糖类检测方法

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1、糖类检测方法糖类检测方法：(1) 化学分析法：目前常规的糖类检测方法如斐林氏法、高锰酸钾法等化学分析方法只能测定总还原糖，不能测定其他糖含量。(2) 气相色谱法：气相色谱法也可用于糖类测定，但由于糖类本身不具挥发性，须进行衍生化处理后才能用气相色谱检测。(3) 高效液相色谱法。高效液相色谱法（HPLC）更适用于糖类检测，样品无需衍生化，分辨率高，重现性好，特别适用于某些热敏性糖类和多糖分子量的检测。迪信泰检测平台提供HPLC、LC-MS检测多种糖类服务。检测器(1) 示差折光检测器：可直接测定，操作简便，但灵敏度较低；(2) 紫外检测器或光检测器：灵敏度较高，但由于糖类本身在紫外区没有吸收或不

2、产生荧光，因此样品需提前进行衍生化，操作较复杂。 (3) 蒸发光散射检测器：对于没有紫外吸收、不产生荧光或电活性的物质均能检测，通用性好，灵敏度高，可用于梯度洗脱。流动相一般为水、乙腈和甲醇的混合溶液，影响流动相的因素主要有以下几种：(1) 配比：由糖类的组分含量、分子量范围、结构组成等决定，且有研究表明水的比例越高，分离速度越快，但若出现果糖和葡萄糖色谱峰重叠，分离效果则会下降。(2) 流速：也是影响分离效果的主要因素之一，若流速增大，保留时间缩短但分离效果下降，若流速过快，则会缩短色谱柱的使用寿命，不同的色谱柱，其配合柱效的最佳流速也不同。(3) 检测温度：会影响色谱的检测结果，有研究发现提高温度，可以缩短保留时间，但分离效果下降，降低温度更有利于峰分离。(4) pH：一般使用中性的有机溶剂或水进行提取。为了避免离子化，检测物质呈碱性时，可以增大流动相pH，检测物质呈弱酸性时，可以降低流动相pH。糖类检测常用色谱柱色谱柱优点缺点Carbohydrate使用寿命长，基线稳定价格昂贵氨基柱适用于大多数单糖和低聚糖的分离，而且可用于正向或反相色谱某些还原糖易与固定相的氨基发生化学反应，从而缩短氨基柱的寿命硅胶柱价格低廉，糖类分离效果好流动相需添加氨类调节剂C18价格低廉，糖类分离效果好流动相为水糖类HPLC检测的色谱图（图片来源：北京迪信泰生物科技检测平台）