菊花的组织培养PPT幻灯片课件

《菊花的组织培养PPT幻灯片课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《菊花的组织培养PPT幻灯片课件（44页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、课题1菊花的组织培养 组织培养是指在人工培养基上 离体培养植物的器官 组织 细胞和原生质体 并使其生长 增殖 分化以及再生植株的技术 1 一 基础知识 1 植物的组织培养 1 细胞的分化 概念 在个体发育中 相同细胞的后代在形态 结构 生理功能上发生稳定性差异的过程 过程 如 受精卵增殖 生长 分化形成组织 器官 系统 点此播放教学视频 2 特点 B 稳定性 C 全能性 A 持久性 是一种持久性的变化 它发生在生物体的整个生命过程中 在胚胎期达到最大限度 细胞分化是稳定的 一般是不可逆转的 已分化的细胞 仍具有发育的潜能 点此播放教学视频 3 原因 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结

2、果 结果 形成不同的细胞和组织 2 细胞的全能性 定义 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 原理 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质 都有发育成为完整个体所必需的全部基因 点此播放教学视频 4 高度特化的动物细胞 从整个细胞来说 全能性受到限制 但它的细胞核仍然保持着全能性 这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质 已分化的植物细胞 仍具有全能性 实例 受精卵 生殖细胞 体细胞 全能性的比较 点此播放教学视频 5 点此播放教学视频 6 3 植物组织培养 细胞离体 必要条件 一定的营养物质 激素和其他外界条件 原理 细胞的全能性 A 外植体 从活植物体上

3、切下进行培养的那部分细胞 组织或器官 相关概念 点此播放教学视频 7 B 脱分化 由高度分化的植物器官 组织或细胞产生愈伤组织的过程 又称去分化 C 再分化 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程 D 愈伤组织 细胞排列疏松而无规则 是高度液泡化的 成无定形状态的薄壁细胞 点此播放教学视频 8 人参的愈伤组织 9 菠萝的愈伤组织 10 点此播放教学视频 11 点此播放教学视频 12 2 影响植物组织培养的因素 1 植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄 保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎

4、上部新萌生的侧枝 点此播放教学视频 13 点此播放教学视频 14 2 离体的植物组织和细胞对营养 环境等条件的要求相对特殊 需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括 A 大量元素 N P S K Ca Mg等 B 微量元素 B Mn Cu Zn Fe Mo I Co等 C 有机物 植物激素 点此播放教学视频 15 MS固体培养基成分及比例 16 讨论 你能说出各种营养物质的作用吗 同专题2中微生物培养基的配方相比 MS培养基的配方有哪些明显的不同 答 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐 蔗糖提供碳源 同时能够维持培养基的渗透压 甘氨酸 维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正

5、常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求 微生物培养基以有机营养为主 与微生物的培养不同 MS培养基则需提供大量无机营养 无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类 点此播放教学视频 17 常用的植物激素 生长素 细胞分裂素和赤霉素 生长素类 2 4 二氯苯氧乙酸 2 4 D 吲哚乙酸 IAA 萘乙酸 NAA 吲哚丁酸 IBA 细胞分裂素类 激动素 KT 6 苄基嘌呤 6 BA 玉米素 ZT 赤霉素类 赤霉酸 GA3 3 植物激素的影响 点此播放教学视频 18 生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下 细胞

6、分裂素的作用呈现加强的趋势 19 有利于根的分化 有利于芽的分化 抑制根的分化 促进愈伤组织生长 生长素和细胞分裂素同时使用 用量的比例对植物细胞发育方向的影响 4 pH 温度 光照 pH控制在5 8左右 温度控制在18 22 C 每日用日光灯照射12h 点此播放教学视频 20 3 植物组织培养过程 离体组织或细胞 植物体 细胞分裂素 生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 植物细胞培养 不需要光 需要光 点此播放教学视频 21 植物组织培养的过程 离体的植物组织或细胞 愈伤组织 根和芽 完整的植物体 脱分化 再分化 点此播放教学视频 22 1 培育无病毒植株 2 培

7、养紫草愈伤组织 提取紫草素 治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料 4 基因工程中亦需用到植物组织培养的方法 4 植物组织培养的应用 3 诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构 包裹上人造种皮 制成人工种子 可以解决有些作物品种繁殖能力差 结子困难或发芽率低等问题 点此播放教学视频 23 人工种子 点此播放教学视频 24 同常规的无性繁殖方法相比 组织培养快速繁殖法主要具有以下优点 1 快速 采用常规的方法如分株法 一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株 但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株 2 周年生产 花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行 因条件可控 所以不

8、受季节限制 可以全年进行连续生产 而常规的无性繁殖则受季节限制 只能在花卉生长季节进行繁殖 3 经济效益高 花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小 在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株 如按每株1元计算 每年产值上百万元 4 以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因 所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续 组织培养与常规繁殖相比优点众多 点此播放教学视频 25 二 实验操作 一 制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分 实验室一般使用4 C保存配制好的培养基母液来制备 1 配置各种母液 点此播放教学视频 26 无机物中大量元素浓缩10倍 微量元素浓缩100倍 常温保

9、存 激素类 维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg ml的质量浓度单独配制成母液 用母液配制培养基时 需要根据各种母液的浓缩倍数 计算用量 点此播放教学视频 27 2 配置培养基 分装到锥形瓶中 每瓶分装50ml或100ml 配制培养液 调PH 培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易 因此不必添加植物激素 点此播放教学视频 28 3 灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1 选材 菊花茎段 取生长旺盛的嫩枝 二 外植体消毒 2 消毒 流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉 用软刷轻轻刷洗 刷洗后在流水下冲洗20min左右 点此播放教学视频 29 酒精处理 用无菌

