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1、第五章 巴比妥类药物的分析,主讲：梁 洁,巴比妥类药物是一类临床常用的催眠镇静药。由于这类药物应用广泛，容易因不合理使用而引起中毒。因此，需要对本类药物的原料、制剂进行分析，有时也需要对生物样品中微量巴比妥类药物进行分析。,本章重点介绍： 一、化学结构与性质 （化学性质与分析方法间的关系） 二、鉴别试验 三、含量测定,一、 巴比妥类药物的结构剖析,5,5取代的巴比妥类药物,1,5,5取代的巴比妥类药物,5,5取代的硫代巴比妥类药物,5,5-取代的巴比妥类药物,Barbital,Phenylbarbital,Secobarbital,戊巴比妥,环己烯巴比妥,1,5,5-取代的巴比妥类药物,己琐巴
2、比妥,5,1,硫代巴比妥类药物,区别各种巴比妥类药物,环状丙二酰脲、1,3-二酰亚胺基团决定巴比妥类药物的特性,1. 环状母核部分,2. 取代基部分,结构特征,1.白色结晶或结晶性粉未，具有固定的熔点。,2.游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。,（一）物理性质,二、 巴比妥类药物的理化特征,（二） 化学性质,巴比妥类药物分子结构中都有1,3-二酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性（pKa为7.3-8.4），可与强碱形成水溶 性的盐类。,1.弱酸性,与强碱的成盐反应：,2. 水
3、解反应 （1）巴比妥类药物的水解：其基本结构中具有酰亚胺结构，与碱溶液共沸即水解产生氨气。,（2）巴比妥类钠盐的水解：在吸湿的情况下，本类药物的钠盐也能水解成无效物质 。,R1 COONa,R2 CONHCONH2,C,CHCONHCONH2,3. 与重金属离子反应,（1）与银盐的反应,（2）与铜盐的反应（Zwikker反应） 酰亚胺结构溶于吡啶时，易发生烯醇化异构现象。烯醇化结构与铜吡啶试液作用，生成稳定的配位化合物。,（3）与钴盐反应（Parri试验） 反应条件: 无水条件 常用试剂：无水乙醇或甲醇，醋酸钴、硝酸钴或氧化钴； 碱性：异丙胺或吡啶。,（4）与汞盐的反应（多发生在1位） 与硝酸
4、汞或氯化汞试液反应，生成白色汞盐沉淀，沉淀能溶于氨试液中。,HgNO3,NH3H2O,沉淀溶解,4. 与香草醛（Vanillin）的反应 分子结构中丙二酰脲基团中的氨比较活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物。,（1）巴比妥类药物 酸性溶液：5，5-二取代、 1，5，5-三取代均无吸收。,巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其电离的程度有关。,5. 紫外吸收光谱特征, pH10的碱性溶液：5，5-二取代、 1，5，5-三取代均在240nm处有最大吸收 pH13的强碱性溶液：5，5-二取代在255nm处有最大吸收；1，5，5-三取代在240nm处有最大吸收。,H2SO4溶液(0.
