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1、医学实验动物学 实验课,实验一 大、小鼠的给药、采 血、麻醉和解剖,实验目的,1.掌握大小鼠常用给药方法和采血技术 2.掌握大小鼠的麻醉方法和解剖步骤 3.熟悉大小鼠的解剖 结构,小鼠的抓取和固定,注意点 抓取小鼠时动作要迅速，要轻 防止被小鼠转过头咬，抓其颈后皮肤要多 如果被咬，应立即挤出血液，清水冲洗,大鼠的抓取与固定,小鼠灌胃（给药方法之一）,将实验小鼠徒手固定 灌胃针从嘴角处插入口腔内，紧贴咽后壁插入食道（1ml注射器，深度大约为3cm） 推动针管给药（生理盐水） 注意不要插入气管，不要抓的太紧以致小鼠窒息死亡,小鼠尾静脉注射（给药方法之二）,固定器固定小鼠 消毒尾部，扩张血管，左右两
2、侧的静脉 将尾巴成一个适宜注射的角度，1ml注射器平行向心方向刺入静脉血管 干棉球压迫止血 注意排除气泡 注射点由尾部远端,尾静脉,小鼠眼底静脉丛采血,一人徒手固定小鼠于桌面上，使眼球充分向外突出 将注射器针头从内眼角位置插入眼球和眼眶之间，进针约0.5cm（1ml注射器） 另一人慢慢抽动针管采血 注意要将小鼠固定好，防止其头动,小鼠麻醉方法,腹腔麻醉：进针点为右下腹腔，进针角度为与身体成45度，深度约1cm。 麻药：麻醉药为3.5%水合氯醛，剂量按小鼠体重0.1ml/10g，20g的小鼠为0.2ml,小鼠心脏采血,右下腹腔麻醉（麻醉药为3.5%水合氯醛，剂量按0.1ml/10g) 待其麻醉后
3、，仰卧位固定在解剖板上 胸骨左侧，腋窝平行线下2-3肋骨间，小鼠心搏动最强处斜行刺入（1ml注射器） 缓慢抽动针管采血 取血量多时采用（同样适用于大鼠）,大鼠心脏采血,麻醉：右下腹腔，麻醉药为3 3.5%水合氯醛，剂量按大鼠体重0.1ml/10g， 心脏采血方法同小鼠,大鼠心脏采血,大体解剖观察及绘图,1. 将SD大鼠用3 3.5%水合氯醛腹腔麻醉，按0.1ml/10g体重。 2 . 待大鼠麻醉后，腹部朝上固定于解剖板。 3. 用10cm剪刀从下腹部向上剪开皮肤，打开腹腔，观察腹腔内脏器，观察大鼠肝脏时特别注意大鼠无胆囊。 4. 用14cm剪刀打开胸腔，观察胸腔脏器。 5. 根据大体解剖所见，
4、绘图。,解剖观察,操作项目,小鼠：灌胃、尾静脉注射、眼底静脉丛采血 大鼠：心脏采血*、麻醉后解剖观察,实验二 1.模拟肿瘤（组织块）移植 2.裸鼠与正常小鼠免疫器官的比较,实验目的,了解实验裸小鼠和KM鼠的胸腔结构 了解正常的胸腺结构与不增殖胸腺基的形态 掌握正确的胸腺摘除方式 掌握组织块皮下移植的基本技术,实验原理,哺乳动物的胸腺是T淋巴细胞分化成熟的场所，而T淋巴细胞是参与宿主对异体的组织或细胞排斥的主要成分，裸鼠胸腺的原基从第三咽囊起不能发育，因此，裸鼠囊状很小的胸腺残基保持终身。 胸腺的不增殖导致成熟的T淋巴细胞数大量减少，其结果是裸鼠机体不能排斥同种异体和异种间的组织器官移植。 人类
5、的肿瘤能在裸鼠的体内生长，使裸鼠作为一种疾病模型的载体，广泛地运用于研究人类移植性肿瘤生长和转移。,影响被移植的动物组织或细胞成活的因素,组织的相容性 宿主对移植物的血供 供体组织或细胞的活性 其他因素,模拟移植物的选择,肾脏组织是哺乳动物中血供较好、活力较强的组织,实验步骤 1 (麻醉解剖小鼠）,分别将裸鼠和KM鼠腹腔注射3.5%水合氯醛，按0.1ml/10g体重。 待小鼠麻醉后，腹部朝上固定于小鼠固定板上。 以3%碘酒棉球和75%酒精棉球进行皮肤消毒；同时，对裸鼠腋部进行消毒。 用直头剪刀于KM小鼠生殖口上端切一小口，沿腹部两侧作弧型切开，直至胸膈肌根部。,实验步骤 2(观察胸腺),观察膈
6、肌形状后，于两侧根部分别切一小口，将膈肌横向切开，绞断肋骨，直至锁骨，然后掀起胸骨，暴露整个胸腔。 直视心脏，在心脏的上部，主动脉弓处，有两片乳白色蝴蝶状的小片，即为胸腺。,实验步骤 3（取肾脏组织）,用圆头镊将肠道拨向对侧，暴露肾脏。 用眼科剪刀取下肾脏，剥去肾包膜，放入盛有生理盐水的培养皿中。 用剪刀将肾脏分解为若干2*3mm组织小块，取边缘整齐、色泽红润为佳。 将一小块肾组织放入套筒针内备用。,实验步骤 4（组织移植）,选取组织的目标区域，常用区域为肋侧（近腋窝处 ）。 在离目标区域中心点1-2cm处，用眼科小剪刀作一2-3mm切口。 用套筒针在切口处刺入皮下直至目标中心区域，将组织块推入，并迅速拔出。,实验步骤 5,麻醉、解剖裸鼠，与KM鼠比较胸腺的区别 裸鼠胸腺只剩残基，基本上看不到,实验报告要求:,完成实验指导上第3、13、16页三份实验报告 在实验报告的实验结果一项中完成小鼠解剖图、大鼠解剖图,注意事项:,实验时请不要戏弄动物、防止被动物咬伤，防止动物逃逸 实验结束后请把器械清洗干净，整理齐全,
