《备战2021届高考生物一轮专题复习：第2讲微生物的培养与应用-教案》由会员分享，可在线阅读，更多相关《备战2021届高考生物一轮专题复习：第2讲微生物的培养与应用-教案（19页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1 第 2 讲微生物的培养与应用 考纲要求核心素养 1.微生物的分离和 培养 2 培养基对微生物 的选择作用 3 某种微生物数量 的测定 科学探究 通过实验探究微生物培养的条件， 培养学 生针对特定的生物学现象，进行观察、提 问、实验设计、方案实施以及对结果的交 流与讨论的能力。 科学思维 通过分析培养基的成分及其作用， 比较平 板划线法和稀释涂布平板法的异同， 比较 鉴别培养基和选择培养基的异同， 提高分 析与综合的能力。 微生物的实验室培养 授课提示：对应学生用书第 186 页 基础突破抓基础，自主学习 1培养基 2无菌技术 (1)含义：培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 (2)
2、关键：防止外来杂菌的污染。 (3)无菌技术的方法 消毒：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。 2 灭菌：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 3大肠杆菌的纯化培养 4菌种的保存方法 (1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 (2)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 重难突破攻重难，名师点拨 1消毒和灭菌的比较 项目条件结果常用方法应用范围 消毒 较为温 和的物 理或化 学方法 仅杀死物 体表面或 内部的部 分微生物 煮沸消毒法日常用品 巴氏消毒法不耐高温的液体 化学药剂 消毒法 用酒精擦拭双手， 用氯气消毒水源 灭菌 强烈的 理化因素 杀死物体 内外所有
3、 的微生物， 包括芽孢 和孢子 灼烧灭菌法接种工具 干热灭菌法玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽 灭菌法 培养基及容器 2.纯化培养方法 方法平板划线法稀释涂布平板法 原理 通过接种环在琼脂固体培养基表 面连续划线的操作，将聚集的菌 种逐步稀释分散到培养基的表 面。在数次划线后培养，可以分 离到由一个细胞繁殖而来的肉眼 可见的子细胞群体，即菌落 将菌液进行一系列的梯度稀释， 然后将不同稀释度的菌液分别涂 布到琼脂固体培养基的表面，进 行培养。在稀释度足够高的菌液 里，聚集在一起的微生物将被分 散成单个细胞，从而能在培养基 3 表面形成单个的菌落 优点 可以观察菌落特征，对混合菌进 行分离 可以计数，
4、可以观察菌落特征 缺点不能计数 较复杂，平板不干燥效果不好， 需涂布多个平板 适用 范围 适用于好氧菌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 特别提醒 (1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养 基上形成。 (2)平板划线法只适用于微生物的纯化，不适用于微生物的计数，并且在最后一 次划线末端处的菌种最纯，进行平板划线应注意如下操作： 每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。 灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 划线时最后一块区域不要与第一区域相连。 (3)倒平板的温度一般在 50 左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 (4)平板需倒置，这样既可使培养基
5、表面的水分更好地挥发，又能防止皿盖上的 水珠落入培养基，造成培养基污染。 题型突破练题型，夯基提能 1下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错 误的是() 解析：倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右 手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的 杂菌污染，A 正确；左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速 伸入平板内，B 正确；不同区域内划线，而且每次转换划线角度后再进行划线， 让菌种来源于上一次划线末端， C 正确； 下一次划线没有从上一次划线末端开始， D 错误。 4 答案：D 2下列有关平板划线的
6、操作中，不正确的是() A将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红 B接种环在平板上划线位置是随机的 C在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰 D最后将平板倒置，放入恒温箱中培养 解析：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精 灯火焰的燃烧层充分灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A 正确；在平板划线时，要划 35 条平行线，不是随机的，B 错误；在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管 口通过火焰，C 正确；将平板倒置放在恒温箱中培养，D 正确。 答案：B 3用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时() 都需要用固体培养基都需要使用接种针进行接种 都需要在火焰旁进行接种都可以用
7、菌落数来计数活菌 AB CD 解析：固体培养基上可以获得大肠杆菌的单菌落，正确；分离纯化大肠杆菌可 使用接种环或涂布器进行划线法或涂布平板法接种，错误；在火焰旁会形成一 个相对无菌区，在此处进行接种，可以避免杂菌感染，正确；平板划线法只能 用来分离纯化获得单菌落，不能用来计数，错误。故答案选 B。 答案：B 4无菌操作是微生物接种技术的关键。传统发酵技术和微生物分离、纯化、应 用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问 题： (1)消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长 繁殖的能力。 消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基
