乳酸脱氢酶.doc

上传人:灯火****19 文档编号:137251469 上传时间:2020-07-06 格式:DOC 页数:8 大小:83KB
返回 下载 相关 举报
乳酸脱氢酶.doc_第1页
第1页 / 共8页
乳酸脱氢酶.doc_第2页
第2页 / 共8页
乳酸脱氢酶.doc_第3页
第3页 / 共8页
乳酸脱氢酶.doc_第4页
第4页 / 共8页
乳酸脱氢酶.doc_第5页
第5页 / 共8页
点击查看更多>>
资源描述

《乳酸脱氢酶.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《乳酸脱氢酶.doc(8页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。

1、乳酸脱氢酶科技名词定义中文名称:乳酸脱氢酶英文名称:lactate dehydrogenase;LDH定义:广泛存在的催化乳酸和丙酮酸相互转换的酶。L-乳酸脱氢酶(编号:EC 1.1.1.27)作用于L-乳酸;D-乳酸脱氢酶(编号:EC 1.1.1.28)作用于D-乳酸,两者均以NAD为氢受体。在厌氧酵解时,催化丙酮酸接受由3-磷酸甘油醛脱氢酶形成的NADH的氢,形成乳酸。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);酶(二级学科)本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 求助编辑百科名片 催化机理乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。乳酸脱氢

2、酶是能催化乳酸脱氢生成丙酮酸的酶,几乎存在于所有组织中。同功酶有五种形式,即LDH1(H4)、LDH-2(H3M)、LDH3(H2M2)、LDH-4(HM3)及LDH-5(M4),可用电泳方法将其分离。LDH同功酶的分布有明显的组织特异性,所以可以根据其组织特异性来协用诊断疾病。正常人血清中LDH2,LDH1。如有心肌酶释放入血则LDH1LDH2,利用此指标可以观察诊断心肌疾病。目录基本信息临床意义乳酸脱氢酶及其同工酶的简介血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶测定及意义 1. 正常参考值2. 临床意义乳酸脱氢酶高的原因乳酸脱氢酶偏低的原因乳酸脱氢酶(LDH)实验 1. 概述2. 实验原理3. 试剂盒

3、组成及试剂配制4. 需要而未提供的试剂和器材5. 操作步骤6. 计算7. 注意事项基本信息临床意义乳酸脱氢酶及其同工酶的简介血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶测定及意义 1. 正常参考值2. 临床意义乳酸脱氢酶高的原因乳酸脱氢酶偏低的原因乳酸脱氢酶(LDH)实验 1. 概述2. 实验原理3. 试剂盒组成及试剂配制4. 需要而未提供的试剂和器材5. 操作步骤6. 计算7. 注意事项展开编辑本段基本信息英文名称: LDH(lactate dehydrogenase) 序列信息:1 gsgcnldsar frylmg 长度:16 aa物种来源:Homo sapiens (human) 正常范围:血清 1

4、35.0215.0U/L; 尿 5602050U/L; 脑脊液含量为血清的1/10。 编辑本段临床意义(1)急性心肌梗塞发作后,早期血清中LDH1和LDH2活性均升高,但LDH1增高更早,更明显,导致LDH1/LDH2的比值升高。 (2)肝炎、急性肝细胞损伤及骨骼肌损伤时LDH5都会升高。 (3)患活动性风湿性心脏病、急性病毒性心肌炎、溶血性贫血、肾坏死等病LDH1也可升高。 编辑本段乳酸脱氢酶及其同工酶的简介乳酸脱氢酶1(LD)分子量为135140KD,由两种亚单位组成:H(表示heart)和M(表示muscle)。它们按不同的形式排列组合形成含4个亚基的5种同工酶,即:LD1(H4)、LD

