《实验1 微生物实验室规则 实验2培养基配制及灭菌课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验1 微生物实验室规则 实验2培养基配制及灭菌课件（28页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、,微生物学实验,华侨大学化工学院,华侨大学化工学院,实验1 微生物实验室规则、工作环境要求、实验记录、常用器皿材料和仪器设备,微生物实验的意义、研究进展和实验内容,一、研究内容 研究微生物的形态、结构、生理生化、遗传变异、微生物与其他生物、与自然界之间的关系 1. 机理研究：微生物适应环境的机制，鞭毛运动的机理等 （是生化和分子生物学研究的重要研究内容和研究材料。）,2. 微生物与实际应用,微生物与发酵工程 微生物与环境工程 微生物与农业 微生物与医学领域 微生物与食品工业,二、微生物学研究进展,微生物基因组学研究（Microbial Genomics） 不可培养微生物（Uncultured
2、Microorganisms ） DNA芯片（DNA Chip） 三域学说（Bacteria, Archae,Eucaryote）,三、微生物学与Nobel奖,到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关参考：沈萍教授微生物学绪论部分Nobel获奖者。,四、如何进行微生物学实验,严肃认真 科学态度 分析问题 搞清原理,五、微生物实验安排与考核,平时表现、基础实验：10+30% ，一次考试 考试：60%,课堂纪律,严格遵守实验室规章制度 严肃课堂纪律 不允许无故旷课、早退 迟到（3次）,实验室安全和卫生,安全 实验室严禁吸烟。 注意用水、用电和防火 正确使用化学试剂和仪器
3、正确清洗器具 禁止在实验室吃东西及饮水 实验废弃物分类处理，勿污染环境 卫生 每次实验需留下4位同学值日，协助保 持实验室清洁（班长及生活委员安排）,实验预习报告及实验结果,目的 原理 步骤 结果及分析 学习委员（报告批改后返给同学修改，再收回留档，统计分数）,分组及各组器皿清单,每组器皿清单 酒精灯1个/人 镊子 1把/人 培养皿 5套/组 三角瓶（250 ml） 2套/组 烧杯（250 ml）1个/组 载波片 10片/组,废液缸1个/组 接种针/环1把/组（或人） 玻棒 2根/组 试管 6个/组 试管架 1个/组 绳子 2段/组 蒸馏水瓶带滴管 1套/组,2人一组（最后一组3人）（按学号）
4、,用后各自清理保管。损毁或丢失，找实验室管理老师登记赔偿并补领,实验2 微生物营养成分配制和消毒灭菌技术,一、目的要求,1、了解培养基制备原理，掌握培养基制备方法。 2、掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的原理和方法。 3、学会培养皿、瓶口的包扎。,（二）灭菌原理,1 干热灭菌原理（蛋白质凝固变性） 一般繁殖体80100，1 h 芽孢160170，2 h 180 ,2 湿热灭菌原理高压蒸汽灭菌,在密闭的蒸锅内，锅内温度达121， 15 min30 min，可以很快杀死各种细菌及 其高度耐热的芽孢（蛋白凝固变性）。,优点？,三、实验器材,1、材料 琼脂粉、酵母膏（粉）、蛋白胨、NaCl等。 2、设备 天
5、平（6台）、称量纸、量筒、玻璃注射器（3-5把）、烧杯、玻璃棒、pH试纸、标签，纱布（8层纱布，包扎瓶口用，每组1份）、报纸、三角瓶、绳子、试管及试管塞、酒精灯、火柴、药勺（4把）、高压蒸汽灭菌锅（1台）、烘箱（1台）、电热板（6台）等。,四、操作步骤,（一）培养基的制备 LB培养基(Luria-Bertani medium)为例,（试管 4-5ml；剩余装入三角瓶 ）,倒平板（5个）搁置斜面（4个 ）,干热或湿热,制备LB平板 待培养基冷却至45-60 （不烫手）时，于酒精灯火焰无菌区均匀倒入培养皿中（每个约20 ml），冷却后凝固成固体胶状平板（LB平板）。 搁置斜面：适当冷却后便可将试管
6、口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，斜面长度不超过试管总长的1/2为宜。,每人携带2个平板，自己设计实验，分离培养微生物。倒扣培养，尽可能密封。注意观察，将实验结果简单描述。（采集的样品、生长的状况时间，快慢、种类和数量是否可区分，各多少），交给学习委员，下次课分享。,（二）灭菌,干热灭菌操作步骤： （1）用报纸条包好干燥的培养皿。 （2）将待灭菌物品均匀放入烘箱内。 （3）开启电源，设定温度和时间（ 160170，2小时 ）。 （4）切断电源，待温度降至70以下时，打开箱门，取出灭菌物品。,湿热灭菌操作步骤：,1、灭菌物准备 2、高压蒸汽灭菌 （1）加水 （2）装锅 （3）接通热源，设置参数（ 121，15min30min ） （4）升压、升温 （5）切断电源 （6）取出灭菌物 （7）待培养基冷却后置于37恒温箱内培养24 h，若无菌生长则放入冰箱或阴凉处保存备用。,五 思考题,1、培养微生物的培养基应具备哪些条件？ 2、为什么培养基配制好后必须立即灭菌？采用那种灭菌方式？ 3、为什么高压蒸汽灭菌时要先将冷空气排尽？ 4、还有哪种灭菌方式属于干热灭菌？ 5、紫外线灭菌的原理是什么？3方面 6、过滤除菌一般用多大孔径的滤膜？,六 设计题,1、为什么干热灭菌比湿热灭菌所需要的温 度高，时间长？请设计干热灭菌和湿热 灭菌的效果比较实验方案。,
