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1、学 海 无 涯,*医院 临床检验中心,1,临床基因扩增实验室 管理程序 标准操作程序（SOP）,起草人： 批准人：,生效日期：,年,月,日,2,学 海 无 涯,Roche 480II 实时荧光定量 PCR 仪操作规程、维护方法、校准（SOP-1）未修改 26,3,学 海 无 涯,*医院临床基4因扩增实验室- -,学 海 无 涯 临床基因扩增实验室的设置 1 目的：依照实验室设置规范实现核酸扩增荧光检测实验室配置合理，以保证 实验工作健康有序及实验结果的可靠性 2 范围：临床基因扩增实验室及相关工作人员，并明确各项规章制度 3 操作人：* * 4 实验室设置规章： 4.1 依据： 本实验室按临床
2、基因扩增检验实验室管理暂行办法（卫医发XXXX10 号）中临床基因扩增检验实验室基本设置标准结合本实验室的条件进行设 置，并严格按照临床基因扩增检验实验室工作规范（卫检字 XXXX 第 8 号）的要求开展临床基因扩增工作(拟开展基因扩增检验项目见附表 1) 实验室设置: 实验室主要由试剂储存和准备区（PCR-）、标本制备区（PCR-）、PCR 扩增及产物分析区(PCR-）三个工作室组成。这三区各自独立，每个区设有 缓冲间。其布局见实验室平面图（见附图 1）。 设立各区的门牌，分别是：“试剂储存和准备区（PCR-）”、“标本制备 区（PCR-）”、“PCR 扩增及产物分析区(PCR-）”，并在各
3、区门上贴有“非 本室工作人员不得进入”标记。 建立实验室内务管理，并放在进入实验室的明显位置（如置于缓冲区的 墙上；内务管理应有进入实验的工作流程、进入实验室的要求、实验前的准 备及清洁等）。 三个工作区各配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办 公用品、专用工作服，并有明显的区分标识：试剂准备区蓝色，标本制备 区紫色，PCR 扩增及产物分析区黑色。各区的实验物品不得混用（实验 室主要设备一览表见表 3）。 进入各区的工作流程为：试剂储存和准备区标本制备区PCR 扩增及产 物分析区。 进入实验室必须更换有本室标识的工作服及清洁鞋套，工作人员离开某 一工作区时，该区物品不得带出本区（包
4、括工作服等）。 各区实验设备及用品配置： 试剂储存和准备区：,*医院临床基5因扩增实验室- -,学 海 无 涯 冰箱（28和-15）、可调式移液器（覆盖 0.51000ul）、紫外消毒 车、固定紫外线灯，混匀器，专用工作服，一次性用品（手套、带滤心的吸 头、鞋套、吸水纸、耐高压处理的离心管），专用实验记录本及记号笔等。 标本制备区： 冰箱（28和-15）、台式高速离心机、水浴锅、净化工作台、混匀 器、可调式移液器（覆盖 11000ul）、紫外消毒车、固定紫外线灯，专用工 作服，一次性用品（手套、带滤心的吸头、鞋套、吸水纸、耐高压处理的离 心管），专用实验记录本及记号笔等。 PCR 扩增及产物分
5、析区： Line-Gene 全自动荧光定量 PCR 核酸扩增仪、紫外消毒车、固定紫外线 灯，专用工作服，一次性用品（手套、鞋套、吸水纸等），专用实验记录本及 记号笔等。 4.4 实验室人员设置： 实验室人员配置：我院 PCR 实验室配备有 3 名工作人员，其中 1 人具检 验师职称，2 人具主管检验师职称。已全部经过安徽省临床检验中心培训， 并取得培训合格证（实验室工作人员一览表见表 2）。,*医院临床基6因扩增实验室- -,学 海 无 涯,附表 1 拟开展临床基因扩增检验项目一览表,*医院临床基7因扩增实验室- -,学 海 无 涯,表 2 临床基因扩增检验实验室工作人员一览表,*医院临床基8