5、2(H3M1)、LD3(H2M2)、LD4(HM3)、LD5(M4)。 LD催化丙酮酸与乳酸之间还原与氧化反应,在碱性条件下促进lactic acid向pyruvic acid方向的反应,而在中性条件下促进pyruvic acid向lactic acid的转化(为逆反应)。LD是参与糖无氧酵解和糖异生的重要酶。 由于LD几乎存在于所有体细胞中,而且在人体组织中的活性普遍很高,所以血清中LD的增高对任何单一组织或器官都是非特异的。在AMI时升高迟、达峰晚,故对早期诊断价值不大。由于半寿期长(10163小时),多用于回顾性诊断,如对人院较晚的AMI病人、亚急性MI的诊断和病情监测医学教育网搜集整理

6、。 LD在组织中的分布特点是心、肾以LD1为主,LD2次之;肺以LD3LD4为主;骨骼肌以LD5为主;肝以LD5为主,LD4次之。血清中LD含量的顺序是LD2LD1LD3LD4LD5. 编辑本段血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶测定及意义人组织中的乳酸脱氢酶(LDH)用电泳法可以分离出5种同工酶区带,根据其 乳酸脱氢酶电泳迁移率的快慢,依次命名为LDH1,LDH2,LDH3,LDH4,LDH5。不同组织的乳酸脱氢酶同工酶分布不同,存在明显的组织特异性,人心肌、肾和红细胞中以LDH1和LDH2最多,骨骼肌和肝中以LDH4和LDH5最多,而肺、脾、胰、甲状腺、肾上腺和淋巴结等组织中以LDH3最多。后来

7、从睾丸和精子中发现了LDHx,其电泳迁移率介于LDH4和LDH5之间。LDH是由H(心肌型)和M(骨骼肌型)两类亚基组成,分别形成LDH1(H4)、LDH2(H3M)、LDH3(H2M2)、LDH4(HM3)、LDH5(M4)。 正常参考值琼脂糖电泳法: LDH1(28.45.3)%; LDH2(41.05.0)%; LDH3(19.04.0)%; LDH4(6.63.5)%; LDH5(4.63.0)%。 醋酸纤维素薄膜法: LDH1(25.322.62)% LDH2(34.361.57)% LDH3(21.861.38)% LDH4(11.31.84)% LDH5(7.971.59)% 聚

8、丙烯酰胺法: LDH1(26.90.4)% LDH2(36.00.5)% LDH3(21.90.4)% LDH4(11.10.4)% LDH5(4.10.3)% 总之,健康成人血清LDH同工酶有如下的规律:LDH2LDH1LDH3LDH4LDH5。 临床意义心肌细胞LD活性远高于血清数百倍,尤以LDH1和LDH2含量最高。急性心肌梗塞时,血清LDH1和LDH2显著升高,约95%的病例的血清LDH1和LDH2比值大于1,且LDH1升高早于LDH总活性升高。病毒性和风湿性心肌炎及克山病心肌损害等,病人的血清LDH同工酶的改变与心肌梗塞相似。LDH1/LDH2比值1还见于溶血性贫血、恶性贫血、镰形细

9、胞性贫血、肾脏损伤、肾皮质梗塞、心肌损伤性疾病、瓣膜病等。 脑干含LDH1较高。颇脑损伤仅累及大脑半球时,只有血清同工酶谱的绝对值增高,而不影响同工酶的相互比值,如果累及脑干时,病人血清LDH1的含量也增高。 急性心肌梗塞发病后1224小时,血清LDH1业已升高。若同时测定LD总活性,可发现LDH1/总LDH的比值对急性心肌梗塞诊断的阳性率与可靠性优于单纯测定LDH1或CK-MB。 胚胎细胞瘤病人的血清LDH1活性升高。 肝细胞损伤或坏死后,向血流释入大量的LDH4和LDH5,致使血中LDH5/LDH4比值升高,故LDH5/LDH41可做为肝细胞损伤的指标。急性肝炎以LDH5明显升高,LDH4

