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1、献血者血红蛋白检测技术规范（硫酸铜目测法）A.1 试验原理全血滴入标准硫酸铜溶液中，形成一层铜蛋白膜，包围在血滴外层。观察全血在已知相对密度（比重）硫酸铜溶液中沉浮情况，可判定其相对密度（比重），从而确定其血红蛋白浓度。A.2 试剂A.2.1 用于男性献血者（Hb120g/L）检测的硫酸铜溶液比重为1.0520。A.2.2 用于女性献血者（Hb115g/L）检测的硫酸铜溶液比重为1.0510。A.2.3 不同用途试剂瓶标识应便于区分A.2.4 采用商品化硫酸铜试剂的，按试剂说明书规定的条件储存，在有效期内使用。A.2.5 硫酸铜溶液也可自行配制，配制方法见A.5，应保存配制记录。A.2.6 硫
2、酸铜溶液比重随温度变化而变化的，温度每上升2，比重下降0.0005。在配制和使用时应注意这一特性。A.2.7 每瓶（50 ml）硫酸铜溶液的可用于检测25人次。A.3 标本要求A.3.1 新鲜采集的末梢血或静脉血，抗凝或不抗凝血液均可使用。A.3.2 陈旧、溶血和严重乳糜的血液不可用来试验。A.4 操作步骤和结果判断A.4.1 常规采集手指末梢血或静脉血。A.4.2 在距硫酸铜液面上方1cm处垂直将1滴血液轻轻滴入，血滴应不含气泡。A.4.3 在15秒内肉眼观察，判断结果：1）血滴很快下沉于瓶底，表明血液比重大于硫酸铜溶液比重，血红蛋白含量符合献血标准；2）血滴在硫酸铜溶液中部悬浮10 -15
3、秒后下沉于瓶底，表明血液比重等于硫酸铜溶液比重，血红蛋白含量符合献血标准；3）血滴悬浮在硫酸铜溶液上部，15秒时不下沉，表明血液比重小于硫酸铜溶液比重，血红蛋白含量不符合献血标准。A.4.4 记录检测结果。A.5 硫酸铜溶液配制方法A.5.1 贮存液（比重为1.1000）配制 称取硫酸铜结晶(CuSO45H2O，分析纯)170.0g置于大试剂瓶中，在1000ml容量瓶中加入蒸镏水至刻度，测量此蒸镏水的温度，根据表A-1查出与温度相应的蒸镏水毫升数，不足的容量用滴定管补加入容量瓶中。将容量瓶中蒸镏水全部倾入盛硫酸铜结晶的大试剂瓶中，再将容量瓶倒置2分钟，使蒸镏水全部滴入大试剂瓶中。此时，容量瓶内
4、尚附着蒸镏水约0.8ml，在计算时此容量已加在表内数字中。摇动试剂瓶使硫酸铜完全溶解，即得比重为1.1000的贮存液。如欲知所配制的贮存液比重是否准确，可用液体比重天平进行测定。如配得的贮存液比重并非1.1000，比重每超过0.0001，则在1000ml溶液中加入蒸镏水1ml。例如，所配成的贮存液的比重1.1050，则在此溶液1000ml中加入蒸镏水50ml，即可校正其比重为1.1000。反之，如所配溶液的比重小于1.1000，则每少0.0001，应在1000ml硫酸铜溶液中加入饱和硫酸铜溶液1ml。在盛贮存液的试剂瓶上贴好标签，做好配制记录。表A-1 配制比重1.1000硫酸铜溶液需用蒸镏水
5、的容量蒸镏水温度蒸镏水量（ml）蒸镏水温度蒸镏水量（ml）101003.6261006.5121003.8281007.0141004.0301007.7161004.3321008.3181004.7341008.9201005.1361009.6221005.5381010.4241006.0401011.2A.5.2 工作液配制A.5.2.1 配制100 ml不同比重工作液所需贮存液容量见表A-2。A.5.2.2 确定工作液配制总量，量取所需量贮存液，加入容器内，慢慢加入蒸镏水至工作液总量，边加边摇匀，以消除硫酸铜溶液加水后容量缩减的影响。配制时贮存液和蒸镏水的温度应相同，但不一定为25
6、，1040之间影响不大。表A-2 硫酸铜应用标准液配制比重贮存液用量（ml）比重贮存液用量（ml）比重贮存液用量（ml）1.035034.301.049048.201.063062.301.036035.301.050049.201.064063.351.037036.301.051050.201.065064.401.038037.251.052051.251.066065.401.039038.201.053052.251.067066.401.040039.201.054053.301.068067.401.041040.201.055054.301.069068.401.042041.
7、201.056055.301.070069.401.043042.201.057056.301.071070.401.044043.201.058057.301.072071.451.045044.201.059058.301.073072.501.046045.201.060059.301.074073.501.047046.201.061060.301.075074.501.048047.201.062061.30A.5.2.3 工作液配制后应检测其是否符合质量要求：1）测定比重是否准确，可用液体比重天平测定，必要时采用相对密度测定法；2）采用已知低于和高于献血者血红蛋白标准的全血进行检测，应符合预期要求。A.5.2.4 将配置完毕的工作液分装至小试剂瓶，粘贴标签。A.5.2.5 记录配制过程。
