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1、1,.,实验一 视野及盲点的测定,【目的要求】 1、学习视野的测定方法，了解测定视野意义 2、证明盲点的存在，并计算盲点所在位置和 范围,2,.,【基本原理】 1、视野： 视野是单眼注视正前方一点时，所能看到空间范围。测定视野有助于了解视网膜，视觉传导通路及视中枢功能。正常人的视野范围鼻侧和额侧较窄，颞侧与下侧较宽。在相同亮度下，白色视野最大，红色次之，绿色最小，这可用特殊的仪器视野计测定。 2、盲点： 在视神经离开视网膜的部位（即视神经乳头所在部位）没有感光细胞，外来光线成像于此不引起视觉，故称为生理盲点。由于盲点的存在，视野中也必然存在盲点投射区，根据物体成像规律，通过测定盲点投射区，可计
2、算盲点所在的位置和范围。,3,.,【实验器材】 视野计、视标、米尺、遮眼板、视野图纸、铅笔、白纸。,4,.,【实验步骤】 （一）视野的测定： 1、熟悉视野计结构及使用方法。 2、在光下，被测者下颌放于视野计托颌架上，眼眶下缘靠在眼眶托上，调节托颌架高度，使眼与弧架上小镜子在同一水平，遮住一眼，另一眼始终注视小镜子。 3、测者从弧架周边向中央慢慢移动白色视标，随时询问被侧者是否看见了白视标。当被测者说看到时，再将视标倒移一些，然后再向中央移动，如此反复一次。待测出一致结果后，记下弧架上度数，并标在视野图纸上。 4、将弧架依次转动45 ， 重复上边测定，得8个度数。将视野图纸上8个度数依次连接就得
3、白色视野范围。 5、按上述方法测出该眼一彩色视觉视野。,5,.,（二）、盲点的测定： 1、取白纸一张帖在墙上，在纸上与眼相平处画一“+”字 2、被测者立于纸前50cm处，用遮眼板遮住一眼，令受试者一只眼注视“+”字。实验者将黑色视标由“+”字中心向被测者颞侧移动。此时受试者被侧眼直视前方，不得转动。当受试者恰好看不见视标时，在白纸上标记视标位置。然后将视标继续向颞侧移动，直至又看见视标时记下其位置。这两点间的距离就是水平方向该眼盲点的投射直径。 3、从上述两个记号的中点起，沿各方向移动视标。指出并记下视标不能看到与能看到的交界点，然后以曲线连接各点，即得出一个不规矩椭圆圈，此区即为该眼盲点的投
4、射区。,6,.,4、根据相似三角形各对应边成比例定理，可计算 盲点与中央凹的距离及盲点直径。 盲点直径=盲点投射区的直径15/500 盲点与中央凹的距离（mm）= 盲点投射区与十字距离15/500,7,.,【注意事项】 1、测试颜色视野时，须以看清颜色为准。 2、照明要始终一致，被测试者必须背光而立，视野计背景最好是黑暗颜色。 3、测试一项后，受试者可稍微休息，以免眼睛疲劳而影响实验结果。 4、被测眼要与“+”字符号处于同一水平，并始终注视“+”字符号。,8,.,【参考值】 1、生理性盲点投射区呈椭圆形，垂直径7.5cm2cm，横径5.5cm2cm。 2、生理性盲点投射区在注视中心外侧15.5
5、cm，在水平线下1.5cm。 【思考题】 实验证明两眼都存在盲点，为什么平时我们注视物体时，却没有感到盲点的存在？,9,.,实验二、血红蛋白含量测定及血型的鉴定 （一）血红蛋白含量的测定,目的要求： 掌握测定血红蛋白含量的基本方法比色法,10,.,实验原理： 测定血红蛋白的方法很多，种沙里（sahli）比色法是其中一种。血红蛋白本身的色泽，常随所结合的氧量多少而改变，不便于比色。沙里比色法是用少许稀盐酸加入一定量血液中，酸不仅使红细胞膜破坏，而且使原来位于红细胞内亚铁血红素转变成高铁血红素，后者呈较稳定的棕色。将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白测定计的标准色进行目测比色，即得每100ml血液所含的血
