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1、稳心颗粒对心力衰竭兔心肌细胞钙调控蛋白的影响,连志明，权力，唐艳红 武汉大学人民医院,研究背景,心肌细胞收缩/舒张功能与心肌细胞内钙循环密切相关 心衰时心肌细胞钙离子循环异常是心肌舒缩功能障碍的细胞学基础 稳心颗粒抗心律失常时能改善心衰患者和动物的心功能 稳心颗粒与西药联合应用治疗CHF具有协同增强心功能的作用,Bers (2002) Nature 415: 198-205,钙 循 环,通过左心容量和压力超负荷方法制作家兔心衰模型及稳心颗粒对心衰家兔心功能的作用 探讨稳心颗粒对心衰时钙调控蛋白的影响,研究目的,主要器材 多道生理记录仪 （中国四川锦江通用实业有限公司） 超声心动图仪 （ Viv
2、id 7，美国GE公司） 基因扩增仪 （Bioneer，EDC-810) DNA电泳仪 （ Bio-RAD ，Sub-Cell Model 96） 酶标仪 （PerKinElmer，Wallac 1420 ） 凝胶成像仪 （ Bio-RAD，Universal Hood ）,材料和方法,材料和方法,主要药品和试剂,稳心颗粒 （山东步长制药有限公司） 肝素钠注射液 （天津生物化学制药有限公司） 钙调控蛋白引物 （Invitrogen Biot） 钙调控蛋白一抗 （abcam公司） 组织总蛋白提取试剂盒 （谷歌生物公司）,心衰动物模型制作,新西兰大耳兔,主动脉瓣关闭不全,腹主动脉缩窄,EF 1.2
3、0 cm,脉压增大50%,超声资料 左室舒张末内径 LVEDD 左室收缩末内径 LVESD 左室舒张末容积 LVEDV 左室收缩末容积 LVESV 左室射血分数 LVEF 左室短轴缩短分数 LVFS,检测指标,RT-PCR和Western blot 肌浆网钙泵 SERCA2a 雷诺定受体 RyR2 受磷蛋白 PLB 钠钙交换体 NCX 基因和蛋白表达情况,检测指标,计量数据均以均数标准差表示 采用单因素方差分析 所有数据均采用SPSS13.0分析 P0.05有统计学意义,统计学处理,稳心颗粒改善心衰家兔的心功能,与假手术组相比， P0.05；与心衰组相比， P0.05,假手术组 （n=8）,假
4、手术稳心颗粒组 （n=8）,心衰组 （n=7）,心衰稳心颗粒组 （n=7）,结 果,稳心颗粒能提高心衰家兔的 LVEF 和 LVFS,*P0.05, 与假手术组比较，P0.05,与 心衰组比较,结 果,心衰组RyR2mRNA表达降低,稳心颗粒对 RyR2表达无影响,RyR2,-actin,1. shame 2. shame-drug 3 .HF 4. HF-drug,149bp,184bp,1 2 3 4,1 2 3 4,*P0.05,结 果,心衰组SERCA2a表达降低，心衰稳心颗粒组 SERCA2a表达水平上调,143bp,184bp,SERCA2a,-actin,1. shame 2.
5、shame-drug 3 .HF 4. HF-drug,*P0.05, 与假手术组比较，P0.05,结 果,心衰组NCXmRNA和蛋白水平表达降低 稳心颗粒对NCX表达无影响,133bp,184bp,NCX,-actin,*P0.05 vs 假手术组,1. shame 2. shame-drug 3. HF 4. HF-drug,1 2 3 4,1 2 3 4,结 果,本研究采用主动脉瓣返流联合腹主动脉缩窄致左室压力和容量超负荷的方法成功制作家兔心衰模型 稳心颗粒可增加容量和压力超负荷心衰兔的LVEF和LVFS，改善左室收缩功能,结 论,结 论,稳心颗粒改善心衰心功能的机制,稳心颗粒改善心衰心功能的机制,结 论,心衰组 NCXmRNA 和蛋白表达减少，可能与心衰分期有关，相关的机制还需要进一步研究 。,结 论,稳心颗粒可一定程度上改善容量和压力超负合所致家兔心衰模型的心功能 稳心颗粒可抑制SERCA2a表达下降并增强其活性，进而改善心衰时钙循环，改善心肌收缩功能和舒张功能,结 论,未检测钙调控蛋白的磷酸化程度 未测定胞浆内钙离子浓度和相关离子通道电流的变化,局 限 性,谢 谢！,
