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1、全国中医药高职高专卫生部规划教材(供中药等专业用)中 药 鉴 定 学实训指导书 主 编 彭志芬副主编 王小平 周铁文编 者 彭志芬 王小平 周铁文陈文 吴卫 江西中医药高等专科学校 2007年7月前 言中药鉴定学是阐述中药鉴定基本理论和技能的一门学科，为中药学、医药营销、中药制药技术、中药材栽培技术等专业的一门重要专业课，在中药学各专业学科中占有极为重要的地位。 根据卫生部教材办公室全国中医药高职高专卫生部规划教材编写要求、七院校教材 编写委员会全国中医药高职高专教材编写基本原则和中药鉴定学教学大纲的要求， 本实训指导书在编写过程中，以就业为导向，以培养技术应用能力为主线，力求与专业培养目标相
2、一致，与国家药品标准、中药现代化要求相统一，与药用植物学、中药化学、中药制剂分析等相关学科的内容相衔接，注重吸收中药鉴定发展的最新研究成果，注重教材整体内容的优化，力求内容充实、简明扼要、重点突出。全书内容包括总论、植物药类、动物药类、矿物药类、中成药类的实验指导5大篇，共40项实验。 由于编写时间仓促，业务水平有限，不足之处在所难免，希望广大师生在使用过程中提出宝贵意见，以便修订和完善。中药鉴定学编写组 2007.7中药鉴定学实验指导实验一 显微镜的使用和组织制片【实验时数】2学时【实验地点】中药鉴定学实验室【实验器具准备】显微镜、培养皿、毛笔、刀片等；稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液。【
3、实验要求】掌握显微镜的使用方法，掌握徒手制片的制作和永久制片的制作过程，注意事项【实验内容】熟练显微镜的使用，采用徒手切片法制作药材的横切片或纵切片，操作简便，迅速，制成的切片能保持其细胞内含物的固有形态，便于进行各种显微化学反应。熟悉永久制片的制作过程【实验内容方法】（一）徒手切片法徒手切片法主要用于临时制片，制片迅速，更为重要的是制片过程中没有复杂的化学处理，可以观察到植物的天然色彩，真实地反映植物细胞组织的本来面目，也利于显微化学的观察，因而必须熟练掌握。1、 材料的软化（1）热水浸泡法：材料置600C温水浸泡数小时。本法适用于纤细的根茎、根、全草、叶、花等质软而细薄的材料。（2）水煮法
4、：材料置沸水中煮一段时间，软后取出。本法适用于软质的根、根茎、茎木、皮类等材料。2、 切片方法（1）手持法：先将材料断面削平，用左手拇指和食指夹住材料下端，用中指或无名指托住，使材料高出拇指和食指，并注意食指应略高于拇指以防切片。然后用右手平拿刀片，刀口向内，并与材料的断面平行，切时应用臂力以轻微均匀的动作向后拉切，不得断续，更不得来回拉力，切片以薄而透明，组织、细胞形态清晰者为好。（2）夹持法：取夹持物切成适当大小，纵向剖开一定深度，将材料夹入按手持拉切，切下的片子放入培养皿中即可。（3）压切法：将材料放于切片板上，左手中指及食指轻轻压住材料，右手持刀自左向右或自上而下切削，切片用毛笔挑入培
5、养皿中备用。此法刀刃易伤，应避免刀刃与板接触。此法对于细小果实种子类或某些较硬的材料效果比前二法要佳。3、不染色装片 用毛笔挑取或用镊子轻取透明的薄片放于载玻片中央，直接观察或用水合氯醛透化后加封芷剂盖上盖玻片即可。4、染色装片（1）番红染色：将手切的薄片移入置番红水溶液或酒精中进行染色，番红染色224小时，酒精溶液染色124小时。（2）冲洗：染色后用水或5%酒精冲洗，除去多余的番红色水。（3）脱水：用30%、50%、70%、80%不同浓度的酒精依次各浸约5分钟，以逐渐脱除组织细胞内的水分。如果番红染色是用酒精液，则可自5%酒精开始脱水。（4）龙胆紫二重染色：将脱水至80%酒精溶液的切片用龙胆
