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1、专题八 生物技术实践1(2016佛山市二模)牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。(1)图中步骤称为_消毒法。步骤是_。(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供_。进行步骤操作时，应选用下列中的哪种工具？_。为了避免杂菌污染，此步骤应在_附近进行。AB CD(3)将接种后的培养基和作为对照的_同时放入37 恒温培养箱中，培养36小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为_的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是_/mL。牛奶稀释倍数1021031
2、04平板1菌落数87101平板2菌落数83121平板3菌落数85100解析：(1)80 恒温水浴15 min是巴氏消毒法，步骤是进行系列稀释(或梯度稀释)；(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源(和维生素)，是接种，因为需要计数，需用稀释涂布平板法，接种工具是涂布器；为了避免杂菌污染，此步骤应在酒精灯火焰附近进行。(3)统计各平板的菌落数时，应选择菌落数在30300的计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是(878385)1028 500个。答案：(1)巴氏系列稀释(或梯度稀释)(2)碳源、氮源(和维生素)B酒精灯火焰(3)一个未接种的培养基1028 500个2(2016沈阳市高三质检
3、)红方是腐乳的一种。请回答与其制作有关的问题：(1)补充制作红方的实验流程：_加盐腌制_密封腌制。(2)在实验流程中，首先将豆腐块平放在笼屉内，笼屉中的温度应控制在_，并保持在一定的_。5天后豆腐块表面布满毛霉菌丝，这些毛霉来自空气中的_。(3)在实验流程操作中，向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬。同时，盐还能_，避免豆腐块腐败变质。(4)在实验流程用到的辅料中，卤汤是由_及各种_配制而成的。此外，红方因加入了_而呈深红色。解析：(1)制作腐乳的实验流程是：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。(2)让豆腐上长出毛霉，将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的温度控制在
4、1518 ，并保持在一定的湿度。约48 h后，毛霉开始生长，3 d之后菌丝生长旺盛，5 d后豆腐块表面布满菌丝。豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。(3)加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早腐烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。(4)卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，红方因加入红曲而呈深红色。答案：(1)豆腐上长出毛霉加卤汤装瓶(2)1518湿度毛霉孢子(3)抑制微生物的生长(4)酒香辛料红曲3(2016青岛市一模)在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。请回答：(1
5、)可以通过提高培养基中_的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为_培养基。(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是_。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是_。(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是_。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿_培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为_。(4)根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是_。解析：(1)此实验的目的是调查和分离湖水中耐盐细菌，因此可通过提高培养基中NaCl的浓度，从而筛选出被调查细菌。而其他耐盐性较低或不
6、耐盐的细菌则被杀死，这种培养基被称为选择培养基。(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置一个未接种的培养皿作为对照组。(1)中筛选耐盐细菌是通过加入高浓度的NaCl实现的，因此要检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是未加高浓度的NaCl培养基进行培养。(3)对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌。微生物极有可能进入培养皿中附在冷凝水中，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿倒置培养。在培养基上产生的单个菌落为同一种生物的总和，在生态学中可以被称为种群。(4)观察培养皿上菌落数时，若两个或多个细胞连在一起时，视为一个菌落，则计算的数据要比实际活菌的数目少。答案：
7、(1)盐(或NaCl)选择(2)未接种(或接种等量无菌水)的培养皿用未加高浓度盐的培养基培养(3)高压蒸汽灭菌倒置种群(4)当两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的是一个菌落4(2016东北三省四市调研)蓝莓富含花青素等营养成分，具有保护视力、软化血管、增强人体免疫力等功能。某同学尝试用蓝莓来制作蓝莓果酒和蓝莓果醋。(1)制酒中利用的微生物是_，取样后可用_观察该微生物。发酵时一般要先通气，通气的目的是_。制酒过程中可在酸性条件下用橙色的重铬酸钾检验酒精的存在，检验后颜色变成_。(2)酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，分析其原因是_。
