绍,允许的日接触量（PDE）：有一些机理说明对剂量的反应并非线性，包括与非DNA靶标产生作用的化合物，也包括与DNA有活性反应的化合物，例如，在与DNA接触前其毒性即被快速清除，或对产生的损伤进行有效修复。 针对该类化合物的合规方法可以是根据对无明显反应水平（NOEL）

6、的鉴别，在可以获得数据的情况下，使用不确定性因子（ICH Q3C（R5）计算允许日暴露量（PDE）。 PDE算法最初用于溶剂残留的计算（ICH Q3C（R5） PDE的计算方法,相关概念介绍- M7 Addendum中PDE介绍,M7 Addendum 中使用PDE计算的杂质,苯胺/羟胺：引起高铁血红蛋白血症，在组织如脾脏含铁血黄素沉积，和随后的炎症和肿瘤。 过氧化氢：通过氧化损伤作用的化学物质，由于存在大量的内源性保护机制，使有害的影响不会发生在低剂量时。,举例说明M7 Addendum-羟胺（RSM项目涉及）,在M7的 76页中，羟胺存在相应的TD50数据，但使用PDE计算,如果采用AI计

7、算，采用最敏感的TD50值： AI=TD50/100000X50kg=22ug/天,M7 Addendum 给出的解释为：,举例说明M7 Addendum-羟胺（RSM项目涉及）,羟胺诱导肿瘤通过一种阈值模式（即，脾的含铁血黄素沉着症）。大鼠雄性在5 ppm或0.2毫克/公斤/天观察到血管肉瘤，雌性在80 ppm或6.2毫克/公斤/天，观察到肿瘤的增加（血管肉瘤和血管瘤）。因此，最低可见有害作用水平（LOAEL）在为期两年的大鼠研究中为0.2毫克/公斤/天。,采用PDE计算值为2ug/天，和AI计算法是不一样的,ICH Q3C 附录3-PDE计算,F3：短期接触急性毒性研究的可变系数。 =1

8、研究时间至少为动物寿命一半（鼠、兔1年，猫、 狗、猴7年） =1 器官形成的整个过程的生殖研究。 =2 啮齿动物6个月或者非啮齿动物3.5年的研究 =5 啮齿动物3个月或者非啮齿动物2年的研究 =10 更短的研究时间 F4：用于产生严重毒性情况的系数。 =1 与母体毒性有关的胎儿毒性。 =5 无母体毒性的胎儿毒性。 =5 受母体毒性影响的致畸反应。 =10 无母体毒性影响的致畸反应。 F5：一个可变系数，可用在没有建立不反应的量（NOEL） 时。,ICH Q3C 附录3-PDE计算,ICH Q3C 附录3,ICH Q3C 附录3,NOEL的确定： 2、根据相应的动物试验资料确定NOEL（或LO

9、EL）。 动物试验资料的获得： 各种数据库、文献，如： http:/esis.jrc.ec.europa.eu/index.php?PGM=dat http:/ntp.niehs.nih.gov/?objectid=D16D6C59-F1F6-975E-7D23D1519B8CD7A5（美国国家毒理学纲要，溶剂类限度确定最权威，ICH例子中四氢呋喃引用此数据库） 可查的数据库还有很多，希望多探索，交流。,例.三苯基膦残留限度的确定,三苯基膦：CDE共性问题解答，新药，第十一个问题。,例.三苯基膦残留限度的确定,三苯基膦：CAS号：603-35-0 先查http:/ntp.niehs.nih.g

10、ov，未收载。 继续查找，在http:/esis.jrc.ec.europa.eu/index.php?PGM=dat,里面记载的试验很多，要选取最严格的试验： 比格犬吸入毒性试验，接触浓度浓度为0.0018、0.00945mg/L,每天6小时，每周5天，共试验4周；结论：高浓度发现神经功能缺损，两个浓度均使中枢神经系统发生组织学变化；未发现其具有基因毒性,三苯基膦残留限度的确定,例.三苯基膦残留限度的确定,ICH M7介绍及实例讨论,M7适用范围介绍 基因毒性杂质评估及分类 基因毒性杂质控制策略,基因毒性杂质的控制策略,ICH M7提到了4种控制策略，是一种递进关系，具体如下：,第一种方法

11、在原料药质量标准中加入杂质检测并制订质量标准，利于适当的仪器分析方法。 根据ICH Q6A，方法1 控制方式可以适用定期检测。如果原料药中的诱变性杂质在至少6 个连续的中试批次或3 个连续的生产批次中，测得结果均低于可接受限度的30%，则可以论述进行定期检测。 如果不满足该条件，则建议对原料药进行常规检测。,第一种控制策略举例,瑞戈非尼基因毒性杂质控制：,IM2是瑞戈非尼的降解产物，拟将其订入质量标准。瑞戈非尼说明书上2个适应症的最长生存期7.3个月，瑞戈非尼最大日剂量160mg，计算得订入质量标准的单个潜在基因毒性杂质限度为125ppm，根据成品及稳定性样品中IM2的实际检出情况，拟定成品中

