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1、北京雷根生物技术有限公司北京雷根生物技术有限公司 -谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法) 简介： L-谷氨酰基转移酶(GGT 或-GT)是催化-谷氨酰基移换反应的酶，-谷氨酰基从谷 胱甘肽或其他含-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。 -谷氨酰基转移酶(GGT) 检测试剂盒(重氮比色法)以萘胺盐为底物，在 GGT 催化下，-谷氨酰基转移到甘肽分子上， 同时释放出游离的-萘酚，后者不重氮盐反应，产生红色化合物，其颜色深浅不 GGT 浓度 呈正比， 通过酶标仪检测 530nm 处吸光度， 进而计算酶的活性。 该试剂盒仅用于科研领域， 丌宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤
2、(仅供参考)： 1、 准备样品： 血浆、 血清样品： 血浆、 血清按照常规方法制备， 可以直接用于本试剂盒的测定， -20 保存，用于 GGT 的检测。 细胞或组织样品： 取恰当细胞或组织进行匀浆， 低速离心取上清， -20保存， 用于 GGT 的检测。 (选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计 算单位蛋白重量组织或细胞内的 GGT 含量。 2、 制作 GGT 标准曲线：按下表制备标准曲线。 3、 GGT 酶促反应：按照下表设置对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入， 并注意避免产生气泡。 如果样品中的酶活性过高， 可以减少样品用量或适当稀释后
3、再进 编号 名称 TE0141 100T Storage 试剂(A): 萘酚标准(1.5mmol/L) 1ml 4 避光 试剂(B): GGT assay buffer 5ml RT 试剂(C): GGT 显色剂 2 支 4 避光 试剂(D): 显色剂稀释液 250ml RT 使用说明书 1 份 加入物 0 1 2 3 4 5 萘酚标准(0.15mmol/L)(ml) 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 蒸馏水(ml) 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 相当于 GGT(U/L) 0 20 40 60 80 100 北京雷根生物技术有限公司北京雷根生物技术有限公
4、司 行测定。 5、GGT 检测：混匀，室温放置。分光光度计 530nm 处检测吸光度，比色杯光径 1cm， 以对照管调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。以酶活力单位为横坐标， 吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。 计算： 以标准管活力单位为横坐标，以吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，在标准曲线上查出 待测样品的 GGT 酶活力单位。 注意事项： 1、 血清或 EDTA 抗凝血检测效果较好，肝素钠、柠檬酸、草酸、氟化物等抗凝血会引起浑 浊或者抑制酶活性(10-15%)。 2、 尽量避免使用溶血样本。 3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 加入物 对照管 标准管 测定管 各浓度的萘酚标准(l) 5 待测样品(如血清等)(l) 5 GGT assay buffer(l) 30 30 30 混匀，水浴准确孵育。 GGT 显色工作液(l) 300 300 300 待测样品(如血清等)(l) 5
