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1、华南师范大学实验报告学生姓名:谭晓东 学号:20102501024专 业:生物科学 年级、班级:10科四课程名称:动物生理学实验 实验项目:家兔尿生成的影响因素实验类型:验证 实验时间:2013年5月28日实验指导老师:黄俊柅 实验评分:1. 实验目的学习输尿管、膀胱插管技术和尿液收集的方法;了解神经和体液因素对尿量的调节2. 实验原理尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌三个过程。凡能影响上述过程的任何因素,均可影响尿的生成并可引起尿量及尿的性质、成分的改变。本实验以家兔为实验对象,采用膀胱插管术收集并记录尿量,主要观察不同因素或药物对尿量的影响。3. 实验材料1 动物:
2、家兔 2 试剂:生理盐水、20氨基甲酸乙酯溶液、20葡萄糖注射液、肾上腺素、垂体后叶素、20甘露醇。 3 器材:手术器械、生理信号采集系统,压力传感器、注射器4. 实验步骤1 家兔麻醉:称重、麻醉:2%戊巴比妥钠,2ml/kg,耳缘静脉注射。固定:仰卧位固定2 气管插管术:剪毛、中线剪开颈部皮肤(67cm)、钝性分离颈部肌肉等组织,暴露气管、气管穿线、软骨环上做T形切口、棉签去气管中的血块、插气管插管,结扎。3 分离右侧迷走神经,穿线备用4 泌尿系统插管全身抗凝:静脉注射肝素,注射剂量10mg/kg (1ml/kg) A、输尿管插管:分离两侧输尿管,各穿2棉线备用;一侧输尿管结扎近膀胱端结扎处
3、往上做1/2切口向上插管绑线、动脉夹固定。 B、膀胱插管:分离两侧输尿管;输尿管下穿线,结扎与尿道连接的位置;用大注射针头刺破膀胱壁,从穿孔处将插管插入膀胱内,结扎并固定,如膀胱未充盈,可先注射生理盐水,让膀胱壁变薄4. 仪器连接,观察正常尿量5.改变影响因素(1).快速注射30ml生理盐水,记录尿量变化 。 (2).静脉注射肾上腺素0.20.3ml,记录尿量变化。 (3).静脉注射20%葡萄糖15ml,记录尿量变化。 (4)静脉注射垂体后叶素(2单位),观察尿量变化(5)静脉注射10%NaSO4(4ml),观察尿量变化 (6)刺激右侧迷走神经510 秒,观察尿量变化(7)静脉注射20%甘露醇
4、,观察尿量变化5. 实验结果图1 家兔正常情况尿量图正常情况下,家兔无尿液生成。图2 注射生理盐水后家兔尿量变化图注射生理盐水后家兔尿量稍有增加。图3 注射肾上腺素后家兔尿量变化图注射肾上腺素后家兔尿量减少。图4 注射葡萄糖后家兔尿量变化图注射葡萄糖可使家兔尿量显著增加图5 注射垂体后叶素家兔尿量变化图注射垂体后叶素后家兔尿量显著减少图6 注射Na2SO4后家兔尿量变化图注射Na2SO4家兔尿量显著增加图7 刺激迷走神经家兔尿量变化图刺激家兔迷走神经后尿液的生成量减少。图8 注射甘露醇家兔尿量变化图注射甘露醇使尿液生成量增加。六讨论与分析1. 静脉快速注射生理盐水使血浆渗透压降低,血液经过肾小
5、球时的滤过率增加,而且肾小球血浆流量也增加,原尿生成增加,同时血容量增加,可刺激容量感受器,血压升高可刺激压力感受器,增加抑制抗利尿激素的分泌和释放,使远端肾小管和集合管对水的重吸收减少。要排除体内过多水分以维持血容量的正常,所以最后尿液生成量增加。2. 肾上腺素可兴奋血管平滑肌上的-肾上腺素能受体,引起血管收缩,外周阻力增加,同时对心脏起到正性变时、变力和变传导作用,从而导致血压上升,尿量减少。并且去甲肾上腺素可同时兴奋肾入球小动脉和出球小动脉,但前者收缩更明显,肾血流量减少,肾小球毛细血管血压下降,肾小球的有效滤过压下降,尿生成减少。3. 静脉注射葡萄糖,由于肾小管对葡萄糖的重吸收具有一定
6、限度(肾糖阈160180mg/ml),实验中葡萄糖的注射量远远超过其肾糖阈,经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收,小管液中葡萄糖含量增多,渗透压增高,妨碍了肾小管特别是近球小管对水的重吸收,小管液中的Na+浓度被稀释而降低,故Na+的重吸收也减少,氯化钠及水的排出均增加,水随葡萄糖一起排出,尿量增加,称为渗透性利尿。4. 注射垂体后叶素(催产素和ADH),ADH与远曲后段,集合管上皮上的受体结合后,可增加管腔膜上的水通道,提高肾远端小管和集合管上皮细胞的对水通透性,从而促进水的吸收,使得重吸收水增多而使尿量减少。5. 注射Na2SO4后家兔尿量显著增加。原因是在肾小管中,SO
7、42-离子仅有少部分被重吸收,而在近端小管前半段,Na+的重吸收量最大,注射过多的硫酸钠,会导致肾小管内的SO42-离子与Na+离子浓度过高,渗透压高,提高了小管液中溶质浓度,阻碍近曲小管对水的吸收,导致尿量增多。6. 刺激迷走神经,尿量大大减少,甚至可出现暂时无尿。刺激迷走神经外周端,其末梢释放乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体向结合,改变离子通道的通透性和心肌动作电位,引起心脏活动抑制,导致心腧出量的减少,血压下降,肾小球有效滤过压下降,肾小球滤过率下降,尿液滤过减少,最后引起尿量的减少。血压下降还可以反射性地引起交感神经兴奋,导致入球小动脉收缩,使尿量进一步减少。7. 甘露醇可使家兔尿量显著增加,当其注入静脉后,由于它为单糖,在体内很少被分解,甘露醇从肾小球滤过时,在肾小管中不易重被吸收,使肾小管中的原尿的渗透压增高,带出大量的水分而起到渗透利尿作用。