12、IM2的控制限度为100ppm。,第一种控制策略举例,中试样品检测情况：,后期可以结合报产情况，在日后GMP生产进行定期检测,第二种方法 在原料、起始物料或中间体的质量标准中包括对杂质的检测， 或作为中控检测， 同时制订可接受标准，或采用适当的分析方法，将杂质控制在可接受限度以下。,基因毒性杂质的控制策略,实例：奥贝胆酸,奥贝胆酸起始物料制备工艺中使用到乙醛，我们在起始物料中制定了可接受标准,第二种方法实例,通过查询，获得乙醛TD50=153mg/kg/day,为第1类基因毒性杂质 计算每日可接受限量AI=153ug/天 奥贝胆酸日最大服用剂量25mg/天 浓度=（153ug/天）/（ 25m

13、g/天）=0.00612=0.612% 按照ICHM7的要求，0.1%的，取限度0.1%,基因毒性杂质的控制策略,第三种方法 在原料、起始物料或中间体的质量标准中包括对杂质的检测， 或作为中控检测， 同时制订一个高于原料药中可接受限度的质量标准，采用适当的分析方法，配合经过证明毒性认识， 在后续工艺中被清除的知识，并对后续工艺进行控制，保证原料药中的该杂质残留水平低于可接受限度，不需要在后续工艺中再行检测。 当实验室级试验（鼓励采用加样试验）数据，必要时可以采用中试生产或商业批次数据加以支持，显示原料药中杂质水平低于可接受限度的30% 时，可以采用该方法。,第三种方法实例,ICHM7案例1：第

14、3种控制策略举例 差2步到原料药时，生成了中间体X，杂质A在中间体X中常规检出。杂质A是一个稳定的化合物，会被带入原料药。 在实验室中，将杂质A以不同浓度加入中间体X，发现即使在1%水平时，也能降到根据TTC制订的限度的30%以下。 由于中间体X的形成离原料药只有2步，杂质A在中间体X中的水平相对较高，因此另外又通过检测不同中试规模批次中，原料药里的杂质A水平确认了工艺清除水平，获得的结果为根据TTC制订的限度的30%以下。 因此，对中间体X中杂质A控制在1.0%水平是可以接受的，不需要在原料药标准中对该杂质进行检测。,ICHM7案例2：第3种控制策略举例 根据加样研究采用标准分析方法所获得的

15、预期清除数据 一个5步合成工艺中，起始物料Y在第3步引入，采用标准分析方法在起始物料Y中检出杂质B通常低于0.1%。 为了确定0.1%的标准是否可接受，在实验室里进行了清除研究。将杂质B以不同浓度（最高10%）加入起始物料Y中，通过最后3步工艺步骤，得到清除系数500倍。 该清除系数应用于起始物料Y含杂质B为0.1%时，杂质B在原料药中的期望水平低于2 ppm。 由于该值低于根据TTC限度计算的原料药中该杂质允许水平50 ppm，因此认为起始物料Y中杂质B为0.1%的质量标准是可接受的，不需要再提交中试生产数据或商业放大批数据。,第三种方法实例,第四种方法 对工艺参数和残留杂质水平（包括致命性

16、和清除知识）影响有了解，确信原料药中的杂质一定会低于可接受限度；建议该杂质不需要进行分析测试（例如，不需要将杂质列在任何质量标准中）。 在很多情况下，只需要根据科学原理对该控制方法进行论述就可以了。科学风险评估要素可以用来论证第4 种方法。 第4种方法特别适用于不稳定的杂质（例如 ，二氯亚砜），以及那些在合成路线早期引入，但已被有效清除的杂质。,基因毒性杂质的控制策略,第四种方法实例,ICHM7案例3：第2种和第4种控制策略举例 结构相似的诱变性杂质 一个5步合成工艺中第1步中间体是一个硝基芳烃化合物，可能含有较高水平的杂质C（位置异构物）。 第1步中间体中杂质C的量采用常规分析方法未能检出，但可能以较低水平出现。第1步中间体细菌诱变含量呈阳性。 第2步加氢反应中第1步中间体转化率为99%，得到对应的芳烃胺。该转化率通过中控检测确认。 对中间体残留的清除情况进行了评估，第3步和第4步为工艺步骤中的清除点，在第4步中间体根据TTC限度建立了对中间体1的控制标准（第2种控制策略）。 位置异构杂