6、因扩增实验室- -,学 海 无 涯,表 3 临床基因扩增检验实验室仪器设备一览表,*医院临床基9因扩增实验室- -,学 海 无 涯,*医院临床基1因0 扩增实验室- -,学 海 无 涯,图 1基 因 扩 增 实 验 室 平 面 图 *医院临床基因扩增实验室,*医院临床基1因1 扩增实验室- -,学 海 无 涯 临床基因扩增实验室内部管理规章 1 目的：依照实验室管理规范实现全面质量管理，实现核酸扩增荧光检测实验 室有专人负责，以保证实验工作健康有序及实验结果的可靠性 2 范围：临床基因扩增实验室及相关工作人员，并明确了各项规章制度 3 操作人：* 4 规章： 实验室内务管理规章： 标本的接收设
7、在三个区以外的区域（与生化专用标本接收区合用），在标 本接收时同时进行以下记录：在标本与化验单上同时进行标本的唯一性编 号，在标本接收登记本上记录患者的姓名、年龄，标本接收日期，标本的特 性、状态，接收者签名。经验收合格后接收的标本直接运送至标本制备区。 实验过程中须严格遵守实验的工作流程：试剂准备区标本制备区扩 增及产物分析区的唯一流向制度。 开启实验区前逐一打开设在缓冲区外墙上的紫外线灯开关（控制实验区 的固定紫外灯），照射 30 分钟。 工作开始前，在缓冲区换好本实验区工作衣，戴上一次性口罩、帽子， 套上一次鞋套，关闭紫外灯。打开缓冲的排风装置，开启实验区门锁，工作 时反锁隔离门。 进行
8、测定前的准备和工作记录（实验前的准备和工作记录见表 4）： a)记录冰箱温度、紫外线消毒时间； 消毒液、清洁液、75%酒精配制； 查看加样器、扩增仪、离心机、灭菌的吸头等是否在有效期限内； d)校正水浴锅温度； e)试剂准备：试剂是否在有效期范围内，根据标本量确定准备模板的数量及 阴阳性对照数量； 实验过程的记录（见 SOP 文件）。 检测结果的记录（见 SOP 文件）。 实验完成后实验室清洁消毒处理及记录：实验台面、加样器、离心机、 超净工作台、振荡器、扩增仪、实验室空间、实验室地面等（详见实验室清洁 制度）。 工作结束，内务整理完毕，关闭排风装置及实验区，加锁。 唯一流向制度同样运用于实验
9、室物流管理及内务管理。,*医院临床基1因2 扩增实验室- -,学 海 无 涯 质量控制规章： 制定各种 SOP 文件并严格执行。 参加室间质评。 开展室内质控工作。 人员行为规章： 要有强烈的时间观念，按时上下班，不迟到、早退。 实验室人员须保持仪表整洁。 严格遵守实验操作规范，不得随意更改操作步骤。 实验室技术人员必须严格按照 PCR 实验室操作程序进行，包括实验室擦 洗、台面消毒，离心管、吸头的无菌灭活准备，仪器使用和废弃物的处理等。 进入实验室工作人员必须遵守实验室唯一流向制度，无必要尽量减少进入 实验室的次数。 实验室内严禁饮食、吸烟。 非本室工作人员未经允许不得进入实验室。 语言有礼
10、貌、举止讲文明，对待来访病人或电话应和蔼礼貌，解释明确耐 心，不得推脱或生硬回绝。 晚上下班要关门、窗，检查空调和仪器的电源是否关闭。 仪器管理规章： 实验人员必须熟悉仪器性能方允许操作，严格遵守操作规程。 所有仪器（如 PCR 扩增仪）须有专人负责，有使用维修记录。 仪器使用前必须检查是否完好，一旦发现问题，及时向负责人反映，不 得擅自拆装。 注意保持仪器卫生整洁，严禁在室内抽烟，吃零食，非仪器操作员应尽 量少入。 每天了解仪器运转情况，负责仪器的整洁，安全，检查电源，水龙头。 定期校正和维护 PCR 仪、离心机、水浴箱、冰箱等仪器、设备，并建立 仪器质量认证档案。 试剂管理规章： 实验室根
11、据需要，定期提交试剂申购单，并做到及时盘存清点，入库做 到心中有数。 所购试剂一律按试剂和耗材的 SOP 进行，并做到来源渠道正规，质量保 证。 实验室对试剂库存定期检查，不使用过期变质的试剂。 自配试剂须经严格校正后方可使用。 试剂的保存应严格按照规定存放，确保有效期内能有效使用，杜绝浪费,学 海 无 涯 现象。 易燃易爆试剂应分开存放，远离火源和电源。 试剂外借一律须经负责人同意方可。 5本制度的变动程序：本制度的变动，可由任一使用该文件的工作人员向主管 负责人提出，主管负责人则召集与本制度相关的所有人员进行讨论，根据讨论 结果是否通过，如通过则公布实施。,表 4 实 验 前 的 准 备