10、吸水纸吸干外植体表面的水分 放入体积分数为70 的酒精中摇动2 3次 持续6 7s 立即将外植体取出 在无菌水中清洗 消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入质量分数为0 1 的氯化汞溶液中1 2min 取出后在无菌水中至少清洗3次 漂净消毒液 点此播放教学视频 30 三 接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子 接种室消毒是至关重要的 用70 的酒精喷雾使空气消毒 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1 接种室消毒 2 无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成 每次使用器械后 都需要用火焰灼烧灭菌 接种后立即盖好瓶盖 3 材料的切取和接种 点此播放教学视频 31 点

11、此播放教学视频 32 4 接种注意事项 每接种一块外植体前 镊子需放入体积分数为75 的酒精溶液中消毒一次 然后在酒精灯火焰上烧一遍 冷却后再接种 外植体在培养基中要分布均匀 放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定 一般胡萝卜3 4块 菊的茎或叶6 8块 也不要太少 以充分利用培养基中的营养成分和光照条件 插入时应注意方向 不要倒插 茎段 茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分 点此播放教学视频 33 思考 你打算做几组重复 你打算设置对照实验吗 答 每种材料或配方至少要做一组以上的重复 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶 与接种操作后的锥形瓶一同培养 用以说明培养基制作合格 没有

12、被杂菌污染 点此播放教学视频 34 四 培养 1 愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间 2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织 首次培养愈伤组织时 恒温箱的门应该关闭不必见光 因为在无光条件下愈伤组织长的更快 2周后 培养基成分接近耗尽 必须更换培养基 进行继代培养 点此播放教学视频 35 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同 在严格的无菌条件下 将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上 愈伤组织的继代培养一代为20d 如果延长时间 培养基中营养物质减少 外植体会分泌有毒物质 造成自身中毒 如果愈伤组织长到直径为1 1 5cm时 就可以进行试管

13、苗培养 否则还需进行第二代继代培养 2 愈伤组织的继代培养 在愈伤组织继代培养期间 将恒温箱的门打开 让愈伤组织见光 愈伤组织见光后颜色可以转为绿色 点此播放教学视频 36 3 试管苗的培养 当愈伤组织长到一定大小后 可以更换培养基 进行试管苗的见光培养 五 移栽 移栽生根的菊花试管苗之前 应先打开培养瓶的封口膜 让试管苗在培养间生长几日 1 打开封口膜 2 清洗转移 用流水清洗根部的培养基 将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 点此播放教学视频 37 六 栽培 3 移栽 珍珠岩 固体基质型 含水量高 蓄水性强 透性好 适合栽培 幼苗长壮后 移栽到土壤中 幼苗移栽后 每天观察并

14、记录幼苗的生长情况 适时浇水 施肥 直至开花 点此播放教学视频 38 点此播放教学视频 39 三 课题延伸 1 一般来说 容易进行无性繁殖的植物 也容易进行组织培养 2 实例 芦荟 豆瓣绿 秋海棠 月季 点此播放教学视频 40 本课题内容小结 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养 影响组织培养的因素 细胞分化细胞全能性组织培养过程 营养激素环境条件 MS固体培养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培 点此播放教学视频 41 作业 P361 在植物组织培养过程中 为什么要进行一系列的消毒 灭菌 并且要求无菌操作 2 在选取菊花茎段是 为什么要选取生长旺盛的嫩枝 外植体的生理状态是成功进行

15、组织培养的重要条件之一 生长旺盛的嫩枝生理状况好 容易诱导脱分化和再分化 植物组织培养所利用的植物材料体积小 抗性差 对培养条件的要求较高 用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长 如一些细菌 真菌等的生长 而培养物一旦受到微生物的污染 就会导致实验前功尽弃 因此要进行严格的无菌操作 点此播放教学视频 42 21 下图是植物组织培养的简略表示 据此回答 练习1 下图是植物组织培养的简略表示 据此回答 1 表示 它能被培养成为 的根本原因是 2 表示 它与 相比分化程度 全能性 3 若想制成人工种子 应选用 4 若 是花药 则 是 继续对其使用 处理可获得 正常植株 该过程称为 5 若

16、 是胡萝卜根尖细胞 则培养成 的叶片的颜色为 这说明 6 若利用此项技术制造治疗烫伤 割伤的药物 紫草素 培养将进行到 答案 1 离体的植物组织或器官植物细胞具有全能性 2 愈伤组织低高 3 4 单倍体植株秋水仙素纯合体单倍体育种 5 绿色含有表达叶绿体的基因 6 43 练习2 基因型为AaBb的水稻 含24条染色体 的花药通过无菌操作接入试管后 在一定条件下形成试管苗 问 1 愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团 愈伤组织形成过程中 必须从培养基中获得 等营养物质 2 要促进花粉细胞分裂生长 培养基中应有 和 两类激素 3 愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根 再由芽发育成叶和茎 这一过程必须给予光照 其原因是 能利用光能制造有机物 供试管苗生长发育 4 试管苗的细胞核中含 条脱氧核糖核苷酸链 5 培育成的试管苗可能出现的基因型有 答案 1 水 无机盐 维生素和小分子有机物 2 细胞分裂素植物生长素 3 叶绿体 4 24 5 AB aB Ab ab 44