6、紫酒精溶液染15分钟可使纤维素细胞壁呈紫色，如龙胆紫染色适宜即可，用80%酒精浸洗后，用90%及无水酒精（二次）各2分钟以脱去材料中全部水分。 在二重染色后，如紫色太深可用盐酸酒精溶液作褪色剂（100ml）的70%80%酒精中加12滴盐酸放置数刻至紫色适宜为止，用70%80%酒精洗数次以除去盐酸。(5)透明：材料脱水后浸入50%甲苯（即等重的二甲苯与无水乙醇）510秒及纯二甲苯10秒使细胞组织透明，便于观察与封芷。（6）封芷：将材料移入载玻片上，取加拿大香脂12滴于材料上加盖玻片即可长久保存。（7）标签：写明材料名称及制作日期等。（二）表面制片法 表面制片通常属整体封固法的一类，它是将叶的表皮
7、、花冠、果实、种子的外表皮、草质茎的表皮等采取不同的方法取下经过处理而制成的玻片标本。1、材料的预处理 新鲜材料可用剪刀剪下所需部位，用清水冲洗，处理成适当大小备用。若干药材叶可先用冷水浸，再用温水浸到能恢复原样即可，若是较硬的材料（果实、种子）还需经过软化处理。2、方法（1）撕取法，一般用于表皮易于剥离的表皮制片，取材料分清上、下表皮用刀片在表面轻划一刀或等分折叠后，用镊子在刀痕处或折痕处取表皮，撕得的表皮置载玻片中央，表皮的外表面朝上，除去带绿色部分的表皮，加稀甘油封片即可。（2）剥取法（3）解离法（4）整体透化封固法（三）操作徒手制片（四）总结学生操作过程的 优缺点（五）作业 写出永久制
8、片的制作全过程 徒手切制大黄制片实验二 绘图技巧和方法【实验时数】2学时【实验地点】中药鉴定学实验室【实验器具准备】显微镜、培养皿；稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液。【实验要求】掌握组织结构详图和简图的绘图技巧和描述语言【实验内容方法】(1)徒手绘图法：选择典型的显微标本片和结构，仔细观察各部位的形状、结构及比例关系，用色淡的铅笔(2H或4H)，按照显微图象的比例关系画出轮廓草图，经反复对照修改后，再用色深的铅笔(HB或2B)绘出修改图。(2)组织简图绘制法：组织简图即用代表符号画成较简明的组织构造图，能清晰地表示出各组织和某些特征排列的位置、分布情况及比例关系，以了解该器官组织构造的全貌。
9、组织简图各部位表示符号如下。绘图步骤：将组织标本片置于显微镜下观察，用铅笔将图象的各部位轮廓画出。按照规定的表示符号绘出各部位的重要特征(如厚壁组织、分泌组织、维管束等)；准确表示组织中各部位的范围、界限及重要特征的所在位置。将各部位依次向右方引出直线，标上图注，图下注明各部分名称及放大倍数。放大倍数 (3)组织详图绘制法：将显微镜下观察的组织、细胞及其内含物的真实形态、大小等特征，如实的绘制到画面上的图形，称为组织详图。绘图步骤同简图绘制法，应注意薄壁组织用单线条表示，厚壁组织用双线条表示。【注意事项】在药材预处理时应避免影响欲观察的显微特征。如观察菊糖、黏液等特征时，不可与水接触，以免特征
10、溶解消失；观察挥发油、树脂等特征时，则不可与高浓度乙醇或其它有机溶剂接触。用水合氯醛试液透化处理时，加热温度不宜过高，以防水合氯醛试液沸腾，将组织中带入气泡。作业 绘制甘草的根的简图实验三 粉末显微绘图技巧【实验时数】2学时【实验地点】中药鉴定学实验室【实验器具准备】显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片等；稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液【实验要求】掌握粉末标本片的制作方法及注意事项【实验内容方法】适用于药材、饮片及含药材粉末的成方制剂的显微鉴别。1粉末制备 药材应先干燥，磨或锉成细粉，过4号筛，混匀，装瓶，贴上标签。制备粉末时，取样要有代表性，如根要切取根头、根中段及根尾等部位，全部磨成粉
