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1、B 卷 1 2018 年第二年第二期期临床基因扩增临床基因扩增检验检验实验室规范化培训班实验室规范化培训班 理理 论论 考考 试试 卷卷 医疗机构医疗机构 姓名姓名 一 填空 每空 0 5 分 共 15 分 1 为加强医疗机构临床基因扩增实验室规范化管理 卫生部于 2010 年发布 北京市卫生局为做好实验室备案 工作 于 2012 年发布了 北京市医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审核暂行规定 2 申请设置临床PCR检测实验室应当进行备案 提供的材料包括 拟设置基因扩增检验实验室的医疗机构对临床基因扩增检验的需求情况 主要仪器设备一览表 检验报告样单 和其他相关材料 医疗机 构医学检验科应当设
2、有 专业诊疗科目 3 室内质量控制 IQC 监测和控制的是实验室测定的 而室间 质量评价则通过对不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的 4 1977年 Sanger等发明的 法和Gilbert等发明的 法 标志着第一代测序技术的诞生 5 核酸包括一些两种类型 和 二者的主要区 别为 前者由 四种碱基组成 而后者由 四种碱基组成 6 根据遗传中心法则 遗传信息的流动方向为 7 普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区 8 提纯的核酸样品可根据 波长的光吸收值算出其含量 通过计算 波长光吸收比值计算出其纯度 9 基因扩增实验室负责人应具有相关专业 专业技术职称任职资格 技术负责人 应具
3、有相关专业 学位 并有 5 年以上相关专业的工作经历 10 cfDNA 的中文名称是 ctDNA 的中文名称是 B 卷 2 二 是非题 在你认为正确的句子后面打 错误的后面打 每题 1 分 15 分 1 DNA 双链中 碱基 A T 之间以两个氢键相连 G C 以三个氢键相连 2 使用有防 污染 作用的尿苷糖基酶 UNG 的 PCR 试剂盒 该酶可以降解含有 UTP 的 扩增产物 3 DNA 变性是指在物理或化学因素的作用下 导致两条 DNA 链之间的氢键断裂 而核酸分 子中的所有共价键同时不受影响 4 自制室内质控品时 应对质控品的均匀性和稳定性进行评价 5 定量 PCR 与定性 PCR 测
4、定原理的最主要的区别点在于 前者测定点为扩增平台期 而后 者的测定点在 PCR 的指数扩增期 6 处理 PCR 标本时 在没有生物安全柜的情况下 可用超净台操作 7 临床检验中的系统误差通常表现为室内质控品测定结果的 SD 增大 8 生物安全 2 级实验室 BSL 2 的实验室结构和设施 安全操作规程 安全设备适用于 对人或环境具有中等潜在危害的微生物 9 DNA 复制和转录过程的新链合成方向都是 3 5 10 质量体系文件中应包括质量方针 质量目标和质量指标 11 无法参加室间质量评价计划时 应进行室间比对 不可以用室内质控替代 12 一般进行 HCV RNA 检测时宜采用 EDTA 抗凝血
5、 不宜采用肝素抗凝 13 以次氯酸为主要成分的清洁剂在配制后可以长期使用 14 核酸的解链温度 Tm 与 G C 含量有关 G C 含量愈大 Tm 愈高 15 扩增管没有盖好会造成 PCR 反应液热蒸发 直接影响结果 但不会成为一个污染源 三三 单选 单选题 题 请将所选请将所选答案答案填写在题后的括号中填写在题后的括号中 每题每题 1 分 共分 共 25 分 分 1 PCR 技术的发明人是 A Kary Mullis B Crick F H C C Watson J D D Rosalind Franklin 2 下面哪种是容易造成 PCR 实验室环境污染的因素 A 中央空调 B 实验室和缓
6、冲区无通风设施 C 人流和物流的走向 D 以上都是 3 在生物界尚无充足证据的信息流动过程的是 B 卷 3 A 蛋白质 RNA B RNA DNA C DNA DNA D DNA RNA 4 核酸提取纯化中 RNase 潜在污染源是 A 实验室环境 B 实验用品如吸头 离心管等 C 实验人员的手 D 以上都是 5 下列哪一项不是 PCR 实验室设计的基本原则 A 注意风向 B 各区联合 C 因地制宜 D 方便工作 6 有关于荧光定量PCR 方法 下述哪一条是错误的 A 在扩增的指数期定量 B 采用内标和外标方法均可 C 可采用 Taqman 探针 D 在扩增的终点测定定量 7 在选择时临床检验
