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1、假单胞菌属 2013级二组 介绍 假单胞菌属 Pseudomonas 是一大类革兰阴性杆菌 有荚膜和鞭毛 无芽胞 需氧 广泛分布于土壤 水和空气中 种类繁多 目前已超过200种 与人类关系较大的有铜绿假单胞菌 荧光假单胞菌和类鼻疽单胞菌等 铜绿假单胞菌 P aeruginosa 俗称绿脓杆菌 广泛分布于自然界及正常人皮肤 肠道和呼吸道 是临床上较常见的条件致病菌之一 由于在生长过程中产生绿色水溶性色素 感染后的脓汁或敷料上出现绿色 故得名 形态特征 1假单胞菌科 专性需氧的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌 呈杆状或略弯 具有鞭毛运动2大小为1 5 3 0 0 5 0 8um G 杆菌 菌体一端一般有一
2、根鞭毛 运动活泼 无芽胞 米液型菌株有多糖荚膜或糖萼 具有抗吞噬作用 绿脓杆菌鞭毛染色 培养特征 在普通培养基上生长良好 专性需氧 菌落形态不一 多数直径2 3mm 边缘不剂齐 扁平湿润 在血琼脂平板上形成透明溶血环 液体培养呈混浊生长 并有菌膜形成 绿脓杆菌能产生两种水溶性色素 一种是绿脓素 为蓝绿色的吩嗪类分合物 无荧光性 具有抗菌作用 另一种为荧光素 呈绿色 绿脓素只有绿脓杆菌产生 故有诊断意义 但广泛使用有效抗生素后筛选出的变异株常丧失其合成能力 铜绿假单胞菌在血平板上的菌落 铜绿假单胞菌菌落的色素 培养特征 分解蛋白质能力甚强 而发酵糖类能力较低 分解葡萄糖 产酸不产气 不分解甘露醇
3、 乳糖及蔗糖 能液化明胶 分解尿素 不形成吲哚 氧化酶试验阳性 可利用枸椽酸盐 绿脓杆菌有菌体O抗原和鞭毛H抗原 O抗原含有内毒素和原内毒素蛋白质两种成份 原内毒素蛋白质是一种高分子 低毒性 免疫原性强的保护性抗原 不仅存在于不同血清型绿脓杆菌中 而且广泛存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌 大肠杆菌 霍乱弧菌等G 细菌中 是一种良好的交叉保护抗原 绿脓杆菌表面颗粒 负染 170 000 致病性与免疫性 绿脓杆菌能产生多种与毒力有关的物质 如内毒素 外毒素A 弹性蛋白酶 胶原酶 胰肽酶等 其中以外毒素A最为重要 绿脓杆菌外毒素A为一种热不稳定的单链多肽 分子量约66 000 经甲醛或戊二醛处
4、理可脱毒为类毒素 并被特异性抗毒素中和 毒性强 注入动物后 主要靶器官肝脏可出现细胞肿胀 脂肪变性及坏死 其他脏器病变有肺出血和肾脏坏死 外毒素A机理与白喉毒素有些类似 即最终使核糖体上延长因子2 EF 2 失活 抑制宿主细胞的蛋白质合成 但具体过程不同 此外 外毒素A和白喉毒素在蛋白质结构 免疫原性 鞭细胞和敏感动物等方面均有差异 绿脓杆菌感染可发生在人体任何部位和组织 常见于烧伤或创伤部位 中耳 角膜 尿道和呼吸道 也可引起心内膜炎 胃肠炎 脓胸甚至败血症 患者感染后可产生特异性抗体 有一定的抗感染作用 应用抗绿脓杆菌免疫力血清可降低病人继发败血症的发生率和病死率 生活习性 菌为专性需氧菌
5、 生长温度范围25 42 最适生长温度为25 30 特别是该菌在4 不生长而在42 可以生长的特点可用以鉴别 在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素 如绿脓素 pyocynin 与带荧光的水溶性荧光素 pyoverdin 等 在血平板上会有透明溶血环该菌在4 不生长而在42 可以生长 该菌在4 不生长而在42 可以生长 本菌为条件致病菌 是医院内感染的主要病原菌之一 适合治疗疾病 目的观察临床分离的24株铜绿假单胞菌 PA 对致病性真菌 如白色念珠菌 热带念珠菌 光滑念珠菌 近平滑念珠菌 克柔念珠菌 葡萄牙念珠菌等 的抑制作用 方法收集临床上24株PA 通过革兰染色 氧化酶试验及API20NE 法国梅里埃公司产品 进行鉴定 通过纸片法 十字交叉划线法及共培养检测PA对致病性真菌的抑制作用 十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS PAGE 对有抑制作用的PA和无抑制作用的PA分泌蛋白进行电泳 结果24株PA中部分菌株对常见的致病性真菌有显著抑制作用 而部分PA菌株有一定抑制作用 另外一些完全没有抑制作用 共孵育试验显示PA可能是通过抑制真菌的菌丝生长而产生抑制作用 SDS PAGE显示有抑制作用的PA和无抑制作用的PA分泌物蛋白间存在明显差异 结论PA对常见的致病真菌具有抑制作用 推测可能与抑制真菌的菌丝生长及分泌抑制真菌生长的各种蛋白类物质有关