8、本无 害。下列哪些事物适用于消毒处理？_。 皮肤饮用水牛奶注射器培养皿接种环培养基 果汁酱油手术刀 AB 5 CD以上全部 (2)如图是利用_法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培 养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意： 每次划线前要_； 冷却后从上一区划线_开始划； 首尾区_。 (3)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采 用的检测方法是_， 观察培养基上是否有菌落产生。 (4)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结 果发酵失败，原因可能是 _ _。 解析：(1)应采用消毒，应采用灭菌，故选 A。(2)微生物 实验室培养的
9、关键在于防止杂菌污染，题图是采用平板划线法接种，需要注意的 是连续划线时，每次划线前要灼烧接种环，同时划线结束首尾不能相连。(3)检 测培养基是否被污染，对固体培养基应采用的检测方法是将未接种(或接种等量 无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间， 观察培养基上是否有菌落产生。 (4)制作泡菜时，乳酸菌是发酵菌种，发酵失败的原因可能是青霉素杀死了乳酸 菌。 答案： (1)A(2)平板划线灼烧接种环末端不连接(不重叠)(3)将未 接种(或接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间(4)青霉素杀 死了乳酸菌 图表突破析图表，融会贯通 如图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请思考： 6 (
10、1)图甲是利用_法进行微生物接种，图乙是利用_法进行微生物 接种。 这两种方法所用的接种工具分别是_和_；对这两种接种工 具进行灭菌和消毒的方法依次是_和酒精消毒。 (2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？ _。 (3)如图是采用上述接种方法接种后培养的效果，其接种方法是_(填“图 甲”或“图乙”)。 答案：(1)平板划线稀释涂布平板接种环涂布器灼烧灭菌(2)火焰附近 存在着无菌区域(3)图乙 微生物的分离与计数 授课提示：对应学生用书第 188 页 基础突破抓基础，自主学习 1土壤中分解尿素的细菌的分离 实验流程土壤取样样品稀释培养与观察细菌的计数 分离方法稀释涂布平板法 菌种鉴定 以尿素
11、为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂，指示剂变红说明 尿素被分解 2.分解纤维素的微生物的分离 7 重难突破攻重难，名师点拨 1微生物计数的两种方法 比较 项目 间接计数法 (稀释涂布平板法) 直接计数法 (显微计数法) 原理 当样品的稀释度足够高时，培养 基表面生长的一个菌落，来源于 样品稀释液中的一个活菌，通过 统计平板上的菌落数，就能推测 出样品中大约含有多少活菌 利用特定细菌计数板或血细胞计 数板，在显微镜下计算一定容积 的样品中微生物的数量 公式 每克样品中的菌落数 (CV)M C：某稀释度下平板上生长的平 均菌落数；V：涂布平板时所用 的稀释液的体积(mL)；M：稀释 倍数 每毫
12、升原液所含细菌数：每小格 平均细菌数400104稀释倍 数 缺点 当两个或多个菌体连在一起时， 平板上观察到的只是一个菌落 不能区分细胞死活 结果比实际值偏小比实际值偏大 特别提醒 “间接计数法选择菌落数在 30300 的平板”的 2 个提醒 (1)只得到 1 个菌落数在 30300 的平板是错误的，原因是不符合实验的重复原 则，易受到偶然因素的影响。 8 (2)得到 3 个或 3 个以上菌落数在 30300 的平板，也不一定正确，原因是如果 不同平板间差异较大，如得到 3 个平板，菌落数分别为 230、34、240，虽然菌 落数均在“30300”，但由于 34 与另外两个平板差异较大，应找出
13、原因并重新 实验。 2微生物的鉴别方法 菌落特征 鉴别法 根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、 隆起程度和颜色等特征进行鉴别 指示剂 鉴别法 如培养基中加入酚红指示剂，培养某种微生物后，培养基变 红说明该种微生物能够分解尿素 染色 鉴别法 如利用刚果红染色法，根据培养基中出现以纤维素分解菌为 中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物 3.筛选微生物的 3 种方法 (1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表 面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。 (2)选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。 (3
14、)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选 目的微生物。 题型突破练题型，夯基提能 1有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受 原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。下列叙述错误的一项是() A在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基 上。从功能上讲，该培养基属于选择培养基 B无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物 的污染 C为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈小说明该菌 株的降解能力强 D通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干 热灭菌
15、和高压蒸汽灭菌 解析：欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其他碳源，这类 培养基属于选择培养基，A 正确；无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精 9 灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染，B 正确；为了筛选出高效菌株，可 比较单菌落周围分解圈的大小， 分解圈越大说明该菌株的降解能力越强， C 错误； 实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)、高压蒸汽 灭菌(如培养基)等，D 正确。 答案：C 2(2018湖南师大附中月考)自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐，对 水体有一定的净化作用，请回答： (1) 培 养 硝 化 细 菌 时 ， 将 含 固 体 培 养 基 的 培 养 皿 倒 置 的 目 的 是 _。 培养基中加入铵盐为硝化细菌的生长 提供_，培养基中没有加入有机碳，从功能上看这种培养基属于_ 培养基。 (2)硝化细菌纯化并计数时， 对照组应该涂布等量的_。 样液稀释 103 倍取 0.1 mL 涂布到四个平板，统计其菌落数分别为 251、265、276、348 个，可 推测原样液中硝化细菌的浓度
