实验六次溴酸钠法测定海水中的氨-氮课件

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1、实验六 次溴酸钠法测定海水中的氨-氮,海水中的营养元素: 氧、碳、氮、磷、硅等主要元素,还有铁、锰、铜、钼等微量元素,氮化合物在海洋中的存在形态: NH4+(NH3)、NO2-、NO3-三种无机化合氮 溶解有机氮化合物 不溶于海水的颗粒氮 其中无机氮化合物是海洋植物最重要的营养物质,3. 吸光光度法 原理:在一定的实验条件下,物质对光的吸收与物质的浓度成正比。 显色剂: 波长的选择:,孔雀绿的吸收光谱,7.2.1 吸光分析的几种方法,目视比色法,特点,利用自然光,比较吸收光的互补色光,准确度低(半定量),不可分辨多组分,方法简便,灵敏度低,光电比色法,分光光度法(紫外-可见分光光度法)UV-V

2、IS,Ultraviolet Visual Spectroscopy,光源,单色器,吸收池,检测器,显示,实验原理: 在碱性条件下,以次溴酸钠为氧化剂,将海水中的氨氧化为亚硝酸盐,亚硝酸盐在一定的pH值下与磺胺及盐酸萘乙二胺作用形成深红色偶氮染料,于543毫微米波长处进行光度测定。,使用液,注意:氧化剂储备液,实验步骤:工作曲线的制作,1 分别移取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升NH4Cl标准使用液于6个比色管,用人工海水稀释至刻度线(溶液浓度分别为0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00微克氨/升),3 用移液管依次加入5毫升氧化剂(以次溴酸钠)使用液,混匀放置3

3、0分钟,2 量取2份水样于50毫升比色管中,管上做标签,与1一起做下面步骤,5 用移液管依次加入5毫升磺胺溶液,混匀放置5分钟,6 用移液管依次加入1毫升盐酸萘乙二胺液,混匀放置10分钟,7 在分光光度计上543毫微米波长处测量1的吸光值A,未加NH4Cl溶液的吸光值为空白吸光值Ab, 样品的吸光值AW, NO2-N 的吸光值A NO2-N,4 量取2份水样于50毫升比色管中,管上做标签,与前面的一起做下面步骤,来测定海水中的NO2-N,NH4+ 浓度,A-Ab,7 以1的NH4-N浓度和A-Ab为横纵坐标作图,得到工作曲线,8 水样的NH4-N吸光值为: A(NH4-N ) =AW-Ab-

4、A NO2-N,9 根据A(NH4-N ) 在工作曲线上查出水样氨-氮的浓度,721型分光光度计的使用方法 1 用调波长的旋钮调波长至543毫微米 2 将上面的盖子打开,用中间的调零旋钮调透光值至零 3 将里面盛比色皿的盒子拿出来 4 用手拿比色皿的侧面(避免用手接触光面),用蒸馏水里外冲洗两次,5 最里面的比色皿盛蒸馏水(80%满),剩下的三个由颜色浅到深的顺序盛样品,在盛之前要用样品润洗相对应的比色皿2次,然后盛入对应的样品(80%满)。 6 先用滤纸擦比色皿外面一遍,然后用擦镜纸擦干净(特别是光面),按顺序放入盛比色皿的盒子中(放正),用盒子上的铁皮固定好,7 将盒子放入分光光度计内,注意和下面固定孔对好,盖住分光光度计的盖子 8 在蒸馏水位置,旋转100%旋钮调透光值至100%,然后测样(向里一个一个推),读吸光值。 9 测完后将比色皿内的废液倒出,用蒸馏水内外冲洗两次,桌上铺一张滤纸,将比色皿倒放上面晾干。,

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