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1、实 验 诊 断 学 概 论一、实验诊断学及其进展(一)基本概念实验医学(laboratory medicine,laboratry science)在国内习惯称为医学检验学。它是一门包括多专业的边缘性学科,是临床医学中在诊断、治疗、预后判断和预防方面必不可少的实用性学科。实验诊断学指医生的医嘱通过临床实验室分析所得到的信息为预防、治疗和预后评价所用的医学临床活动。包括实验室前的合理选择实验项目,检验单申请,样本采集,样本传送;实验中对检验样本的检测分析;实验室后的结果报告,实验室数据分析等。医学检验学至少包括临床生物化学、临床微生物学、临床免疫学、临床血液学和临床基检验学五个分支学科。前四个与
2、国外一致,而临床基础检验学则是我国根据国内传统习惯命名的一个分支学科,它所包括每位从事医学检验学专业的人员所必须首先掌握的基本功。(二)实验诊断学与检验医学随着科学技术的不断的发展,医学检验学的内容逐渐拓宽和深化。特别是近30年来由于电子技术、计算机、分子生物学、生物医学工程等的飞速发展,使医学检验学的面貌日新月异,已从化学定性的得选试验发展一到高精度密度的定时试验;从手工操作发展到高度自动化分析;从应用常量标本,一次只能检测一个项目发展到用微量或超微量标本(数微升十几微升)一次检测多个项目;从必须采血标本才能检测发展到有些项目经皮肤即可检测的无创性检查方法等等;使医学检验学跃进成为发展最为迅
3、速、应用高精尖技术最为集中的学科之一。已远远超出以前辅助临床实验诊断学的范围,在疾病的预防与诊断、疗效与预后的判断、治疗药物检测、健康体检评价、遗传疾病的预测等领域,正发挥越来越大的作用。实验诊断学的任务是将检验的结果,结合病史/家族史、症状/体征以及影象检查/病理检查等,对病人作出正确的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判断。检验医学的任务是使用仪器、试剂、方法对标本/样品进行检测,并做好质量控制,为临床提供准确的检验结果。(三)实验诊断学的主要内容:检验科(或实验诊断中心)的专业设置1、 临床生化检验专业:用分光光度法、电泳法、离心分离法、色谱法、电极法、火焰光度法和原子吸收分光光度等方法测定
4、人体血液和体液中的各类代谢物、酶类、水盐血气、内分泌激素、治疗药物浓度、维生素与微量元素等。2、 临床免疫学检验专业:用细胞免疫、体液免疫、抗原抗体反应或各种免疫标记技术检测血液和体液中的内分泌激素、血药浓度、肿瘤标记物、各类传染病抗原抗体、细胞因子等都属于免疫检验的范围,而且免疫学方法也可以用于生化、微生物、血液等项目的测定。3、临床微生物学检验专业:对人体各类标本进行细菌培养与药物敏感试验、血清学反应试验、传染病抗原、抗体检测、用免疫学方法检测传染性病原体以及医院内感染的微生物检测。4、血液学检验专业:各类血液细胞的计数与形态、分类,凝血及止血各成份及凝因子测定,骨髓细胞形态学与组织化学染
5、色法诊断血液病及各种贫血的实验室检查。5、临床基础检验:该专业包括常规血液学检验、常规体液检验、血库与输血等。其大部分常规工作在“门诊化验室”完成。常规体液检验包括尿液的化学成份分析、尿沉渣检验、浆膜腔液成份分析与细胞形态检查、细菌学检查、脑脊液及其它体液分析。血库与输血的工作主要有:输血安全有关的实验室检查,血型学检查与交叉配血,血型有关的免疫学检查,成份输血、HLA配型等。6、分子生物学检验:用基因诊断的方法进行遗传病检查,微生物基因检验,肿瘤相关基因检验,基因芯片技术及在临床应用。7、实验室或研究室,一些较大的医院各临床科室为了配合科研工作,建立与本专业相关的实验室,进行科学研究,开展非