6、红蛋白数或百分率。,11,.,实验器材： 血红蛋白计、采血针、蒸馏水、0.1M HCL、一次性20ul定量毛细取血管、滴管、玻璃棒、75%酒精棉球、乙醚,12,.,实验方法与步骤： 1、了解血红蛋白计的构造： a、标准比色架 b、血红蛋白稀释管,13,.,2、用蒸馏水将血红蛋白（Hb）稀释管洗净，干燥备用。 3、用滴管加0.1M Hcl于血红蛋白稀释管内，到刻度“2%”或“10%”处。 4、采血：常规消毒指尖，用一次性刺血针刺破无名指尖。拭去第一滴血，待第二滴血流出一大滴时，用一次性毛细取血管吸血至刻度20ul（0.02ml即20 mm3）处。,14,.,5、血液与盐酸完全反应：使Fe2+ F
7、e3+(置10分钟)。 6、透光比色 7、加蒸馏水至颜色同标准色柱,15,.,注意事项： 1、吹血液入稀释管及洗净吸管时，应插入液面内，吹时不宜用力过猛，以免产生气泡。 2、蒸馏水逐滴加，以免过量稀释，玻璃取出比色。 3、一定要准确掌握进入稀释管内血液量（20ul）。,16,.,实验结果及分析： 附： 我国成年人Hb正常值：男：120160g/L或1216g/100ml血液 女：110150 g/L或1115 g/100ml血液 新生儿含量可达20g/100ml 以后减少，23个月最低，达9.5g. 思考题： 1、测定Hb含量实际意义？Hb具有什么功能？,17,.,（二）血红蛋白含量的测定,目
8、的要求： 1、学习鉴定血型的方法 2、观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型鉴定的原理,18,.,实验原理： 血型是指红细胞的血型，是根据存在于红细胞膜外表面特异性抗原（镶嵌于红细胞膜上特异性糖蛋白）来确定的，这种抗原或凝集原由遗传基因决定。血清中抗体或称凝集素，可与红细胞膜上不同的相应抗原结合，产生凝集反应，最后发溶血。由于这种现象，临床上在输血前必须进行鉴定血型，以确保安全输血。人类红细胞上已发现20多种血型系统。其中最常用最重要的是ABO血型系统，其次为Rh系统。本次实验介绍ABO血型鉴定。,19,.,实验步骤：玻片法 1、先取双凹玻片，标好姓名、A、B，然后滴加抗A、抗B血清各一滴，取牙签
9、一支，用其两头蘸血分别在A、B血清中搅拌，置015分钟后观察凝血现象。,20,.,结 果： 抗A凝集抗、B不凝集 A型血 因红细胞上有A 抗原 抗B凝集、抗A不凝集 B型血 因红细胞上有B 抗原 抗A、抗B凝集 AB型血 因红细胞上有A、B 抗原 抗A、抗B不凝集 O型血 因红细胞上无抗原,21,.,注意事项： 1、注意消毒，防止穿刺部位皮肤感染。 2、肉眼看不清楚凝集现象时，应在低倍显微镜下观察。 3、红细胞悬液和血清应新鲜，因污染可产生假凝集现象。,22,.,思考题： 1、已知某人为A型（或B型）血，在无标准血清情况下，可否对其他人进行ABO血型鉴定？如何进行？ 2、如何区别血液中凝集与凝
10、固，其机理是否一样？ 参考： 许多学者调查表明：中国人血型分别O型30.77% 、 A型 27.07%、 B型32.48%、AB型9.67%,23,.,实验三 人体动脉血压的测定及其影响因素 【实验目的】 1、学习并掌握间接法测定动脉血压的原理和方法，测定人体肱动脉的收缩压与舒张压。 2、了解影响动脉血压的因素。,24,.,【实验原理】 通常血液在血管内流动时并没有声音，但外加压力使血管变窄形成血液湍流时，则可发生所谓的“血管音”。测压时，用压脉带在上臂或手腕加压，当外加压力超过动脉的收缩压时，动脉血流完全被阻断，此时在动脉处听不到任何声音。当外加压力等于或稍低于动脉内的收缩压而高于舒张压时，
11、则在心脏收缩时，动脉内可有少量血流通过，而心室舒张时却无血流通过。血液断续地通过血管时，会发出声音。故恰好可以完全阻断血流的最小外加压力(即发生第一次声音时的压力)相当于收缩压。当外加压力等于或小于舒张压时，血管内的血流连续通过，所发出的音调会突然降低或声音消失。在心室舒张时有少许血流通过的最大管外压力(即音调突然降低时的压力)相当于舒张压。 在正常情况下，人或哺乳动物的血压是通过神经和体液调节保持其相对的稳定性，但是血压的稳定是动态的。人体的体位、运动、呼吸、温度以及大脑的思维活动等因素对血压均有一定影响。,25,.,【实验器材】 血压计、听诊器、节拍器、冰水 【方法与步骤】 1、受试者准备