8、醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖原_(填“充足”或“缺少”)。(3)酿制蓝莓果酒时，并不需要对蓝莓进行严格的消毒处理，这是因为在_的发酵液中，绝大多数微生物无法适应这一环境而受抑制。(4)为鉴定蓝莓果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测和比较_作进一步的鉴定。解析：(1)制酒中利用的是酵母菌，取样后可用(光学)显微镜观察该微生物。发酵时一般要先通气后密封，通气的目的是酵母菌可在有氧条件下大量繁殖制酒过程中可在酸性条件下用橙色的重铬酸钾检验酒精的存在，检验后颜色变成灰绿色。(2)由于醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为3035 ，因此酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味
9、会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。(3)酿制蓝莓果酒时，并不需要对蓝莓进行严格的消毒处理，这是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中，绝大多数微生物无法适应这一环境而受抑制。(4)由于醋酸发酵过程中产生的醋酸使pH逐渐降低，因此在鉴定蓝莓果醋是否酿制成功的过程中，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测和比较(醋酸)发酵前后的pH作进一步的鉴定。答案：(1)酵母菌(光学)显微镜酵母菌可在有氧条件下大量繁殖灰绿色(2)醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为3035 ，(夏天温度较高，导致醋酸杆菌大量生长产生醋酸)缺少(3)缺氧、呈酸性
10、(4)(醋酸)发酵前后的pH5生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图) (1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用_、_方法从油料作物中提取。(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_，培养基灭菌采用的最适方法是_法。(3)测定培养液中微生物数量，可选用_法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_，以确定其应用价值。解析：(1)因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应采用压榨法或萃取法提取。(2)植物油中不含有矿质元素，只
11、为微生物提供碳源；培养基适合用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(3)测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数；分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。答案：(1)压榨萃取(注：两者无先后顺序)(2)碳源高压蒸汽灭菌(3)显微镜直接计数酶活性(酶活力)6(2016湖北省高三模拟)受中医古籍肘后备急方中将青蒿“绞汁”用药的启发，屠呦呦采用低温提取的方法，从黄花蒿中直接提取得到青蒿素，是治疗疟疾的特效药。青蒿素易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，对热不稳定。回答下列问题：(1)青蒿素的提取_(填“适宜”或“不宜”)采用水蒸气蒸馏法提取的，原因是_。(2)屠呦呦采用乙醚浸提法提取青蒿素，其提取流程与
12、胡萝卜素的提取具有相似之处。在用乙醚浸泡提取前，现要对黄花蒿茎叶进行_和干燥，以提高萃取效率；干燥过程应控制好_和干燥时间，以防止_。(3)青蒿素是从野生植物黄花蒿中提取的，曾被世界卫生组织称作是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”，这一实例表明了生物多样性的_价值。青蒿素还对癌细胞的生长具有显著抑制作用，它能诱导多种癌细胞的凋亡。细胞凋亡是由_所决定的细胞_的过程。解析：(1)水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素不易挥发，不能随水蒸气蒸馏出，且对热不稳定，所以水蒸气蒸馏法不适用提取青蒿素。(2)由于青蒿素易溶于有机溶剂，不溶于水，从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用萃取法，并且通常在提取前将黄花
13、蒿茎叶进行粉碎和干燥，以提高效率；干燥过程应控制好温度和时间，以防止青蒿素分解。(3)青蒿素是从野生植物黄花蒿中提取，曾被世界卫生组织称作是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”，这一实例表明了生物多样性的直接价值。细胞凋亡是由基因所决定的细胞自动结束生命的过程。答案：(1)不宜青蒿素不易挥发，且对热不稳定(2)粉碎干燥温度青蒿素分解(3)直接基因自动结束生命7(2016佛山市二模)我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。回答下列相关问题：(1)图甲中滤膜的孔径应_(“大于”“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？_。(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入_(一种营养成分)，以及_。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于_培养基。(3)该小组通过统计_的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值比实际值_(“偏高”“偏低”)，理由是_或_。解析：(1)图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌，滤膜过滤才能获得大肠杆菌，对不耐高温的试剂，可以用滤膜过滤除菌。(2)培养基应该满足微生物生长需要，因此配制图乙中的基础培养基时除了水
