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1、2011年11月培训汇报 -11月10-11, Charles River亚洲短期培训 -11月24-25,新版国家标准详解培训班(二期) 2011.12.6 梁春南 Chunnan_,提纲,影响实验结果的环境因素 （动技部近期改进事项） 病原生物相关国标的修改 实验动物病源生物监测目录,影响实验结果的环境因素,影响实验结果的环境因素,温度 恒温动物能够适应一定的温度变化范,但是,保持最低的温度波动十分重要(日温差4) 长时间超过耐受范围,可能诱发临床体征的改变. 热的中性域(TNZ): 恒温动物发挥最小的能量以维持核心体温的温度范围。 高于或者低于TNZ将导致动物行为或适应性调整以保证体内平
2、衡：身体蜷缩、立毛、外周血管收缩/扩张、呼吸及食物消耗量等的改变等。 长时间暴露于高/低的温度，或者适应性调整不足以维持体内平衡时，会导致基础代谢率发生改变。 （普通环境16-26，屏障环境20-26）,常用实验动物的耐受温度范围,影响实验结果的环境因素,温度 环境温度的改变可能会影响毒性实验的结果 在啮齿类体内，温度可导致Amphetamine的毒性,而麻黄素的毒性 特定温度的预暴露也可能影响动物的毒性反应 小鼠暴露于4的环境7天以后，对-antagonist isoproterenol 的毒性反应比暴露于24 环境中的对照小鼠强（100倍） 环境温度升高的急性效应 动物出现死亡，雄性大鼠繁
3、殖性能下降（睾丸发育退化） 环境问题升高的慢性效应 生长速率降低 每窝产仔数量减少 新生动物死亡率升高,影响实验结果的环境因素,湿度(40-70%) 偏高 微生物易于繁殖，动物易发生传染病 饲料垫料易于霉变 与高温协同作用：抑制动物的蒸发散热，危害巨大 与低温协同作用：显著增加动物的非蒸发散热 偏低 使动物皮肤和黏膜发生干裂，减弱皮肤和黏膜对微生物的防御能力 使室内灰尘飞扬，易引起动物的呼吸道疾病 相对湿度低于40%时，大鼠容易发生环尾症，可能导致死亡率升高 低湿环境下，常发生大、小鼠乳母拒绝哺乳或食仔现象，仔鼠发育不良、体重增长停滞,不同因素对有效环境温度的影响及给动物健康与福利的对应危害,
4、注：数据来源：Guidelines for the Humane Transportation of Research Animals，NRC 2006.,影响实验结果的环境因素,噪音 来源 关门（84-105db）， 说话、喊叫（83-100db）， 推车（83db） 压差条件下密封不严产生哨声 动物 兔子蹬地，非人灵长类晃动笼具的声音 非人灵长类动物和狗的叫声 楼下饲养的犬吠声音可能对楼上的影响（80-82db） 报警设备测试 广播系统 等等 （60db）,影响实验结果的环境因素,影响实验结果的环境因素,噪音 常见影响 听觉：听力丧失 非听觉： 心血管：血压升高（大鼠，猕猴）；大鼠心肌肥大
5、、心率加速、外周血管收缩、呼吸频率加快等 神经（听源性癫痫）、激素/生化、生殖、睡眠、行为等等 突然的尖锐、大声的噪音会引发癫痫发作 记忆性的癫痫 间歇性和持续性的噪音 通常超过85-100db 最有可能导致临床和生理的改变,影响实验结果的环境因素,光照 重要参数：周期、强度、波长 显著影响：繁殖、行为、生理机能，且有种群差异 光周期 较长的光周期可能会改善某些种群/品系的繁育情况（12/12，14/10） 恒定的光照，能导致大鼠卵巢的改变，出现持续发情（无周期性） 光强度 光毒性视网膜病变：白化啮齿类大小鼠 高强度：延长发情周期，降低繁殖性能 （动物照度：大、小鼠、豚鼠15-20lux，犬、
6、猴、兔100-200lux） （工作照度：200，原国标最大离地1米照度不超过300lux的意义，长期实验有必要定期调整和改变动物放置的位置）,影响实验结果的环境因素,病原生物 导致临床疾病：发病和死亡可能会影响研究项目 无临床症状感染，但产生的变化会扰乱研究结果 组织学改变：肝脏、肾脏变化 生化改变 免疫学差异 等等 粉尘：病原微生物重要的传播媒介（空气洁净度和落下菌） （空气洁净度：屏障7级，普通无要求） （落下菌：屏障环境每平皿3个/半小时，普通环境无要求）,影响实验结果的环境因素,饲料 营养成分 全价饲料采用了标准配方,营养成分相对稳定 常规营养成分方面小的改变不会明显影响实验结果 蛋
