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1、 溶血性链球菌检验 分布 溶血性链球菌在自然界中分布较广 存在于水 空气 尘埃 粪便及健康人和动物的口腔 鼻腔 咽喉中 可通过直接接触 空气飞沫传播或通过皮肤 粘膜伤口感染 被污染的食品如奶 肉 蛋及其制品也会对人类进行感染 上呼吸道感染患者 人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源 引起化脓性感染 中毒性感染 超敏反应性疾病 生物学性状 1 形态结构2 培养特性3 分类4 生化反应5 抵抗力 形态与染色 球形或卵圆形 直径0 5 1 m 链状排列 链长短不一 短者4 8个细胞组成 长者20 30个无芽胞 无鞭毛 培养早期 2 4h 形成透明质酸的荚膜 培养特性 需氧或兼性厌氧营养要求较高 需
2、补充血液 血清 葡萄糖等在血清肉汤中易形成长链 管底呈絮状沉淀在血琼脂平板上 不同菌株溶血不一最适生长温度为37 最适pH为7 4 7 6 培养特性 血平板 血平板上菌落为灰白色 半透明或不透明 表面光滑 有乳光 直径约0 5 0 75mm 为圆形突起的细小菌落 乙型溶血链球菌周围有2 4mm界限分明 无色透明的溶血圈 生化反应 分解葡萄糖 产酸不产气 对乳糖 甘露醇 水杨苷 山梨醇 棉子糖 蕈糖 七叶苷的分解能力因不同菌株而异一般不分解菊糖 不被胆汁溶解触酶阴性 与葡萄球菌相区别 毒素及侵袭性酶 链球菌溶血素致热外毒素 曾称红疹毒素或猩红热毒素透明质酸酶 又称扩散因子 溶解细胞间质链激酶 又
3、称链球菌纤维蛋白溶酶 能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶 具有增强细菌在组织中的扩散作用 该酶耐热 100 50分钟仍可保持活性 链道酶 又称链球菌DNA酶杀白细胞素 能使白细胞失去动力 抵抗力 该菌抵抗力一般不强 60 30min即被杀死对常用消毒剂敏感在干燥尘埃中生存数月乙型链球菌很少有耐药性 微生物学检查 溶血性链球菌检测流程 GB T4789 11 25g ml 样品 225ml无菌生理盐水 葡萄糖肉浸液肉汤或匹克氏肉汤 血平板 血平板 分纯培养 杆菌肽敏感试验 链激酶试验 观察溶血 革兰氏染色 报告 36 1 24h 36 1 24h 36 1 24h 鉴定步骤 溶血及菌落形态的观
4、察革兰氏染色链激酶试验杆菌肽敏感试验 链激酶试验 原理 致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶 即溶纤维蛋白酶 此酶能激活正常人体血液中的血浆蛋白酶原 使成血浆蛋白酶 而后溶解纤维蛋白 链激酶试验 方法 吸取草酸钾血浆0 2mL 加0 8mL灭菌生理盐水 混匀 加入链球菌18 24h36 肉浸液肉汤培养物0 5mL及0 25 氯化钙0 25mL 混匀 置于36 水浴10min 血浆混合物自行凝固 观察凝块重新完全溶解的时间 完全溶解为阳性 如24h后不溶解即为阴性 同时用肉浸液肉汤做阴性对照 用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照 杆菌肽敏感试验 取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上 用灭菌镊子夹取每片含有0 04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上 36 培养18 24h 如有抑菌圈出现即为阳性 用已知的阳性菌株做对照 结果报告 在25g ml 样品中检出或未检出溶血性链球菌 谢谢
