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1、第六章 体外放射分析技术In Vitro Radioassay放射免疫分析：指以放射性核素标记的抗原作为示踪剂，以抗原和抗体的特异性、竞争性结合反应为基础，以放射性测量为定量依据，在体外实验条件下，对超微量物质进行定量检测的一种测量技术。一定量的标记抗原与非标记抗原与有限量的特异抗体发生可逆性的竞争性结合反应，反应平衡后分离出抗原抗体复合物，通过测量放射性复合物量来计算出非标记抗原量。一、基本原理放射免疫分析原理示意图 4二、分析过程1、标准曲线绘制2、待测物的浓度测定三、放射免疫分析基本试剂与要求1.标准品 与待测物的应属于同一种物质（分子结构、构 型、抗原决定簇及亲和力等均相同，如 HCG
2、)； 高度纯化，不含影响分析的干扰物； 定量准确。2.标记品（*Ag） 高比活性和放化纯度（95%） ； 与标记前的生物活性及免疫活性要一致； 标记的放射性核素 T1/2 要适宜； 稳定性高。3. 抗体 高特异性; 高滴度; 高亲和力。四、RIA 中 B 与 F 的分离技术双抗体法； 2. PEG 沉淀法；3. 双抗+PEG 法；4. 固相抗体包被法；5. 其他（SPA 法，活性碳吸附法， 微孔滤膜法，电泳法等） 。二、分离方法目前基于这种原理的最经典也是最常用的方法是 1971 年 Addison 和 Hales 提出的双抗体 IRMA 法，亦称夹心法（Sandwich technique） 。双抗夹心法原理示意图IRMA 的标准曲线项 目 RIA IRMA反应机制 竞争性反应非竞争性反应反应试剂抗原、标记抗原、抗体抗原、过量标记抗体分离方法只需一个抗原决定族需两个或两个以上 抗原决定族复合物的 放射性与待测抗原量呈负相关与待测抗原量呈正相关NSB 的影响主要影响高剂量区主要影响低剂量区另：IRMA 反应速度快，易标记，灵敏度高，工作范围宽，特异性高！IRMA 与 RIA 的异同点2.荧光免疫分析技术