5、05mol/L) pH9.9缓冲溶液 NaOH溶液(0.1mol/L) (pH 13),巴比妥类药物的紫外吸收光谱,nm,（2）含硫巴比妥类 酸性溶液、碱性溶液中均有明显紫外吸收峰。,硫喷妥的紫外吸收光谱 HCl 溶液 (0.1mol/L) NaOH 溶液 (0.1mol/L),nm,6. 薄层色谱行为特征 （1）薄层色谱法 （2）高效液相色谱法,7. 显微结晶 （1）药物本身的晶型 （2）反应产物的晶型,一、与重金属离子反应（丙二酰脲类鉴别试验）,苯巴比妥 ChP（2000） 【鉴别】（1）本品显丙二酰脲类的鉴 别反应（附录）,三、 鉴别试验,取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10m
6、1，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。,1. 与银盐的反应,附录 一般鉴别试验,取供试品约50mg，加吡啶溶液（110）5m1，溶解后，加铜吡啶试液（硫酸铜4g，水90ml溶解后，加吡啶30m1，即得）1m1，即显紫色或生成紫色沉淀。,2. 与铜盐的反应,二、测定熔点 1司可巴比妥钠的鉴别 2苯巴比妥钠的鉴别 3巴比妥的鉴别,三、利用特殊取代基或元素的鉴别试验 1利用不饱和取代基的鉴别试验 （1）与碘试液的反应：与碘（或溴）试液发生加成反应，使其颜色消褪。 （2）与高锰酸钾的反应：与高锰酸钾在碱性溶液中反应，使紫
7、色KMnO4还原为棕色的MnO2 。,2利用芳环取代基的鉴别试验 （1）硝化反应（与硝酸钾、硫酸共热，生成黄色的硝基化产物） （2）与硫酸-亚硝酸钠的反应（苯环上的亚硝基化反应，生成桔黄色产物） （3）与甲醛-硫酸的反应,3、硫元素的鉴别试验,巴比妥类药物分子结构中含有硫的药物，经有机破坏后硫元素转化为无机硫离子，再与铅离子反应生成 PbS 黑色沉淀。,(一) 苯巴比妥的特殊杂质检查 1酸度 2溶液的澄清度 3中性或碱性物质,四、 特殊杂质检查,(二) 司可巴比妥钠的特殊杂质检查 1溶液的澄清度 2中性或碱性物质,一、银量法 基于巴比妥类药物在适当的碱性溶液中，可与银离子定量成盐的性质，采用银
8、量法测定本类药物及制剂的含量。,五、 含量测定,原理：,终点指示：电位法指示（Ag电极为 指示电极，饱和甘汞电极为参比电极） 自身指示,反应摩尔比（11） 溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠,凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。 如司可巴比妥钠及其胶囊的测定原理为：,二、溴量法,1. 原理,1. 在水醇混合溶剂中的滴定法 弱酸性 pKa7.3-8.4,异戊,水醇,溶解,麝香草酚酞,N,a,O,H,淡蓝色,三、酸碱滴定液法,2胶束水溶液中的测定方法 本法是在有机表面活性剂的胶束水溶液中进行进行滴定，用指示剂或电位法指示终点。,溶 剂：二甲基甲
9、酰胺 滴定剂：甲醇钠（钾） 指示剂：麝香草酚蓝,3. 非水溶液滴定法,四、 UV,（一）直接紫外分光光度法,本法是将样品溶解后，根据溶液的pH值选用其相应的max处进行直接测定。 （二）经提取分离后的紫外分光光度法,1. 吸收系数法,0,C1 C2 C3 C4 CX C5 C,A 5,A X,A 4,A 3,A 2,A 1,A,2. 标准曲线法,3. 对照法,取两份相等的供试溶液，分别制成两种不同的化学环境（如在其一中加酸、碱或缓冲液改变溶液的pH，或在其一中加能与供试品发生某种化学反应的试剂），然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当波长 处，测其吸收度的差值（
10、A值）。,（三）差示分光光度法（A法）,1. 测定方法,2. 必要条件,（1）供试品在不同的化学环境中以不同的分子形式存在，它们的吸收光谱有显著的差异。 （2）干扰物的吸收不受测定时化学环境的影响，光谱行为不变。,供试品在两种不同的化学环境中分别以x、y 表示，干扰物用 z 表示,3. 定量依据,即，吸收度差值（A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，即干扰组分的干扰被消除。,可用对照法或标准曲线法定量,保留了通常的分光光度法简易快速、直接读数的优点，又无需事先分离，并能消除干扰。,4. 特点,五、高效液相色谱法 1色谱条件 2样品预处理 3线性范围和最底检测限 4、回收率与精密度试验,本章小结 1掌握巴比妥类药物的化学结构与分析方法间的关系： （1）弱酸性 （2）水解性 （3）与重金属离子的反应,2掌握巴比妥类药物的鉴别： （1）与重金属的反应 （2）特殊取代基（不饱和烃基取代、芳环取代）和硫元素的鉴别试验,3掌握巴比妥类药物含量测定的原理与方法： （1）银量法测定的原理 （2）溴量法测定的原理,