10、不增,LDH5/LDH41为特征;若血清LDH5持续升高或下降后再度升高,则可认为是慢性肝炎;肝昏迷病人的血清LDH5LDH4活性极高时,常示预后不良;原发性肝癌以血清LDH4LDH5较为常见。 肾皮质以LDH1和LDH2含量较高,肾髓质以LDH4和LDH5活性较强。患急性肾小管坏死、慢性肾盂肾炎、慢性肾小球肾炎以及肾移植排异时,血清LDH5均可增高。 肺含LDH3较多,肺部疾患时血清LDH3常可升高。肺梗塞时LDH3和LDH4相等,LDH1明显下降;肺脓肿病人的血清LDH3LDH4常与LDH5同时升高。 血清LD总活性升高而同工酶谱正常(LDH1/LDH21)的病例,临床出现率依次为;心肺疾

11、病、恶性肿瘤、骨折、中枢神经系统疾患、炎症、肝硬变、传染性单核细胞增多症、甲状腺机能低下、尿毒症、组织坏死、病毒血症、肠梗阻等。 肌营养不良病人肌肉中LDH1LDH2明显增高,LDH5显著下降;而血清则相反,LDH1LDH2明显减少,LDH4LDH5显著,表明血清LDH同工酶主要来自肌肉组织。煤矿、钨矿矽肺病人的血清LDH1LDH2下降,LDH4LDH5升高。 (4)恶性病变时LDH3常增高。 编辑本段乳酸脱氢酶高的原因至于乳酸脱氢酶高的原因,有以下方面: 1当乙肝病毒携带者病情恶化成乙肝患者时,部分肝细胞受损,血清中LDH4和LDH5含量就会有不同程度的增高。 2乙肝治疗方法特别是是用药不当

12、,长期服用同一种药物时造成肾毒现象的产生。当肾毒现象出现时,血清中乳酸脱氢酶含量会迅速升高。 3乙肝不进行合适积极的治疗,发展到一定程度时会造成肝脏代谢严重异常,导致肾脏功能衰竭,从而也会引起乳酸脱氢酶含量升高。 4肺梗塞、恶性贫血、休克及肿瘤转移所致的胸腹水时,会引起乳酸脱氢酶的偏高2。 编辑本段乳酸脱氢酶偏低的原因乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。血清乳酸脱氢酶正常范围是100300U/L,当出现乳酸脱氢酶偏低时,常见原因如下。 乳酸脱氢酶偏低的原因1:检查过程中出现误差; 乳酸脱氢酶偏低的原因2:内分泌失调; 乳酸脱氢酶偏低的原因3:过于劳累、睡眠不好、心情不

13、好等。 总之,乳酸脱氢酶偏低一般不是很严重,经过调理即可恢复。但如果出现乳酸脱氢酶偏高就要引起重视了。因为肺梗塞、恶性贫血、休克及肿瘤转移所致的胸腹水时,会引起乳酸脱氢酶的偏高。3 编辑本段乳酸脱氢酶(LDH)实验概述乳酸脱氢酶(LDH)是催化乳酸和丙酮相互转化的同工酶,属于氢转移酶。该酶存在于所有动物的组织中,在肝脏中活性最高,其次为心脏、骨骼肌、肾脏,在肿瘤组织及白血病细胞中也能检测到。在大多数动物组织中,它是由两种肽链按一定比例组成的5种四聚体。它的每条肽链各由一个基因编码,经转录、翻译、修饰加工等过程,最后成为有生物学活性的物质。不同的动物,不同的组织或器官在不同的发育阶段或不同的生活

14、周期均有其特异性的同工酶酶谱。自然界中存在L和D两种乳酸脱氢酶4。 实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗D-LDH抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗D-LDH抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的D-LDH呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。 3. 样品稀释液(Sample Diluent)

15、:120ml/瓶。 4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):110ml/瓶。 5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):110ml/瓶。 6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1120l/瓶(1:100) 7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1120l/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):110ml/瓶。 9. 浓洗涤液(Wash Buffer):120ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液(Stop Solution):110ml/瓶(2N H2SO4)。 需要而未提供的试剂和器材1. 标准规格

展开阅读全文
相关资源
相关搜索

当前位置:首页 > 中学教育 > 教学课件 > 高中课件

电脑版 |金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号