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1、Microscopical identification 是利用显微镜来观察生药的组织构造、细胞形状以及内含物，描述显微特征，制定显微鉴别依据，用以鉴定生药品种和质量的重要手段之一。 通常适用于性状鉴定不易识别的生药，性状相似不易区别的多来源生药、破碎生药、粉末生药以及用粉末生药制成的丸散锭丹等中药成方制剂的鉴定。,第五节 显微鉴定,一 显微鉴定常用的方法,显微制片 横切片或纵切片 表面制片 粉末制片 解离组织片:氢氧化钾法或硝铬酸法 细胞内含物的鉴定 细胞壁性质鉴定:木质化(加间苯三酚及浓盐酸显红色)、木栓化(加苏丹试液显红色)、纤维素化、硅质化细胞壁 细胞及细胞内含物的测量,（一）显微鉴定
2、的方法 1、横切片或纵切片：选取药材适当部位，软化后用徒手或滑走切片法，切成1020m的薄片，选用甘油醋酸或水合氯醛等试液观察。 无支持剂切片法：徒手切片法、滑走切片法（鲜嫩） 有支持剂切片法石蜡切片法、冰冻切片法,2、表面制片(叶类、花类、果实种子类、全草类)：将样品湿润软化后，切取一部分或撕取其表面，加适当的试液，观察各部位的表皮特征。,平轴式气孔,直轴式气孔,不定式气孔,不等式气孔,环式气孔,腺毛,腺鳞,果实表面,非腺毛,3、粉末制片：将药材粉末少量置于玻璃片上，摊平，加水合氯醛试液（透化）进行观察。,4、解离组织片：用以观察单个细胞的完整形状，如导管、管胞、纤维、石细胞等。 根据木化程
3、度不同可分别用氢氧化钾法、硝铬酸法、氯酸钾法等。 解理剂破坏胞间层(果胶层、中胶层)，使各个细胞分离。在解理前应先将样品切成宽或厚约2mm的小条或片，放在试管中，加解理剂，加热至用玻璃棒能离散为止。倾去解理液，加水洗涤后，取少量置于载玻片上，用稀甘油装置观察。,5、花粉及孢子制片：取花粉、花药（或小花朵）或孢子囊群（干燥品浸于冰醋酸中软化），捣碎，离心，醋酐-硫酸(9：1)处理，加热2分钟，沉淀水洗次，加50甘油与苯酚34滴，用品红甘油胶封藏。也可用水合氯醛装片观察。,二、显微鉴定要点,（一） 根类生药 根类生药大多取自被子植物的根，包括药用为根或以根为主带有部分根茎的生药。如人参、何首乌、牛
4、膝、三七等。 首先根据维管组织，区别其为双子叶植物根或单子叶植物根。,双子叶植物根的初生构造，皮层宽，中柱小、韧皮部束及木质部束数目少，相间排列，初生木质部呈星芒状，一般无髓。,双子叶植物根次生构造的特征 1）表层为木栓组织，少数为表皮； 2）皮层狭窄，一般初生皮层不存在，为次生皮层，韧皮部发达，有形成层； 3）木质部有导管、管胞、木纤维、木薄壁细胞及木射线； 4）根大多无髓，少数有明显的髓部，如龙胆、乌头等。 单子叶植物根的特征 1）无木栓组织，其表皮细胞外壁有时增厚或由表皮发育成数列根被细胞，壁木栓化或木质化，有的壁上有增厚的细条纹，如百部； 2）皮层宽广，占根的大部分； 3）无形成层，内
5、皮层凯氏点明显；韧皮部束和木质部束数目多，相间排列成一圈，无射线 4）有髓,髓部大，多为薄壁细胞。,甘草,百部块根横切面： 根被为3-5列细胞，壁木化。 皮层宽广；内皮层细胞较小，类方形或类长方形，壁木化增厚。 中柱约占根的1/5-1/8；中柱鞘为1-2列薄壁细胞；韧皮部束15-24个，与木质部束相间排列，各束木质部内侧由木化组织连接成环层。 髓薄壁细胞类圆形，非木化。,有些双子叶植物根有异常的三生构造，如 何首乌块根的形成层环外有数个异型复合维管束； 牛膝根有数轮同心排列的维管束； 商陆根有数轮形成层环等。,何首乌块根,商陆-罗盘纹,根的分泌组织大多分布在韧皮部，如乳汁管（桔梗、党参），树脂
6、道（人参、三七），油室（木香、当归），油细胞（细辛、青木香）。 常有草酸钙结晶，簇晶（何首乌、人参），针晶（天冬、麦冬），砂晶（牛膝），方晶及晶纤维（甘草、红芪）。,2.粉末特征,根类粉末生药的鉴定，重点鉴别有鉴别特征的 1）细胞后含物（淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、硅质块等）； 2）厚壁组织（纤维、纤维管胞、晶纤维、分隔纤维、石细胞等）； 3）分泌组织（分泌细胞、分泌腔、分泌道、乳汁管等）； 其次鉴别表皮、下皮、根被或木栓组织、内皮层、导管及管胞。,(二) 根茎类生药,根茎类生药是以植物的地下茎入药，包括根状茎（根茎）、块茎、鳞茎和球茎,如天南星、百合、大黄等。 1.性状鉴定 根茎类生药表面有节
7、和节间，以单子叶植物的根茎为明显，节上常见有退化的鳞片状叶，有时可见叶痕和芽痕，周围或下侧有不定根或根痕。蕨类植物根茎的表面常有鳞片或鳞毛，有的周围密布整齐的叶柄基。 根茎类生药的横断面，双子叶植物根茎呈放射状结构，中心有明显的髓；单子叶植物的根茎不呈放射状，内皮层环大多明显，环圈内外均散有维管束小点；蕨类植物根茎有的中心为木部，无髓，有的木部呈完整的环圈，中心有髓，有的数个分体中柱断续排列为圈状。,2.组织构造,观察根茎类生药的组织构造，首先根据中柱、维管束的类型，区别其为蕨类植物、双子叶植物或单子叶植物的根茎。 蕨类植物根茎的最外层，多为厚壁性的表皮及下皮细胞，基本薄壁组织较发达。中柱的类
8、型有下图4种。,金毛狗脊,蕨类植物根茎也可观察叶柄基横断面分体中柱的数目和排列情况作为鉴别点。,双子叶植物根茎大多有木栓组织，或有木栓石细胞（如苍术、白术）；皮层中有时可见根迹维管束；中柱维管束无限外韧型，环列；中心有髓。,黄连,少数种类有三生构造，髓部有异型复合维管束（如大黄）。,掌叶大黄,唐古特大黄,药用大黄,单子叶根茎的最外层多为表皮，皮层中有叶迹维管束，内皮层大多明显；中柱中散有多数有限外韧维管束，也有周木维管束（如菖蒲）。,有的根茎类生药有油室(如川芎、苍术、白术)或油细胞(如菖蒲、石菖蒲、香附)。 根茎类生药颇多含草酸钙针晶束(如天南星、半夏、天麻、白及、玉竹、黄精、山药)，针晶束
9、大多存在于粘液细胞中。 此外，还应注意厚壁组织、导管以及草酸钙结晶的类型。,半夏粉末针晶束,3.根茎类生药粉末的观察 与根类相似。注意鳞茎、块茎、球茎常含多量较大的淀粉粒，其形状、大小、脐点、层纹以及复粒、半复粒、多脐点单粒(如贝母类)等特征是鉴别的重要依据。,（三）茎藤类生药,茎类中药，以植物的地上茎或茎的一部分入药，包括 木本植物的茎藤，如关木通、海风藤、大血藤、鸡血藤等； 草本植物茎藤，如首乌藤、天仙藤； 茎枝，如桂枝、桑枝、桑寄生等； 茎刺，如皂角刺； 也有仅用茎的髓部，如通草，小通草，灯心草等。,1.性状鉴定 木质藤本和茎枝，多呈圆柱形或扁圆柱形，有的扭曲不直，黄棕色，粗细大小不一。
10、 少数具特殊颜色，如大血藤呈红紫色。 表面粗糙，可见深浅不一的裂纹及皮孔，节膨大，具叶痕及枝痕。 质地坚实，断面纤维性或裂片状，平整的横切面木质部占大部分，呈放射状结构，有的导管小孔明显可见，如关木通，青风藤；有的可见特殊的环纹，如鸡血藤。 气味常可帮助鉴别，如海风藤味苦，有辛辣感，青风藤味苦而无辛辣感。,草质藤本较细长，圆柱形或干缩时因维管束和机械组织的存在，而形成数条纵向的隆起线，也有呈类方柱形，表面多呈枯绿色，也有呈紫红褐色，如首乌藤；节和节间、枝痕、叶痕 较明显。质脆，易折断，断面可见明量的髓部，类白色，疏松，有的呈空洞状，有些草本植物茎，如石斛，麻黄，则列入全草类中药。,2茎类生药的
11、组织构造 ： (1)周皮或表皮 木质茎最外方为周皮，幼嫩茎常可见到表皮。草质茎最外方为表皮，角质层的厚度、毛茸和气孔，都是鉴别的主要特征。 (2)皮层 (3)韧皮部 (4)形成层 注意是否明显，一般都成环状。 (5)木质部 注意导管、管胞、纤维、薄壁细胞、射线细胞的形状和排列情况。 (6)髓部 大多由薄壁细胞构成，多具明显的细胞间隙。草质茎髓部较发达，木质茎髓部较小。 3.粉末生药的观察 除了无叶肉组织外，其他组织一般都可能存在。,（四）皮类生药,皮类生药通常是指来源于裸子植物或被子植物（其中主要是双子叶植物）的茎干、枝和根的形成层以外的部分的药材。它由内向外包括次生和初生韧皮部、皮层和周皮等
12、部分。其中大多为木本植物茎干的皮，少数为根皮或枝皮。 1.性状鉴定 应注意皮类生药的形状、外表面、内表面、折断面和气味等方面的特征。,(1)形状 (2)内表面 显不同颜色，如 肉桂呈红棕色，杜仲呈紫褐色。有的皮类生药，内表面刻划有油痕，如肉桂、厚朴。 (3)外表面 一般较粗糙。注意外表颜色、皮孔。皮孔的形状、颜色、分布的密度，常是鉴别皮类的特征之一。如杜仲的皮孔呈斜方形，牡丹皮的皮孔呈横长略凹陷。少数皮类外表面有钉状物，如海桐皮。部分皮类，木栓层已去或部分除去而较光滑，如黄柏。 (4)折断面 性状主要有：,平坦 组织中富有薄壁细胞而无石细胞群或纤维束的皮，折断面较平坦，无显著突起物，如牡丹皮。
13、 颗粒状 组织中富有石细胞群的皮，折断面颗粒状突起，如肉桂。 纤维状 组织中富含纤维的皮，如合欢皮。 层状 组织构造中的纤维束和薄壁组织成环带状间隔排列，折断时形成明显的层片状，如黄柏。 另外，杜仲有胶丝。 (5)气味 各种皮的外形有时相似，但气味却完全不同。如香加皮和地骨皮，前者有特殊香气，味苦而有刺激感，后者气味均较微弱。,2.皮类生药构造可分为： (1)周皮 包括木栓层、木栓形成层与栓内层。 (2)皮层 可见纤维、石细胞和分泌组织（油细胞、乳管、粘液细胞等）及内含物，如淀粉粒和草酸钙结晶。 (3)韧皮部 包括韧皮部束和射线两部分。 3.粉末的显微观察 一般不应有木质部的组织，主要有木栓细
14、胞、纤维、分泌组织、石细胞及草酸钙结晶。,厚朴(皮),厚朴,（五）木类生药,木(Lignum)类中药，指木本植物茎形成层以内的木质部部分入药，通称木材。木材又分边材和心材，边材形成较晚，含水分较多，颜色稍浅，亦称液材；心材形成较早，位于木质部内方，蓄积了较多的物质，如树脂、树胶、丹宁、油类等，颜色较深，质地较致密。木类中药多采用心材部分，如沉香、降香、苏木等。 木类中药多呈不规则的块状、厚片状或长条状。表面黄白色如沉香，紫红色如降香，棕红色如苏木，许多木类生药表面应具有棕褐色树脂状条纹或斑块。质地和气味常可以帮助鉴别，如沉香质重，具香气；白木香质轻，香气较淡。,2.木类生药的组织构造 应分别制
15、作三个方向的切面：即横切面、径向纵切面、切向纵切面。观察下列组织特征： （1）导管 通常木类生药的导管大多为具缘纹孔及网纹导管。 （2）木纤维 占木材的大部分，纵切面观为狭长的厚壁细胞，长度为宽度的3050倍，细胞腔狭小，壁厚有斜裂隙状的单纹孔。横切面观多呈类三角形，具胞腔。 （3）木薄壁细胞 是贮藏养料的生活细胞，有时内含淀粉粒或草酸钙结晶。 （4）木射线,over,（六）叶类生药,叶类(Folium)生药多用完整长成的干燥叶，也有用复叶的小叶，如番泻叶；少数带有嫩枝,如侧柏叶等。 1.性状鉴定 (1)组成 单叶或复叶。 (2)形状 完整叶片的外形、叶缘、叶端、叶基与叶脉的特征，叶柄、托叶、
16、叶鞘的有无与特征等。 (3)大小,(4)表面特征 这是鉴定叶类生药的重要依据之一。注意观察上下表面的色泽、质地(草质，革质、纸质或肉质)、光滑或粗糙、有无毛茸、腺点或其它色点、对光观察有无透明点(油点)或灰色斑点(草酸钙结晶)等。 (5)气味 鉴定叶类生药的依据之一。 2.显微鉴定 通常在距叶柄13l2处，通过主脉，切制成横切片：观察表皮、叶肉与主脉三个部分的特征。,(l)表皮 通常上下表皮各具一列表皮细胞。在横切面上多为扁平长方形或方形。 禾本科植物的上表皮细胞有较大的“运动细胞(淡竹叶)； 有的表皮细胞内含葡萄状钟乳体(桑叶)、螺旋状钟乳体(穿心莲叶)、簇状橙皮苷结晶(薄荷叶）等。,有的表皮细胞向外突出而形成突起或毛茸。观察表皮的毛茸极为重要，注意观察毛茸的种类(腺毛或非腺毛)，组成非腺毛的细胞数，组成腺毛头部和柄部的细胞数、行列数、是否分叉，有无疣状突起，毛茸壁的厚度等。干燥叶类生药，毛茸脱落形成毛痕。 表皮上的气孔也是叶类生药的重要鉴定依据。气孔的型式与植物的科、属、种之间有一定