12、及 工 作 记 录 日 期 ： 年 月 日,表 4 实 验 前 的 准 备 及 工 作 记 录 日 期 ： 年 月 日,*医院临床基1因3 扩增实验室- -,学 海 无 涯,*医院临床基1因4 扩增实验室- -,*医院临床基1因5 扩增实验室- -,学 海 无 涯,临床基因扩增实验室人员管理、配置及培训 目的：保证实验室具备开展该项实验的能力。 适用范围：临床核酸扩增荧光检测实验人员。 3负责人：* 内容： 人员要求： 由于 PCR 检测干扰因素较多，结果分析复杂。因此，PCR 实验室工作人员 应具备掌握相关学科知识及应用能力（实验技能、分析能力、沟通能力等）； 应具备较广泛的分子生物知识。
13、PCR 实验室工作人员应取得上岗培训合格证书，临床 PCR 检验过程须在 具培训合格证书的技术人员监督指导下完成，检验报告须由具培训合格证 书的技术人员审核签。 工作人员上岗前必须学习掌握 PCR 实验管理文件及要求，并由实验室主 任核查。 人员配置： 根据卫生部临检中心对实验室人员的在求选择人员； 我科 PCR 实验室配备 3 名工作人员（PCR 实验室工作人员一览见表 2）； 实验室主任负责实验室全面管理、解决技术疑难及与临床沟通、组织人 员参加培训，室主任不在岗时，应指定代理人负责。 4.2.3 资深检验技师及青年技师负责实验室技术管理及临床标本的检验。 人员管理： 严格遵守实验室内务规
14、章制度； 严格执行年度考核制度：1)日常工作质量的评价；2)室内质控的评测；3) 室间质控的评测；4)年度考试；5)在日常抱怨工作中的应变能力。 科年度奖励制度：1)参加室间质评优秀；2)年度在 CN 级刊物上在论文发 表； 3)在本地刊物有多篇论文发表；4)考试成绩优秀；5)受到有关部门或群众 特别嘉奖。 科主任建立实验室工作人员业绩档案。 人员培训计划： 本室现有人员已参加安徽省临床检验中心基因扩增实验室人员培训班， 并取得上岗证。见附件 1 自学及考核：室主任督促指导实验室人员通过继续教育或自学提高业务,*医院临床基1因6 扩增实验室- -,学 海 无 涯 素质。工作人员根据自身情况，每
15、年完成一篇学术论文、综述或经验总结提 交室主任，室主任以此作为年度考核技术人员的一项依据。 室主任每年必须参加临床检验中心的 PCR 质控总结会议。 室成员每年至少有一个月脱产的理论和技能的学习。 经常同其它 PCR 室的同道进行理论和技术交流。 订阅与分子生物学及 PCR 技术有关的文献、杂志。 每年底对下一年的人员培训做出具体安排。 实验室主任对技术人员的技术档案每两年修正补充一次。 该程序的变动程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本 SOP 的工作人 员提出，并报经下述人员批准签字：检验科主任、室技术负责人 注:所引用表格: 实验室工作人员一览表见表 2 实验室工作人员档案记录见表
16、5,*医院临床基1因7 扩增实验室- -,学 海 无 涯,表 5 临床基因扩增检验实验室工作人员档案记录表,*医院临床基1因8 扩增实验室- -,学 海 无 涯 临床基因扩增实验室的设施和环境 目的 保证环境良好，工作有序，结果可靠 范围 PCR 实验室及相关工作人员 3 操作人 * * 规章： 实验室分三个区：试剂储存和准备区（PCR-）、标本制备区（PCR-）、PCR 扩增及产物分析区（PCR-）。进入各区按照单一方向进行，即试剂储存和准 备区（PCR-）标本制备区（PCR-）PCR 扩增及产物分析区（PCR- ）。各区及设备、物品有明确标识，严禁混用。 每个实验区的门上有本区的标识及非本室人员不得进入字样。 每个实验区配有温度调控设备、温湿度计，可移动及固定紫外灯。 4.4PCR 扩增仪配有 UPS 多功能稳压电源。
