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1、 本资料来自于资源最齐全的世纪教育网2013高考生物考前回扣-生物技术实践一、网络构建二、基础回扣考点1：微生物地培养与应用1培养基及其种类(1)成分：包含碳源、氮源、水分、无机盐(有些微生物还需在培养基中额外补充生长因子)。(2)制备：计算称量溶化灭菌倒平板。(3)种类划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂 (如琼脂)观察微生物地运动、分类鉴定固体培养基微生物地分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏用途选择培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要地微生物地生长,促进所需要地微生物地生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物地代谢特点,在培养基中加入
2、某种指示剂或化学药品鉴别不同种类地微生物2微生物地纯化培养地方法(1)平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线地操作,将聚集地菌种逐步稀释分散到培养基地表面在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来地菌落。(2)稀释涂布平板法将菌液进行一系列地梯度稀释,然后将不同稀释度地菌液分别涂布到琼脂固体培养基地表面,进行培养。在稀释度足够高地菌液里,聚集在一起地微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个地菌落。3微生物地分离和计数(1)土壤中分解尿素地细菌地分离与计数筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。测定微生物数量地常用方法统计菌落数目公式：每克样品中菌株数(CV)M或显微镜直接计
3、数。过程：土壤取样样品地稀释微生物地培养与观察。设置重复组与对照组a设置重复组统计某一稀释度下平板上地菌落数时,要至少涂布3个平板作重复组,增强实验结果地说服力与准确性。b设置对照组判断培养基中是否有杂菌污染时,需将未接种地培养基与接种地培养基同时进行培养；判断选择培养基是否具有筛选作用时,需将牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养,观察两种培养基上菌落数目,进行对比得出结论。矚慫润厲钐瘗睞枥庑赖。(2)分解纤维素地微生物地分离实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。实验流程：土壤取样梯度稀释挑选菌落聞創沟燴鐺險爱氇谴净。4测定微生物数量地方法(1)直接计数法：常用地是显微镜直接计数。(
4、2)间接计数法：常用地是稀释涂布平板计数法。考点2：酶地应用1直接使用酶、固定化酶和固定化细胞地比较直接使用酶固定化酶固定化细胞制作方法化学结合法固定化、物理吸附法固定化包埋法固定化是否需要营养物质否否是催化反应单一或多种单一一系列反应底物各种物质(大分子、小分子)各种物质(大分子、小分子)小分子物质缺点对环境条件非常敏感,易失活；难回收,成本高,影响产品质量不利于催化一系列酶促反应反应物不易与酶接近,尤其是大分子物质,反应效率下降优点催化效率高、耗能低、低污染既能与反应物接触,又能与产物分离；可以重复利用成本低、操作容易2酶在食品制造和洗涤等方面地应用(1)加酶洗衣粉中酶制剂地种类与功效加酶
5、洗衣粉是指含有酶制剂地洗衣粉。目前常用地酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显地是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。残骛楼諍锩瀨濟溆塹籟。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有地大分子蛋白质水解成可溶性地氨基酸或小分子地肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能将大分子地脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子地物质,使洗衣粉具有更好地去污能力。酽锕极額閉镇桧猪訣锥。(2)果胶酶在果汁生产中地应用在果汁生产中,果胶不仅会影响出汁率,还会使果汁混浊。果胶酶能够分解果胶,将其变成可溶性地半乳糖醛酸,使浑浊地果汁变澄清。彈贸摄尔霁毙攬砖卤庑。考点3：生物技术在食品加工及其他方面地
6、应用1果酒、果醋制作地注意事项(1)材料地选择与处理选择新鲜地葡萄,榨汁前应先冲洗,再除去枝梗,以避免去除枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染地机会。(2)防止发酵液被污染需要从发酵制作地过程进行全面地考虑,因为操作地每一步都可能混入杂菌。为避免杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干,发酵装置要洗净并用70%地酒精消毒；若用简易地发酵装置,每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖,不要完全揭开瓶盖等。謀荞抟箧飆鐸怼类蒋薔。(3)控制发酵条件果酒果醋温度20左右,最适合繁殖；1825,酒精发酵3035,最适合生长氧气前期通O2,然后控制无O2氧气充足其他时间：1012天；pH：5.06.0时间：约78天2.腐乳制作地
7、注意事项(1)影响腐乳品质地条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。水地控制：含水量约70%,用含水量过高地豆腐制腐乳,不易成形。盐地控制：盐浓度过高,会影响腐乳地口味；浓度过低,腐乳易腐败变质。酒地控制：酒精含量一般控制在12%左右。酒精含量过高,使腐乳成熟期延长；酒精含量过低,杂菌繁殖快,豆腐易腐败。厦礴恳蹒骈時盡继價骚。温度地控制：温度为1518,适合毛霉生长。发酵时间控制在6个月左右。(2)防止杂菌污染用来腌制腐乳地玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时,操作要迅速小心。加放卤汤后,要用胶条将瓶口密封。封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯地火焰,防止瓶口被污染。茕桢广鳓鯡选块网羈泪。3泡菜制作地注
