《【名师一号】2012年高考生物 专题一 微生物的培养与应用复习与学科能力课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【名师一号】2012年高考生物 专题一 微生物的培养与应用复习与学科能力课件（75页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1,专题一 微生物的培养与应用,2,教材基础回扣 一培养基 1.概念:人们按照微生物对1营养物质的不同需求,配制出的供其2生长繁殖的营养物质 2.营养构成 一般都含有3水4碳源氮源5无机盐生长因子,还需满足不同微生物对pH6特殊营养物质以及O2的要求,3,二无菌技术 1.消毒 (1)特点:使用较为7温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体 8有害的微生物(不包括芽孢和9孢子) (2)常用方法:煮沸消毒法10巴氏消毒法化学药剂消毒法,4,2.灭菌 (1)特点:指使用强烈的理化因素杀死物体内外11所有的微生物包括芽孢和孢子 (2)常用方法:12灼烧灭菌干热灭菌13高压蒸汽灭菌,5,三微
2、生物培养基的基本技术 1.配制培养基 称量混合溶化调pH分装包扎 2.灭菌:加水加培养基密封排冷气维持压力取出倒平板(或搁置斜面),6,3.接种 (1)接种过程:洗净双手点燃酒精灯接种贴标签 (2)接种工具:包括14接种环涂布器 (3)接种方法:平板划线法15稀释涂布平板法 (4)注意事项:整个操作过程都要在16酒精灯火焰旁完成 4.培养:接种后的培养皿放入恒温箱内培养,7,四菌种保藏 1.临时保藏 (1)操作: 采用17固体斜面培养基,菌落长成后,放入184冰箱中保藏,以后每36个月,转移一次新的培养基 (2)缺点:保存时间19不长,菌种易被20污染或产生变异 2.长期保存法:21甘油管藏法
3、,放在-20下保存,8,五土壤中分解尿素细菌的分离与计数 1.菌种筛选 (1)培养基:22选择培养基 (2)特点:23尿素是唯一氮源,9,思考：稀释涂布平板法适用于所有微生物研究吗? 提示:稀释涂布平板法广泛应用于微生物学的研究这种技术只统计细菌数,而且需要培养一段时间形成菌落后才能计数因此,这种方法不宜用于某些食品业的质量控制,因为有些食品如牛奶易腐败变质,不宜延搁这么长的时间,这时可使用直接的方法如使用显微镜油镜统计细胞的数目,10,2.统计菌落数目 (1)计算方法 24稀释涂布平板法 25显微镜直接计数 (3)平板计数公式:,11,3.设置对照 (1)对照实验:是指除了27被测试的条件外
4、,其他条件都相同的实验 (2)主要目的:排除实验组中28非测试因素对实验结果的影响,12,六分解纤维素的微生物的分离纤维素分解菌的筛选 1.土壤取样:选择富含29纤维素的环境 2.将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 (1)制备鉴别培养基:主要碳源30CMC-Na (2)刚果红染色法 先培养31微生物,再加入刚果红进行颜色反应 32倒平板时加入刚果红,13,3.进一步鉴定 (1)为确定得到的菌是否是纤维素分解菌,还需进行33发酵产纤维素酶的实验 (2)测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的34葡萄糖进行定量测定,14,考点迁移互动 考点1微生物的营养物质及功能 微生物的化学组成与
5、其他生物大体相同,也是由CHONPS等元素组成,其中CHON占细胞干重的90%以上,这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物这些化合物归纳成碳源氮源生长因子无机盐和水这五大类营养要素,15,16,【例析1-1】 抗生素可由微生物产生,具有抑菌作用,能在琼脂培养基中扩散在筛选产生抗生素的菌种时,先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌,在27下培养3天,形成菌落然后接种乙丙丁三种致病菌(图A),继续在同样条件下培养3天,结果如下图B分析结果,得出的结论是 ( ),17,甲菌产生了抗生素 丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制 乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 丙菌产生的抗生素抑
6、制了乙菌的生长 A. B. C. D.,18,解析 乙丙丁三种致病菌不会产生抗生素,否则靠近乙丙丁的甲菌落不能生长从图B来看,乙菌的生长被抑制,最可能的原因是甲菌产生了抗生素,此种抗生素只能抑制乙菌的生长,而对丙丁两种细菌没有影响选项正确,答案为A 答案 A,19,【例析1-2】 可以作为硝化细菌碳源氮源和能源的是 ( ) A.CO2NH3光能 B.(CH2O)、N2、NH3 C.CO2、NH3、NH3 D.(CH2O)、NH3、N2 解析 本题考查的如下几个知识点:硝化细菌的新陈代谢类型:是化能自养型微生物;硝化细菌合成有机物所需能量来源是:来自氧化分解外界环境中的NH3;合成有机物所需的碳
7、源:是二氧化碳;NH3氧化分解的产物是NO-3,也就是硝化细菌的氮源 答案 C,20,方法技巧 微生物最常利用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐硝酸盐 对异养微生物来说,含CHON的化合物既是碳源又是氮源能源 微生物之所以需要补充生长因子,往往是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限,21,【互动探究1】 根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择培养基和鉴别培养基,结合显微镜镜检以及菌落特征可以把混杂在一起的大肠杆菌硝化细菌乳酸菌酵母菌金黄色葡萄球菌圆褐固氮菌尿细菌纤维杆菌分离开来下面是分离筛选的方法步骤,请根据各个步骤的条件,填写横线上的内容:首先配制一系列不
8、同性质的固体培养基,然后进行高温灭菌再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养,22,(1)利用无氮培养基可以筛选出_ (2)用不含有有机碳源的选择培养基可筛选_ (3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入_ (4)用含较高浓度食盐的培养基可选择出_;或者根据菌落的颜色呈现_色,将其挑取单独培养,圆褐固氮菌,硝化细菌,青霉素,金黄色葡萄球菌,金黄,23,(5)利用伊红美蓝培养基培养混合菌,菌落呈_色并带有金属光泽的是_,挑取该菌落单独培养,结合显微镜镜检和进一步用伊红美蓝鉴别培养基培养来确定 (6)在无氧环境下培养混合菌,_可以生长,加入一定浓度的乳酸,使培养基的pH充分降低,可抑制_的