6、常规性实验,完成各级课题,有些实验室开展的试验代表该专业先进水平。二、标本的采集和处理1、空腹血,有些生化物质消化吸收快,受进餐影响大。例如:血葡萄糖、甘油三酯,只有空腹才能反映真正水平;有些餐后的高脂血症血浆混浊,干扰生化反应,因此这些项目尽可能用空腹血。2、抗凝剂的合理使用,许多血液分析需用抗凝血,不同检验项目抗凝剂不同。例如血液常规要用EDTA-K2,血沉与血凝试验要用枸橼酸钠,血气分析用1000U/ml的肝素,否则就会影响检验结果。检验科将会提供指定的抗凝剂。3、 其它影响因素:1)溶血标本对K+测定的影响。2)采血不畅(部分凝固)时对血小板与凝血因子测定的影响。3)输液污染对K+、葡
7、萄糖浓度的影响。4)标本放置时间过长对结果的影响。如葡萄糖的分解,RBC代谢对血气的影响,细胞内外离子交换引起K+浓度的改变等。5)尿液放置时间过长,红细胞溶解;24小时尿防腐剂的正确使用等。6)采血时间的影响,如糖耐量试验,餐后2小时的血糖;血药浓度的峰值与谷值的掌握等。三、实验诊断的临床应用和评价(一)实验结果的报告方式与分析1、定性结果,用阴性或阳性表示,阳性表示时又可以写成(+)(+)反映阳性的强度。2、用文字表示,如细菌培养结果与药敏试验,细胞形态的描述与异常细胞检出。3、定量结果与计量单位,按国际计量单位(SI制)1)计数量:例如白细胞用6109/L表示,红细胞4.51012/L等
8、。2)浓度单位:凡是分子量明确的物质用mmol/L或mol/L表示;凡是分子量不明确或混合物(血清蛋白)用g/L, mg/L, g/L表示。酶的活性用单位(u)表示。部分免疫反应用滴度表示,如HBsAg滴度1:512阳性。还有一些用时间表示如PT 13秒;血沉 10mm/h等等。在定量分析结果中,计量单位十分重要,计量单位用错或看错会造成医疗失误,尤其与传统惯用单位换算更应注意。一般定量检验结果的报告方式包括:试验名称、英文缩写、检验结果(数值)、计量单位、参考值范围、提示:“H或,L或”。(二)常用诊断性实验的评价指标:灵敏度:某检验项目对某种疾病具有鉴别、确认的能力,即所有病人中真阳性结果
9、的百分数,即TP/TP+FN100%特异性:某检验项目确认无某种疾病的能力,即所有非病人中真阴性结果的百分数,即TN/TN+FP100%准确度:诊断准确结果的百分数。按所定诊断按“金标准”诊断标准有病无病阳性(真阳性)b(假阳性)阴性c(假阴性)d(真阳性)即实际有病而按该诊断标准被正确地判为有病的百分率(真阳性率)。即实际无病按该诊断标准被正确地判为无病的百分率(真阴性率)。(三)正常参考值与医学决定水平1、正常参考值是指对抽样的个体进行某项目检测所得的值;所有抽样组的值的平均值加减其标准差即为参考范围,参考值结果来自大批量健康人的实验室调查,调查范围不仅要求标本量大,而且要考虑到年龄、性别
10、、职业、地区分布甚至于嗜好等因素,以求出一个具有代表性的平均值范围,供病人结果对照参考。它可以来自有关文献,但最好各实验室有自己的参考值。2、医学决定水平:所谓医学决定水平就是指该项结果如高于或低于某个值,有着直接的临床意义,针对这个值,医生应采取一定的临床措施。一个检测结果所产生价值的在于能对患者处理起提供依据的作用,所以医学决定水平把试验结果分为三种情部况:第一种应进一步检查;第二应采取治疗措施;第三是对预后进行估计。医学决定水平有不同的限值,这个限值可由医生根据理论与经验确定。例如AFP(甲胎蛋白)的正常参考范围是600ng/ml才有肝癌的诊断价值。后二者即不同的医学决定水平限值。再如白
11、细胞总数的参考值为(4.0-10)109/L,当白细胞低于4.0109时,应进一步检查白细胞减少的原因;如果化疗病人的白细胞总数低于3.0109/L,提示临床应立即停止治疗;如果中性粒细胞绝对值低于(1.5-2.0)109/L时,临床上可诊断为粒细胞减少症,应积极采取抢救措施。(四)进展循证医学(Evidence-Based Medicine)与循证检验医学:循证医学就其本意而言,指的是临床医生对病人诊治,都应该有充分的科学依据,任何决策需建立在科学证据的基础之上。而这种科学证据也应是当前最佳的证据。个体化诊断与个体化治疗:被检个体的基因背景及病生状态的综合分析的结果应用于该个体的预防、诊断和治疗上,这种诊断称为个体化诊断。床旁检测(POCT):指病人医疗现场进行的医学检验。