7、白质,脂肪,水分,碳水化合物,灰份 优质饲料只需要检验少量项目的有毒/致癌物质即可 微生物污染 可能随季节、饲料类型和水分含量而变化。 可能会发生沙门氏菌引起的饲料污染，并且在最终产品中存活。 颗粒饲料生产过程中仅在短时间内可能达到88的温度，达不到灭菌效果。 饲料中霉菌的影响主要由产毒霉菌产生的毒素所引起的。 必须营养 如：Vc （豚鼠，猴） （探讨各类饲料的检测指标）,影响实验结果的环境因素,垫料 材质 储存 分析：参考饲料 饮水 可能的污染物质：重金属、杀虫剂、挥发性有机物，由水传播的微生物病原体等 水质硬度 根据检测结果进行适当处理,影响实验结果的环境因素,饮水 普通处理选择 消毒处理
8、：酸化处理，加氯消毒，反渗透，臭氧消毒，过滤（颗粒物，活性碳），去离子 高压灭菌 酸化抑菌： 改变饮水消耗量， 生长速率，及器官比重， 改变消化道菌群/数量。 加氯： 消毒能力较强， 有报道称可引起免疫系统改变， 可能产生有致癌性和细胞毒性，影响毒性评价结果。,影响实验结果的环境因素,小结 许多环境因素对实验结果的影响力比较小 设立同期对照十分重要 将抵消很多环境因素的影响 但是，当比较长期研究及不同的机构间的研究时仍然有问题。 规范饲养设施中的环境条件将有助于减少由长时间引起的变化 饲养条件：清洁，规律，恒定 饲料、垫料、饮水等：符合动物生长特性，无菌，无/低有害物质 生物安全程序：人流/物
9、流/动物流/气流控制，外来人员的控制管理。 等等。,影响实验结果的环境因素,影响实验结果的环境因素,光照： 新增动物照度（常规实验） 生殖实验建议维持原照度，可尝试改变周期（12/1214/10） 屏障基本改造完成,普通动物区域也可实现,但均需要继续改进. 饲料间 夏季温度基本能保证在20 上下 冬季甚至超过25 正在计划改造饲料间,目标将冬季温度控制到小于等于21 饮水: 新引入实验动物饮水软化装置,有害物质特别是硬度得到了有效降低,饮水软化装置处理前后水质对比,另有20项指标在处理前后均未检出,新版国家标准详解培训班学习心得,本次学习的标准项目 GB14925-2010 实验动物 环境及设
10、施（替代GB14925-2001 ） GB14922.1-201? 实验动物 寄生虫学等级监测 GB14922.2-2011 实验动物 微生物学等级及监测（替代GB14922.2-2001 ）及涉及的部分检测方法 GB14923-2010 实验动物 哺乳类实验动物的遗传质量控制（替代GB14923-2001 ）,新版国家标准详解培训班学习心得,本次标准的总体印象 完全强制部分强制+部分推荐 引用标准删除了年份，而以“最新”替代 抗体效价合格率由原来必须达到100%才算免疫合格改为只需要达到70%即为合格,新版国家标准详解培训班学习心得,GB14922.2 废除了对“单核细胞增生性李斯特杆菌”的
11、检验要求 GB/T 14926.21 普通级兔如果免疫接种兔出血热疫苗，则HAI抗体效价应大于1：10，同时免疫抗体合格率70%即判断该群里免疫合格 GB/T 14926.46 犬钩端螺旋体 免疫 抗体合格率70%即判断该犬群里免疫合格 GB/T 14926.56 犬狂犬病病毒 免疫抗体合格率70%即判断该犬群里免疫合格 GB/T 14926.57 犬细小病毒 免疫 抗体合格率70%即判断该犬群里免疫合格 GB/T 14926.58 传染性犬肝炎病毒 免疫 抗体合格率70%即判断该犬群里免疫合格 GB/T 14926.59 犬瘟热病毒 免疫 抗体合格率必须达到100%才能判断该犬群里免疫合格,实验动物病源生物控制目录,犬Canine,实验动物病源生物控制目录（续1）,非人灵长类（恒河猴，食蟹猴） Non-human Primates（Macaca Mulatta, Macaca Fascicularis）,实验动物病源生物控制目录续2,大鼠 Rats,实验动物病源生物控制目录续3,小鼠 Mice,谢谢！,GB14925修改前后对比,GB14925修改前后对比,GB14925修改前后对比,GB14925修改前后对比,GB14925修改前后对比,GB14925修改前后对比,
