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1、.,中国动物疫病预防控制中心下属企业 北京世纪元亨动物防疫技术有限公司 哈尔滨元亨生物药业有限公司（生产基地）,移液器的使用方法和日常保养,孙博 2015.11.05,移液器工作原理：,常规的移液器技术规格,准确性 通常 +/- 1% 重复性 通常 0.25% 到 0.33% 一般情况下，微量移液器要稍差一些,准确性和重复性都差,准确性差但重复性高,准确性好而且重复性高,移液操作循环,排液及吹液, 不规范的移液操作可能带来0.1%到5%的移液误差，甚至更高！,移液操作相关技术,量程优化 吸头浸入 吸液 排液 一致性及手温影响,误差的影响,超过1的误差 所有操作者都需要注意 0.6% -1%的误
2、差 一般操作者视实验的要求自行注意 小于 0.5%的误差 校准操作者需要避免所有可能的误差,最佳的量程,通常的量程： 一般在 10% - 100% 量程范围内可以操作 在 10% 量程操作需要较高的操作技巧 最佳的量程： 选择35% - 100% 量程范围进行操作 对操作技巧依赖更少 保证移液的准确性和精度,10%,100%,35%, 选择合适的量程，可提高1%移液准确性！,量程设定,移液器量程的设定原则：由大到小！ 当由小量程到大量程时： 朝所需量程方向连贯旋转 旋转到达超过所需量程1/3圈处 回调到所需量程处 在量程设定过程中,不要将旋钮旋出最大量程, 否则可能会卡住内部机械装置而损坏了移
3、液器, 正确的量程设定可以提高0.5%的移液准确性！,吸头浸入角度,正确的吸头浸入角度,错误的吸头浸入角度,以正确角度进行吸液操作可提高0.5%的移液准确性 (微量程移液器可达 2.5%),吸头浸入深度,以正确吸头浸入深度进行吸液操作可提高1%的移液准确性 (微量程移液器可达 5%),深度,吸头浸入时间(针对大容量移液器),吸液后保持吸头浸入液面最少1秒 将吸头平缓移开液面 对吸取大容量样品或者高粘度样品尤为重要,吸液：润洗吸头,用同一样品对吸头进行润洗 先吸取样品，然后排回样品池或废液槽 润洗有助于提高吸头多次相同移液操作的一致性,润洗吸头可提高0.5%的移液准确性!,无润洗,无润洗 移取冷
4、冻样品 (例如 冰浴样品) 移取高温样品 (37oC) 可以考虑使用活塞外置式移液器,当样品温度很高或者很低时，切勿润洗吸头！,吸液速度的影响,保持平顺，控制好吸液速度 过快的吸液速度，导致： 样品液进入套柄 对活塞和密封圈造成损伤 带入气雾 造成样品交叉污染, 不正确的吸液速度会导致至少5%的准确性下降！,排液,常规排液操作 沿内壁排液（常规）, 正确的排液技术提高1的移液准确性,排液,常规排液操作 在液面上方排液,排液,常规排液操作 在液面下方排液,一致性,应保持吸液和排液节奏的一致性。 按压或释放按钮的速度平稳一致。 到达第一停止点的用力应保持一致。 吸头的浸入深度保持一致。 移液器倾斜
5、角度一致 达到最好的操作一致性 使用电动移液器，只需很少的人为操作, 操作的一致性可提高1的移液准确性,手温的影响,手温对移液误差的影响可以达到0.2%以上,小结：,正确的吸头安装方法,常见的错误安装方法 在将吸头套上移液器时，使劲地在吸头盒上敲几下。 可能导致地后果 1.移液器的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住 。 2.移液器套柄弯曲 正确的吸头安装方法: 单道移液器：移液器垂直插入吸头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合,如何防止液体进入套柄,利用带滤芯的吸头，它有内部疏水过滤器，避免气雾和液体进入套柄。 当吸头中有液体时，不要颠倒或平放移
6、液器。 缓慢吸液，握住移液器保持垂直或20度以内倾角。 量程在5ml和5ml以上的移液器，配合使用厂家提供的专用安全过滤器。,移液器正确的放置方法,1.如不使用，要把移液器的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态 以保护弹簧 2.使用完毕，尽量将其竖直挂在移液枪架或挂钩上，但要小心别掉下来。这种保管方式可以延长移液器的使用寿命.,定期测漏和校准,定期检查是否有漏液现象。简易的方法如下： 吸取液体后将移液器垂直放置在枪架上，静止15秒，观察吸头顶端是否有液滴 如果漏液，原因大致有一下几方面：1、吸头是否匹配；2、密封系统是否正常；3、如果是易挥发的液体（许多有机溶剂都如此），则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体，然后再移液。 比较专业的方法是使用瑞宁公司的测漏仪。 由厂家或专业机构提供定期的较准，通常一年一到两次,高粘度样品移液的窍门: 反向模式移液,适用于高粘度样品 不适用于水溶液 同常规移液操作相反的流程 第二零点吸液 第一零点排液,移液器的维护保养,.,敬请批评指正！,