9、生长,利用菌落的特征,结合显微镜镜检,选取生长优势的菌落,即可分离出_,深紫,大肠杆菌,大肠杆菌乳酸菌酵母菌,大肠杆菌酵母菌,乳酸菌,24,(7)利用只含纤维素为碳源的液体培养基可筛选_ (8)若筛选尿细菌,则配制的培养基的特点是_,纤维杆菌,氮源只含尿素,25,考点2无菌技术及菌种保藏 1.无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别,26,特别提醒:酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好,原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱,27,(2)无菌技术具体操作 对实验操作的空间操作者的衣着和手进行清洁和消毒 将用于微生物培养的器皿接种用具和培养基等进行
10、灭菌 为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触,28,2.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算称量溶化灭菌倒平板 (2)纯化大肠杆菌 原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落 方法:平板划线法稀释涂布平板法,29,(3)菌种的保藏 短期保存:固体斜面培养基上4冰箱保存,菌种易被污染或产生变异 长期保存:-20甘油管在冷冻箱中保藏,30,深化拓展 微生物培养中几种实验操作的注意事项 1.倒平板 (1)培养基灭菌后,需冷却至50左右时才能
11、倒平板 (2)左手拿培养皿,右手拿锥形瓶,左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开,31,(3)整个操作在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染 (4)平板冷凝后要倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染 (5)若倒平板时,培养基溅在皿盖和皿底之间的部位,这个平板应丢弃,32,2.平板划线操作 (1)第一次划线及每次划线之前都需要灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环,每次灼烧目的如下表:,33,(2)灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连 (4)画线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破 3.稀释涂布平板 (
12、1)稀释操作时:每支试管及其中9 mL水移液管均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰12 cm处,34,(2)涂布平板时: 涂布器用70%酒精消毒,取出时,多余酒精在烧杯中滴尽,沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃 不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精 酒精灯与培养皿距离要合适,移液管头不要接触任何物质,35,【例析2】 回答下列问题:(1)大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑_和渗透压等条件由于该细菌具有体积小结构简单变异类型容易选择_等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料,温度,酸碱度,易培养,生活周期短,36,(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌
13、污染,需对培养基和培养器皿进行_(消毒灭菌);操作者的双手需进行清洗和_;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_ (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作多次重复外,还应保证待测样品稀释的_,灭菌,消毒,损伤DNA的结构,比例合适,37,(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状大小等菌落特征对细菌进行初步的_ (5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染对于固体培养基应采用的检测方法是_,鉴定(或分类),将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,38,(6)若用大肠杆
14、菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过_处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散,灭菌,解析 大肠杆菌体积小结构简单变异类型容易选择,易培养,生活周期短,常作为遗传学研究的实验材料微生物培养操作中要保证在无菌条件中进行,39,【互动探究2-1】 关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,下列叙述错误的是 ( ) A.操作顺序为计算称量溶化倒平板灭菌 B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C.待培养基冷却至50左右时进行倒平板 D.待平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置,40,解析 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算称量溶化灭菌倒平板,不能颠倒牛肉膏容易吸潮,所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离
15、后,用玻璃棒取出称量纸待培养基冷却到50,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手,并且培养基处于溶化状态平板冷却几分钟后还需倒置 答案 A,41,【互动探究2-2】 下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答:,42,(1)蛋白胨在培养基中的作用是_ (2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基,还需添加的成分是_ (3)表中各成分含量确定的原则是_,提供碳源氮源生长因子,琼脂(或凝固剂),所培养微生物对各营养成分的需要量,43,(4)培养基配制好后,分装前应进行的工作是_ (5)从配制培养基到培养完成,所采用的预防杂菌感染的方法是_ (6)若培养所用的培养基为平板培养基,将菌种接种到平板上的方法常用的有_,调pH,高
