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1、蛋白质晶体的生长、冻存及装载,技术交流,晶体培养,A. McPherson, CHSL 2008,晶体培养 原理,A. McPherson, CHSL 2008,晶体培养 原理,A. McPherson, CHSL 2008,晶体培养 原理,A. McPherson, CHSL 2008,晶体培养 原理,Direct mixing to immediately create a supersaturated condition (Batch Method) Alter temperature Alter salt concentration (salting in or out) Alter
2、pH Add a ligand that changes the solubility of the macromolecule Alteration of the dielectric of the medium Direct removal of water (evaporation) Addition of a polymer that produces volume exclusion Addition of a cross bridging agent Concentration of the macromolecule Removal of a solubilizing agent
3、,A. McPherson, CHSL 2008,晶体培养 材料,拭镜布,池液,硅化玻片,蛋白样品,16孔板,真空硅脂,晶体培养 真空硅脂,晶体培养 加入池液,晶体培养 点蛋白溶液,晶体培养 混和池液,God, plz give me a crystal so that I can graduate.,晶体冻存 材料,空气罐,Cryo Tong,Loop,Tab,夹子,冻存架,处理晶体工具,晶体,晶体冻存 准备液氮,晶体冻存 准备夹子,晶体冻存 试保护剂（液氮法）,晶体冻存 试保护剂（液氮法）,晶体冻存 捞晶体,晶体冻存 捞晶体,晶体冻存 冻晶体,晶体冻存 存晶体,晶体装载 原理,Bernha
4、rd Rupp, Crystal 101,晶体装载 衍射仪,照明灯,发射器,准直镜,探测屏,液氮系统,测角头,晶体装载 衍射仪,液氮气,X射线,底座,X、Y轴,Z轴,旋转,晶体装载 衍射仪（氦气）,晶体装载 衍射仪（控制面板）,晶体装载 衍射仪,记住三点 检查氦气 开门摁“DOOR” 别碰紧急按钮，除非很紧急,晶体装载 取晶体,晶体装载 取晶体,晶体装载 装晶体,And you pray again.,But.,8,在96孔板中培养得到的2肾上腺素G蛋白偶联受体的晶体,晶体被装载到30或50m孔径的MiTeGen MicroMounts loop中,微晶衍射图，由27颗微晶得到了一套完整的2.4的数据,Cherezov et al., Science. 2007 318:1258-1265,谢谢！,