11、，不得丢弃渣头；干燥温度一般不宜超过60，以免淀粉粒糊化。2制片 用解剖针挑取粉末少许，置载玻片中央偏右的位置，滴加适宜的透明剂12滴，搅匀，待液体渗入粉末后，用左手食指与拇指夹持盖玻片的边缘，使其左侧与试液左侧接触，再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右侧，轻轻下放，使液体逐渐扩延并充满盖玻片下方。若液体未充满盖玻片，应从空隙相对的边缘滴加液体，以防产生气泡；若液体过多，用滤纸吸去溢出的液体，最后在载玻片的左端贴上样品标签，即可镜检。需用水合氯醛试液透化时，滴加试液后，手执载玻片一端或用镊子夹持，保持水平置酒精灯火焰上方约12cm处加热，微沸后，离开火焰，再滴加水合氯醛试液，放在小火上继续加
12、热，如此反复操作至粉末呈透明状为止，放冷后滴加稀甘油12滴，封片镜检。3粉末绘图 将粉末标本片置显微镜下观察后，绘出有代表性的细胞、后含物及某些组织碎片特征。绘图时，主要特征绘在画面的中央部位，次要特征绘在图面的边缘部位。单个细胞要求完整，组织碎片可绘全部或典型的一部分。【注意事项】1. 在进行未知粉末装片时，一般先用水、稀甘油或甘油醋酸装片，观察记录后再用水合氯醛冷装或透化装片，最后可滴加其他理化试剂进行显微观察。2. 装片用的液体如易挥发，装片后应立即观察。用水装片也较易蒸发而干涸，滴加少许甘油可延长保存时间。3. 应注意防止标本片产生气泡，干扰观察。用水或稀甘油装片时，先加少量乙醇使其润
13、湿，可避免或减少气泡的形成，或反复将盖玻片沿一侧轻抬，亦可使多数气泡逸出；用水合氯醛试液透化处理时，加热温度不宜过高，以防水合氯醛试液沸腾，使组织中带入气泡；搅拌时产生的气泡可随时用针将其移出；菌类药材一般用蒸馏水装片，若用稀甘油装片，因其渗透性较差，粉末易成团并形成大量气泡。【实验报告】绘山药(或半夏)粉末特征图。实验四 大黄的鉴定【实验时数】2学时【实验地点】中药鉴定学实验室【实验器具准备】显微镜、微量升华装置、紫外分析仪、烘箱、分析天平；稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液、氢氧化钠试液、甲醇、45%乙醇。大黄药材【实验要求】掌握大黄的显微及理化鉴别特征。掌握大黄的性状鉴别。【实验内容方法
14、】1 辨认大黄药材2显微鉴别(1)大黄根茎横切面：注意观察：残存的木栓层。韧皮部筛管群明显。形成层成环。木质部射线，导管非木化，稀疏排列。髓部宽广，内有红棕色物；异型维管束散在，形成层成环，木质部位于形成层外方，韧皮部位于形成层内方，射线呈星状射出。薄壁细胞含草酸钙簇晶，并含多数淀粉粒。(2)大黄粉末：黄棕色。注意观察：草酸钙簇晶直径较大，棱角较钝。具缘纹孔、网纹、螺纹及环纹导管，非木化。淀粉粒甚多，单粒类球形或多角形，直径345m，脐点星状，复粒由28分粒组成。3理化鉴别(1)取本品粉末少量，进行微量升华，可见菱状针晶或羽状结晶。(2)取本品粉末0.2g，加甲醇2ml，温浸10min，放冷，
15、取上清液10l，点于滤纸上，以45%乙醇展开，取出，晾干，放置10min，置紫外光灯(365nm)下检视，不得显持久的亮紫色荧光(检查土大黄苷)。【实验报告】绘大黄根茎横切面简图及粉末特征图；记录理化实验结果。实验五 川 怀牛膝的鉴定【实验时数】2学时【实验地点】中药鉴定学实验室【实验器具准备】显微镜；稀甘油、水合氯醛试液 川牛膝 怀牛膝【实验要求】掌握川牛膝与牛膝的显微鉴别特征；掌握川牛膝与牛膝的性状鉴别，熟悉川牛膝与牛膝的理化鉴别方法。【实验内容方法】1 辨认川牛膝和怀牛膝的性状2 显微鉴别(1)川牛膝横切面：注意观察：中央有正常维管束；其外侧有异常维管束断续排列成411轮同心环，维管束外韧型，无束间形成层，木质部由导管及木纤维组成，强烈木化。薄壁细胞含草酸钙砂晶。(2)牛膝横切面：注意与川牛膝的区别：中央有正常维管束，中