7、项目时 应首先考虑 A 临床有效性和分析有效性 B 检测精密度和检测准确度 C 临床有效性和检测精密度 D 分析有效性和检测准确度 8 以下哪项有利于 DNA 的保存 A 溶于 pH 3 0 溶液 B 加入少量 RNase C 加入 EDTA 螯合钙离子 去除核酸酶的活性 D 加入少量 DNase 9 实验室的清洁工作应在以下情况下进行 A 每次实验后 B 文件规定清洁时间 C 实验室发生污染时 D 以上都是 10 荧光定量 PCR 检测过程中 基线漂移的可能原因有 A 蒸发 B 探针水解 C 相邻荧光通道干扰 D 以上都是 11 将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态 目的是 A 防
8、止该区灰尘的逸出 B 为了生物安全的目的 C 防止扩增产物从该区逸出 D 防止有生物传染危险的样本逸出 12 常用 RNase 抑制剂是 A 精胺 B 异丙醇 C DEPC D 乙醇 13 真核生物染色体 DNA 主要以下列哪种形式存在 A 环状单链分子 B 线性单链分子 B 卷 4 C 环状双链分子 D 线性双链分子 14 TaqMan 探针采用的是 A 同位素标记的探针 B SYBR Green 荧光染料 C 荧光标记的探针 D 生物素标记的探针 15 最大量程为 200ul 的微量移液器 显示读数为 020 实际的吸液容量值为 A 200 ul B 20 ul C 2ul D 0 2 u
9、l 16 有关核小体的错误叙述是 A 核小体是染色体的基本单位 B DNA 和组蛋白共同构成核小体 C DNA 和组蛋白 H1 构成核小体连接区 D RNA 和组蛋白共同构成核小体 17 基因突变的实质是 A 染色体上的 DNA 变成了 RNA B 染色体上的 DNA 序列变化了 C 染色体上的 DNA 高级结构发生了局部改变 D 染色体上的 DNA 变成了蛋白质 18 如果一个 PCR 反应体系中加入模板 200 个 经过 30 个循环后扩增产物的数量将达到 A 200 302 B 200 230 C 200 30 2 D 200 30 19 Sanger 测序体系与 PCR 反应体系的主要
10、区别是前者含有 A 引物 B DNA 聚合酶 C ddNTP D 模板 20 分子杂交试验不能用于 A 单链 DNA 分子之间的杂交 B 单链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交 C 抗原与抗体分子之间的结合 D 双链 DNA 与 RNA 分子之间的杂交 21 在 Sanger 基因测序技术中所使用的酶是 A DNA 连接酶 B DNA 拓扑酶 C DNA 聚合酶 D RNA 聚合酶 22 双链 DNA 中的碱基对有 A A U B G C C A C D G A 23 下列四个 DNA 片段中含有回文结构的是 A GAAAAG B GAATTC C GAAGAA D TGGAAA B 卷 5
11、 24 核酸分子中储存遗传信息的关键部分是 A mRNA B tRNA C rRNA D DNA 25 核酸检测探针的标志性特征是 A 一小段已知序列的单链核酸 B 一小段未知序列的单链核酸 C 一小段已知序列的双链核酸 D 有同位素或非同位素标记物 四 简答题 每题 5 分 共 25 分 1 遗传病产前基因诊断的取材一般有哪些 5 分 2 感染性疾病定性 PCR 的方法学性能验证包含哪些指标 简述每项指标的基本含义 5 分 B 卷 6 3 简述基于 Taqman 探针技术的荧光定量 PCR 基本原理 5 分 4 简述生物安全柜 超净工作台 通风橱三者的设计区别 以及在 PCR 过程中的使用区别 5 分 5 感染性疾病的定量 定性检测 人基因组的基因型检测 上述三类 PCR 检测的室内质控 品应如何设置 5 分 B 卷 7 五 论述题 每题 10 分 共 20 分 1 某一 HPV DNA 样品的 PCR 检测结果显示内标基因和目的基因均无扩增 阴性报告可否直 接发放 请分析可能的原因 应该如何解决 10 分 2 某一开展 HCV RNA 定量检测的临床 PCR 实验室 连续三天发现阴性质控品的结果出现阳 性扩增曲线 请分析并查找该情况产生的可能原因 针对原因应如何处理 10 分
