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1、出课人:姜丽艳,“番茄马铃薯”理想图,科学家们通过长期的实验,采用植物体细胞杂交技术,获得了“番茄马铃薯”植株。,【学习目标】 1、了解动物细胞融合的原理、过程和意义。 2、理解单克隆抗体制备的过程和应用 【学习重难点】 1.教学重点:单克隆抗体的制备和应用 2.教学难点:单克隆抗体的制备过程,1970年,有两位科学家做了一个人鼠细胞融合的实验,以证明蛋白质分子是运动的。那么,如何实现人鼠细胞融合的呢?,一、动物细胞融合 (细胞杂交),1、过程:,动物细胞A,动物细胞B,诱导融合,(膜融合、质融合、核融合),筛选杂交细胞AB,多核细胞,单核细胞,两个完整的 杂交细胞,B,B,1、动物细胞融合的
2、目的中最重要的是( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 2、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 3、融全的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) A、具有原来丙个或多个细胞的遗传信息 B 、能无限增殖 C、可形成新个体 D、培养过程会贴壁,练一练,A,浆细胞(B淋巴细胞),免疫球蛋白,如何解决这个缺点呢?,传统采用怎样的方法生产抗体?有什么缺点?,单克隆抗体,动物细胞融合技术,动物细胞培养技术,既能产生特异抗体又能大量增殖的细胞,12,免疫的B淋巴细胞,注射特定抗原蛋白,骨髓瘤细胞,培养骨髓瘤细胞,融
3、合,多种杂交细胞,专一抗体检验阳性,单克隆抗体,注射到小鼠体内,体外培养,特异性强,灵敏度高,专一抗体检验阳性,将不同杂交细胞分开,克隆专一抗体,检验阳性细胞,在具有筛选作用的培养基上培养,二、单克隆抗体制备过程,多种,克隆上述杂交细胞,B淋巴细胞 骨髓瘤细胞,诱导融合,未融合的亲本细胞,融合杂种细胞,融合的同种核细胞,选择培养,杂交瘤细( B-瘤细胞),克隆化培养,专一抗体检测,能产生 性抗体的杂交瘤细胞,培养,单克隆抗体,第一次筛选,筛选,( ),特异,体外,腹腔内,多次,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合,得到杂交细胞,经培养可产生大量 的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是 ( )
4、,A.经过免疫的B淋巴细胞,B.不经过免疫的T淋巴细胞,C.经过免疫的T淋巴细胞,D.不经过免疫的B淋巴细胞,练一练,二次,动物细胞融合,动物细胞培养,2、下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解, 结合图解按要求回答问题:,(1)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺 序连接起来,顺序是:_。制备操作至少要进行_次细胞筛选。(2)由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了_和_的动物细胞工程技术手段,前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用_。,灭活的病毒,(3)生产上一般不能通过直接培养图A中的细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是:_ 。(4)图F中的抗体与普通血清抗体相比
5、较,具有_ _ 的特点。,该细胞高度分化,灵敏度高、化学性质单一,特异性强、,(5)C杂交瘤细胞是 次筛选得到的, 产生所需 的专一性抗体。,第一,不能,3.单克隆抗体的应用,最主要的优点:,作为诊断试剂-最广泛应用 准确、高效、简易、快速.,特异性强、灵敏度高、产量大,既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。,治疗疾病和运载药物,主要用于癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗癌症药物,制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞,在原位杀死癌细胞。,“生物导弹”=“单克隆抗体”+药物,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法灭活的病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一
6、个优势单克隆抗体 特异性 强、灵敏度高的优势,小结,1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合,用灭活的仙台病毒处理后,不可能获得下列哪种基因型的细胞( ) AAAaa BAaBb CAabb DBBbb 2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是 ( ) 诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞 A.B. C.D.,随堂训练,C,C,3、关于单克隆抗体,下列叙述不正确的是( ) A、可以制成诊断盒用于疾病的诊断 B、可以与药物结合,用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产,不能体外生产 4、“生物导弹
7、”是指( ) A、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体 C、杂交细胞 D、B淋巴细胞,D,B,5、动物细胞融合和植物原生质体融合比较,在 动物细胞融合中有特殊性的是( ) A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程,C,6、单克隆抗体和血清抗体相比,其优越性在于( ) A、单克隆抗体能够制成“生物导弹” B、单克隆抗体能够在体外制备 C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、 免疫活性高 D、单克隆抗体制备过程简单,C,7、下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中 1过程注射的物质和A细胞的名称为( ),A、抗体、T淋巴细胞 B、抗原、T淋巴细胞 C、抗体、B淋巴细胞 D、抗
8、原、效应B淋巴细胞,D,8、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是( ) A特异性强、灵敏度高 B与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤 细胞分泌,C,9、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案,2、该方案能达到预期效果吗?为什么?,4、图中B为_过程,常用_作为诱导剂,该细胞继承_的遗传特性,既能_,又能_。,1、该实验方案的目的是_,3、A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生_,5、单克隆抗体可以作为诊断试剂的原理是:_。,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,一种抗体只能与特定的抗原发生特异性结合,不能,得不到能产生破伤风杆菌抗体的B细胞,若该过程仍是制备单克隆抗体, 在A、B到C的过程中,所形成的C有_种,用来培养的D细胞 应该是_ 。从中选 择出它的方法是_ 培养,获得D后,常用的培养方法是 培养液中培养和_。,小鼠腹腔内增殖,10、右图为细胞融合的简略过程,请据图回答:,3,杂交瘤细胞,用特定选择培养基,