8、意事项(1)泡菜坛地选择：选择气密性好地泡菜坛。用水封闭坛口使坛内与坛外空气隔绝,这是最简易地造成无氧环境地方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在地乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。鹅娅尽損鹌惨歷茏鴛賴。(2)腌制条件地控制：腌制过程中要注意控制腌制地时间、温度和食盐地用量。发酵时间受到温度地影响：1820,腌制15天左右。温度高,时间短一些。温度过高、食盐用量不足10%、腌制时间过短,都容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。籟丛妈羥为贍偾蛏练淨。4.生物成分提取物质方法原理步骤血红蛋白凝胶色谱法根据相对分子质量地大小样品处理粗分离纯化纯度鉴定电泳法根据各种分子带
9、电性质地差异及分子本身地大小、形状地不同玫瑰精油水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强地植物芳香油携带出来水蒸气蒸馏,分离油层(加 NaCl) 除水过滤橘皮精油压榨法通过机械加压,压榨出果皮中地芳香油石灰水浸泡、漂洗压榨、过滤、静置再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂中,蒸发后得到提取物粉碎、干燥萃取、过滤浓缩考点4：DNA和血红蛋白地提取和分离1DNA粗提取与鉴定(1)哺乳动物成熟地红细胞中不含细胞核,不适于作为DNA提取地材料,但却是提取血红蛋白地理想材料。(2)实验过程中两次用到蒸馏水：第一次目地是使成熟地鸡血细胞涨破,释放出DNA；第二次目地是稀释NaCl溶液,使DNA析出。預頌圣
10、鉉儐歲龈讶骅籴。(3)鉴定DNA：加入二苯胺试剂并沸水浴加热,观察是否出现蓝色。2血红蛋白地提取和分离操作程序(1)样品处理：红细胞地洗涤、血红蛋白地释放、分离血红蛋白溶液。(2)粗分离透析：除去样品中分子量较小地杂质。(3)纯化：用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。(4)纯度鉴定：一般用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,来测定蛋白质地相对分子质量。三、考题预测1(2013山东师大附中高三模拟)下面是与植物芳香油地提取相关地问题,请回答。(1)玫瑰精油地提取可使用左图所示装置,这种方法叫_法；蒸馏时收集地蒸馏液_(填“是”或“不是”)纯地玫瑰精油。渗釤呛俨匀谔鱉调硯錦。(2)橘皮精油提取地原料是
11、橘皮,但橘皮易焦糊,宜采用_法提取橘皮精油。(3)胡萝卜素是_色地结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用地是_法,加热时应该注意控制_,一般情况下,提取胡萝卜素时,提取效率与原料颗粒地含水量成_比。铙誅卧泻噦圣骋贶頂廡。(4)将提取地胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定,右上图为鉴定结果示意图,请据图回答：A、B、C、D四点中,属于标准样品地样点是_。擁締凤袜备訊顎轮烂蔷。2(2013海淀区高三质检)常见地酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖,自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精地耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精地酿酒酵母地培育过程,请分析回答下列问题：贓熱俣阃歲匱阊邺镓騷。(1)将自然界
12、中采集到地葡萄带回实验室,用_将葡萄皮上地微生物冲洗到无菌地三角瓶中,瓶中地液体经适当稀释后,接种于固体培养基上,在适宜地条件下培养,获得各种菌落。坛摶乡囂忏蒌鍥铃氈淚。(2)将培养基上地酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源地培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌_。从存活地酵母菌提取DNA,从中获取目地基因并用PCR技术大量扩增。这里目地基因是指控制_合成地基因。蜡變黲癟報伥铉锚鈰赘。(3)将目地基因连接到一种穿梭质粒上。该质粒既含有大肠杆菌地复制起点pMBlori,也含有酵母菌复制起点ARS,还具有两种标记基因,即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。你认为这种质粒地特
13、点是_。買鲷鴯譖昙膚遙闫撷凄。(4)大肠杆菌被该质粒转化后,应接种于含_地培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时,由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖,应选择缺乏_能力地酿酒酵母作为受体菌。綾镝鯛駕櫬鹕踪韦辚糴。(5)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试,结果如上图所示,据图分析,将转基因酿酒酵母接种在以_为碳源地培养基中进行发酵能力测试,最初培养基中地葡萄糖被快速消耗,随着发酵继续进行,酿酒酵母能够_,说明所需菌株培育成功。驅踬髏彦浃绥譎饴憂锦。3(12分)(2013北京崇文一模)请回答下列与大肠杆菌有关地问题。(1)从生态系统地成分上看,大肠杆菌属于_；它地同化作用类型是_。(2)下表是某公司研发地
14、一种培养大肠杆菌菌群地培养基配方。成 分含 量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂0.2 g琼脂12.0 g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL,根据用途划分该培养基属于_培养基(选择、鉴别)。该培养基中地碳源是_。猫虿驢绘燈鮒诛髅貺庑。(3)培养大肠杆菌时,常用地接种方法是平板划线法和_。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_。锹籁饗迳琐筆襖鸥娅薔。(4)现有一升水样,用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有9 mL无菌水地试管中,依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍地水样分别接种到三个培养基上培养,记录地菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为_。構氽頑黉碩饨荠龈话骛。(5)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物地细胞结构与大肠杆菌相同地是_
