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1、基因扩增荧光定量检测记录表实验日期: 检测项目: Lightcycle保存文件名: 使用说明:1 严格按单一流向进行实验,即试剂准备区(1区)样本处理区(2区)扩增分析区(3区),严禁逆向。本记录表的流向亦遵循此流程;2 各项目执行后在相应项目前的方框内打;3 实验室内温度为1530为合格范围;湿度不高于80%。4 实验后对实验室的清洁与消毒方法参见“PCR实验室清洁程序” ,实验后次日关闭通风设备和移动紫外灯;5 实验结束后,将标本的检测结果登记至标本记录本上以备查询。本记录表保存在归档文件夹中,存放于分子生物学实验室文件柜中,保存2年;6 Lightcycle扩增仪中结果保存于D盘对应实验
2、日期的文件夹中,如2004年4月的结果保存于“D:200404”中,每月底将当月资料备份于软盘中,保存2年。前期准备 试剂在有效期内 0.2%含氯消毒液在使用有效期内(30天) 加样器吸头灭菌是否在有效期内。 器具及仪器在校准有效期内(校准之日起1年) 操作者:试剂准备区(1区)实验前: 打开通风设备 0.2%含氯消毒液擦拭实验台面 记录室内温 湿度 试剂及器具:检测项目 试剂厂家: 批号 有效期 试剂配置记录: 按基因扩增实验室标准操作程序配制1%含氯消毒液 毫升; 按基因扩增实验室标准操作程序配制4NaOH溶液 毫升; 按基因扩增实验室标准操作程序配制0.1%焦磷酸二乙酯 毫升; 反应混合
3、液 共配 人份, ul 主反应液 ul Taq ul UNG酶。 70%(75%)乙醇 ml 无水乙醇, ml DEPC处理水。清点试剂存量 人份 实验后:填写记录 清洁地面 消毒实验台面及器具 打开紫外灯 按标准操作程序处理废弃物 操作者:样本处理区(2区)实验前: 0.2%含氯消毒液擦拭实验台面 记录室内温 湿度 室内质控物来源及浓度:来源 质控浓度 扩增位置 标本标识及扩增位置: 1917252101826311192741220285132129614223071523318162432核酸提取步骤: 按基因扩增实验室标准操作程序对标本进行核酸提取及定量标准品稀释 核实金属浴与水浴温度
4、按基因扩增实验室标准操作程序对标本进行逆转录 将提取核酸加样至毛细管并加反应试剂低温离心机:制冷:正常不正常 离心:正常不正常 异常情况处理: 实验后:填写记录 清洁地面 消毒实验台面及器具 打开紫外灯 按标准操作程序处理废弃物 操作者:扩增分析区(3区)实验前: 打开通风设备 0.2%含氯消毒液擦拭实验台面 记录室内温 湿度 Lightcycle扩增仪操作:开机后自检正常 按标准操作程序执行各操作步骤并设定扩增参数将标本标识填写到扩增仪上相应位置 仪器状态:正常 不正常测试所得标准值: Slope值: Intercept值: r值: 室内质控结果:结果: 填写室内质控记录、描质控图 结果是否失控:否 是 实验结果失控原因及处理:(失控判断标准参见标准操作程序中的室内质控程序)实验结果(拷贝数/毫升):结果有效性:有效 无效(依据标准操作程序中的实验结果有效性判断标准)1917252101826311192741220285132129614223071523318162432实验后:填写记录 清洁地面 消毒实验台面及器具 打开紫外灯 按标准操作程序处理废弃物 操作者: