QiaGen粪便DNA提取试剂盒中文说明书

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1、注意:1.准备好70水浴锅。2.所有的离心操作都在室温下(15-25),14000转/分钟3.用Buffer AL和InhibitEX Buffer溶解任何沉淀都要加热和混匀。4.Buffer AW1和Buffer AW2都加乙醇。5.使用之前混合所有缓冲液。1. 称取200ul样品在2ml的离心管中,离心管放在冰上。2. 每个样品添加1ml InhibitEX Buffer,然后持续旋涡混合1min或者直到样品混合均匀。3. 在70加热悬浮液5min(难以溶解的细胞溶解温度可以提高到95),然后旋涡混合15s。4. 离心样品1min析出沉淀。5. 另取1.5ml离心管加15ul Protei

2、nase K。6. 移取200ul步骤4的上清液至1.5ml含Proteinase K的离心管中。7. 然后添加200ul Buffer AL,旋涡混合15s。(注意:不要直接添加Proteinase K到Buffer AL中,样品和Buffer AL必须充分混合成均匀混合液)8. 70孵育10min。9. 添加200ul乙醇到溶解液中,旋涡混合。10. 小心移取600ul步骤9的裂解液到QIAamp 旋转柱中,盖上盖子,离心1min。把QIAamp 旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉含有滤液的管。11. 小心打开QIAamp 旋转柱,添加500ul Buffer AW1,离心1min。把QIAamp 旋转柱放到一个新的2ml收集管中,丢掉包含滤液的收集管。12. 小心打开QIAamp 旋转柱,添加500ul Buffer AW2,离心3min,丢掉包含滤液的收集管。13. 把QIAamp 旋转柱放到一个新的2ml的收集管中,丢掉旧的含有滤液的收集管,离心3min。14. 把QIAamp 旋转柱放到一个新的1.5ml的离心管,直接移取200ul Buffer ATE 到QIAamp薄膜上。室温孵育1min,然后离心1min洗提DNA。通过UV吸收度判断DNA纯度,使用Buffer ATE做空白设计避免结果错误。

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