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1、.,1,牡丹江医学院附属红旗医院 杨正亮,脑脊液检测的实验室方法评价,.,2,内 容,标本采集 一般性状检查 化学检查 显微镜检查,.,3,脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)是存在于脑室及蛛网膜下腔内的一种无色透明液体,大约70%来自脑室系统脉络膜丛的超滤和分泌,其余由脑室的室管膜和蛛网膜下腔所产生,通过蛛网膜绒毛回吸收入静脉。正常成人:90-150ml,新生儿:10-60ml。CSF主要功能: 保护脑和脊髓免受外界损伤 调节颅内压力变化 供给脑、脊髓的营养物质,并运走代谢产物 调节神经系统碱储量,维持正常PH值,.,4,一、标本采集,腰椎穿刺术 小脑延髓池穿刺:蛛网膜下
2、腔梗阻 脑室穿刺:婴儿 第一瓶:因常混入血液,用作细菌学检查 第二瓶:用作化学和免疫学检查 第三瓶:细胞学检查,.,5,一般性状检查:,1、颜色:正常为无色透明液体,病理情况下可呈现各种异常色泽 (1)红色:常因出血引起,.,6,一般性状检查:,.,7,2、透明度:清澈:正常 混浊:细胞数增加;细菌繁殖 混浊的程度因疾病的轻重或性质不同而不同 细胞数轻度增多:日光微尘现象(病毒性脑膜炎、流行性乙型脑炎) 细胞数中度增多:毛玻璃样混浊(结核性脑膜炎) 细胞数显著增多:明显混浊(化脓性脑膜炎),一般性状检查:,.,8,3、凝固物: 正常CSF静置24h不会凝固,如果发生凝固,则为病理现象。凝固主要
3、有三种形式: 蛛网样凝固:结核性脑膜炎(将CSF静置一夜,于液面形成纤细凝块,此膜涂片检查结核杆菌,阳性率高) 块状凝固:化脓性脑膜炎(CSF抽出1-2h形成明显凝块) 胶样凝固:CSF浓缩(脊髓肿瘤、蛛网膜下腔梗阻),一般性状检查:,.,9,1、蛋白质 健康人脑脊液蛋白质含量较血浆低,约为血浆的1%,主要为清蛋白。在中枢神经系统发生病变时,脑脊液蛋白质种类和含量可有不同程度的变化。脑脊液蛋白质检查可分为定性检查和定量检查。 【检测原理】 (1)蛋白质定性检查:常用方法有Pandy试验、硫酸铵试验(包括Ross-Jone试验和Nonne-Apelt试验)和Lee-Vinson 试验。,化学检查
4、,.,10,化学检查,.,11,(2)蛋白质定量检查:脑脊液蛋白定量检查主要方法有磺基水杨酸-硫酸钠比浊法、双缩脲法和染料结合法。,本实验室检测原理:(比色法),Cu2+-偶氮复合物+蛋白质 Cu2+-蛋白质复合物+偶氮染料,LiOH,化学检查,.,12,化学检查,.,13,2、葡萄糖测定: CSF中葡萄糖来自血糖,约为血糖浓度的2/3(60%),其含量受血糖浓度、血脑屏障通透性及脑脊液中糖分解速度的影响。 参考区间:2.5-4.5mmol/L 临床意义:糖含量减少有重要的意义 化脓性脑膜炎:明显减少或缺如,敏感性55% 结核性脑膜炎:中度减少 脑膜白血病、梅毒性脑膜炎:轻度减少,化学检查,.
5、,14,化学检查,.,15,3、氯化物测定,正常脑脊液氯化物约为血浆氯化物含量的1.21.3倍。脑脊液中氯化物含量受脑脊液自身理化性质、血浆氯化物含量及血液pH值的影响。 参考值:120130mmol/L,化学检查,.,16,化学检查,.,17,细胞学检查 【检测原理】 1细胞总数计数 (1)仪器计数法:体液细胞分析仪可自动分析计数细胞。 (2)显微镜计数法:脑脊液白细胞总数显微镜计数法见表7-14-1。,显微镜检查,.,18,显微镜检查,.,19,2白细胞计数 (1)仪器计数法:体液细胞分析仪可自动分析计数细胞。 (2)显微镜计数法:脑脊液白细胞显微镜计数法 见下表。,显微镜检查,.,20,
6、3白细胞分类计数 (1)仪器分类法:体液细胞分析仪可用于白细胞分类计数。 (2)显微镜分类法:高倍镜下根据细胞形状和细胞核的形态进行分类,共计数100个有核细胞,分别计算单个核细胞和多个核细胞所占的比例,以百分数表示。 (3)染色分类法:脑脊液标本离心后,取沉淀物制备涂片(均匀薄膜),干燥后行Wright染色,油镜下分类计数,结果以百分率表示。如有内皮细胞,需要另作描述并报告。,显微镜检查,.,21,【质量保证】 1细胞计数 血性标本的白细胞计数的校正:混有血液的脑脊液标本混匀后,用1%的冰乙酸溶液稀释后计数。为了排除因出血而带来的白细胞,可用以下公式进行校正: 2染色分类法 离心速度不宜过快、时间不宜过长,以减少脑脊液细胞的破坏和变形。细胞涂片应均匀集中,以利于观察。,显微镜检查,.,22,【参考区间】 红细胞:无; 白细胞:成人(08)106/L, 儿童(015)106/L; 有核细胞分类:淋巴细胞:单核细胞 (73) 偶见内皮细胞。,脑脊液淋巴细胞,脑脊液中性粒细胞,.,23,.,24,.,25,.,26,.,27,谢谢大家!,/10/29,.,28,