12、 2、放空压脉带 3、裹扎压脉带 4、放置听诊器 5、测量收缩压/舒张压,26,.,6、观察诸多因素对动脉血压的影响 ： （1）加深加快呼吸频率对血压的影响 记录正常血压后，令受试者加深加快呼吸（是正常频率的1倍）1 min测压。(2)情绪对血压的影响 （2）待血压恢复正常后，令受试者回忆其最气愤的往事 1分钟测压 （3）肢体运动对血压的影响 拉开压脉带与血压计相连的橡皮管接头（不要取下压脉带）。令缠好压脉带的受试者按节拍器节律以5060次/ min的速度连续做蹲起运动3min，结束后取坐位测定运动后的血压。 （4）冰水刺激对血压的影响 待受试者恢复平静，让其将手浸入冰水中1 min测血压。,
13、27,.,【注意事项】 1、室内需保持安静，以利于听诊。 2、袖带不宜绕得太松或太紧。 3、上臂中段与心脏在同一水平位，压脉带应缚于肘窝以上。 【思考题】 1、实验结果表明什么问题，为什么？ 2、测定动脉血压，为何上臂中段要与心脏在同一水平位？,28,.,29,.,实验四 红细胞的溶解溶血作用,【目的要求】 1、学习引起红细胞溶解的各种实验方法。 2、观察红细胞的溶血现象。,30,.,【基本原理】 红细胞在高渗NaCl溶液中，会失去水分发生皱缩；在低渗NaCl溶液中，会因过多水分进入红细胞而膨胀，甚至破裂，使血红蛋白释出，称为红细胞溶解。红细胞对低渗溶液具有不同的抵抗力，即红细胞具有不同的脆性
14、，对低渗溶液抵抗力小，表示红细胞的脆性大，对低渗溶液抵抗力大，则表示红细胞的脆性小。 各种有机溶剂、酸、碱等都会使红细胞的膜发生溶解，称为红细胞的化学性溶血。,31,.,【动物与器材】 鸡、离心机、试管（16支）、试管架、吸耳球、2ml移液管、一次性注射器（2ml或5ml）、滴管、0.75%NaCl、0.1M HCl、0.1MNaOH、乙醚、1%肝素、蒸馏水、171mMNaCl。,32,.,【方法与步骤】 方法1：渗透性溶血红细胞渗透脆性的测定 (1) 取试管12支，从112分别标记后，排列在试管架上,按 教材P65表31配制各种浓度的NaCl溶液 . (2) 5%红细胞混悬液制备:取鸡血4m
15、l，加入盛有1%肝素 0.4ml的离心管中，充分混合，放入离心机中，按3000r/min、离心5min。取出后，弃去上清液，加入生理盐水，混合后再离心，然后再弃去上清液。同法重复一次，即得洗涤之红细胞。用生理盐水配成5%红细胞混悬液。 每支试管加入5%红细胞混悬液一滴，轻轻摇匀后于室温下静置2h后观察各试管之溶血情况。,33,.,(3）结果判断 从高浓度管开始观察： 不溶血：上层无色、透明，下层红色浑浊； 开始溶血：上层红色、透明，下层红色、浑浊而不透 明； 完全溶血：全部液体变红且透明。,34,.,方法2：化学性溶血 取试管4支，各盛5%鸡红细胞混悬液2ml，分别加入下列溶液，并观察红细胞在
16、各试管中的溶解现象： 1） 0.75%NaCl 1ml 2） 乙醚 0.2ml 3） 0.1M HCl 1ml 4) 0.1MNaOH 1ml 半小时后，观察并记录各试管溶液血情况，注意颜色与透明度。,35,.,【注意事项】 1、试管编号排列顺序切勿弄错、颠倒。 2、小试管要干燥，加抗凝血的量要一致，只加一滴。 3、在进行渗透性溶血配液要准确、无误。 4、加入血液后，轻轻摇匀溶液，切勿剧烈震荡。 5、抗凝剂最好为肝素，其他抗凝剂可改变溶液的渗透性。 【思考题】 1、产生渗性溶血和化学性溶血的机制有什么不同？,36,.,实验五 坐骨神经腓肠肌标本制备,目的要求： 1、学习生理学实验基本的组织分离技术 2、学习蛙类动物双毁髓的实验方法。 3、学习蛙类坐骨神经-腓肠肌标本制备基本操作技术,.,37,实验原理： 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳动物有近
