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1、2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体,一、动物细胞融合,1.概念：,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。又叫细胞杂交,融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。,？,？,用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程,2.过程：,.原理：,细胞膜的流动性。,.诱导方式：,物理法：,振动、离心、电激,化学法：,聚乙二醇（PEG）,生物法：,灭活的病毒,使远缘杂交成为可能； 主要用途：制备单克隆抗体,3.意义和应用：,二、单克隆抗体,1.传统制备抗体的方法,向动物体内反复注射某种抗原,动物产生抗体,从动物血清中分离抗体,特点：产量低、纯度低、特异性差,2.制备过程：,诱导其融合的
2、方法有哪些,融合后培养液中有哪几种细胞,怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点,注射抗原的目的是什么,为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选,大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法,4、优点： 特异性强、灵敏度高 、可大量制备,三、单克隆抗体的应用,、可用于作为诊断试剂 、可用于疾病治疗和运载药物,小结,1、动物细胞融合过程,2、单克隆抗体制备过程,存在两次筛选：,第一次用选择培养基选出杂交瘤细胞,第二次筛选能产生抗体的杂交瘤细胞,练习：,1、只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（ ） APEG B灭活的病毒 C电刺激 D离心,练习：,2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合， 得到杂交细胞，
3、经培养可产生大量的单克隆抗 体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 D、不经过免疫的B淋巴细胞,练习：,3、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体,练习：,4. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融 合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D,注射抗原的目的是什么？,使小鼠产生免疫反应，获得相应的B淋巴细胞,物理方法：离心、振动、电刺激 化学方法：聚乙二醇（PEG） 生物方法：灭活的病毒,最常用的方法是：灭活的病毒诱导,最常用的试剂是：聚乙二醇,融合后培养液中有哪几种细胞？,B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、BB融合细胞、骨髓瘤骨髓瘤融合细胞、B骨髓瘤融合细胞（即杂交瘤细胞）和细胞多聚体,
