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1、,菊花的组织培养,指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。,又称：植物离体培养,一、植物组织培养的概念,概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质,植物组织培养原理：,植物细胞的全能性,什么叫分化？其实质是什么? 什么叫脱（去）分化、再分化？ 愈伤组织的细胞有什么特点？ 如何控制细胞的脱分化与去分化？ ,阅读32页解决下列问题：,二、植物组织培养的基本过程,基因的选择性表达,二、植物组织培养的基本过程,愈伤组织,
2、三、影响植物组织培养的因素：,1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等,未开花植物的茎上部新萌生的侧枝,3、不同植物激素使用顺序,4、不同植物激素使用量,思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？,5、pH、温度、光照（菊花组培） pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h 6、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境,制备MS
3、固体培养基,外植体消毒,接种,培 养,栽 培,四、实验操作,移 栽,冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上,配制各种母液 配制培养基 灭毒,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格,课题延伸（略）,练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。,菊花的组织培养,再分化,材料性质、营养物质、 调节物质、环境条件,外植体的消毒,接种,基本原理:,细胞的全能性,基本过程:,脱分化,愈伤组织,影响因素：,操作流程：,配制MS固体培养基,培养,移栽,栽培,
