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1、ICS65.020.01B 05DB15内蒙古自治区地方标准DB 15/ TXXXX2020向日葵黄萎病田间抗性鉴定技术规程Technical Regulation for Resistant Identification to Sunflower Verticillium Wilt in Field点击此处添加与国际标准一致性程度的标识XXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/ XXXXXXXXX前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古农业大学提出。本标准由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SC/TC
2、 20）归口。本标准起草单位：内蒙古农业大学。本标准主要起草人：周洪友、王东、张键、赵君、孟焕文、张笑宇。6向日葵黄萎病田间抗性鉴定技术规程1 范围本标准规定了向日葵黄萎病抗性鉴定的病原菌的选择与培养、病圃建立、对照品种选择、鉴定程序等技术规范。本标准适用于内蒙古自治区向日葵产区。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 2952-2016 棉花黄萎病抗性鉴定技术规程。3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1食用型向日葵 confection
3、sunflower菊科1年生草本，植株高大，2.0 m3.0 m，生育期长，120 d140 d，花盘、叶片、子粒大，皮壳率高，一般40 %以上。以作为休闲食品为主，籽仁也可作为食品加工的原料。3.2油用型向日葵 oil sunflower菊科1年生草本，植株较矮小，1 m2 m，生育期80 d120 d，子粒小，子实饱满，子仁率高达70 %80 %，含油率38 %58 %。籽粒适于榨油。3.3向日葵黄萎病 sunflower yellow wilt由大丽轮枝孢菌引起的一种土传病害。田间的症状多从植株下层叶片显症，叶尖叶肉部分呈现褪绿、黄化的症状。随后，病部边缘向叶内的脉间组织发展导致整个叶片
4、的叶肉组织褪绿，变褐，干枯。发病重的植株下部叶片全部枯死，中位叶片呈斑驳状。剖开病茎观察，可见茎部的维管束变褐。3.4植物的抗病性 plant resistance植物与病原物在长期进化和相互作用的复杂过程中，逐渐形成和表现出各种抵御病原物的特征和能力，称之为抗病性。4 鉴定病圃所需条件向日葵人工黄萎病圃应建立在有利于黄萎病发生的地区，正常年份感病对照的病情指数能达到 35.0 以上；病圃地势平坦，土壤以沙壤土为宜，周围应具有隔离设施。5 前期准备5.1 病原菌的选择与培养5.1.1 病原菌的选择根据所鉴定品种推广应用区域选择能代表该区域病原菌致病力水平的优势菌系。5.1.2 病原菌的培养在超
5、净台上，将分离纯化的向日葵黄萎病菌，从 PDA 平板上的菌落边缘挑取 2 mm 的新鲜菌块，接种到查比克液体培养基（NaNO3 2.0 g；K2 HPO4 1.0 g；KCl 0.5 g；MgSO4 7H2O 0.50 g；FeSO4 0.01 g；蔗糖 30.0 g；用水定容至 1000 mL）中，置于 25 下，150 r/min，黑暗培养 6 d备用。制作麦麸培养基，加入适量的水，装入三角瓶，0.1 MPa，高压湿热灭菌 30 min，冷却到室温备用；吸取上述液体培养的向日葵黄萎病菌菌液15 mL 转接至装有麦麸沙粒培养基的三角瓶中，随后放入到 25 培养箱中静置培养 7 d，待黄萎病菌
6、的菌丝布满后，将培养物掏出，自然条件下风干备用。5.2 病圃的建立建立一定规格的水泥池，水泥池高出地面 20 cm，内深 60 cm，无底。装入多年（10 年以上）未种植向日葵的生沙壤土。按每平方米 45 g 的接种量，将培养好的菌种均匀地撒入病圃，再翻耕2 3 遍，使病菌与土壤混合均匀。5.3 对照品种的选择鉴定中选用一个感病对照和一个抗病对照。感病对照要求高度感病，选择标准为正常年份病情指数能达到 35.0 左右，且感病性稳定；抗病对照选用已推广应用的抗黄萎病品种，且抗病性稳定。6 鉴定程序6.1 材料的处理鉴定的向日葵品种或材料应为未包衣的种子，发芽率应符合标准要求。6.2 材料的种植鉴
7、定材料种植在人工病圃中，3 次重复，每小区2垄4行、行长不少于 5 m、株数不少于 50 株，按向日葵正常的播种时间播种。6.3 鉴定圃田间管理播种后，进行精心管理，确保全苗，保持田间的适宜湿度，以利于黄萎病的发生，各项田间管理均匀一致。6.4 病情的调查记载向日葵播种出苗后，实时监测感病对照的发病情况，当感病对照病情指数高于 35.0 时，进行第一次全面调查，每10 d左右调查一次，整个生育期调查次数不少于3 次。感病对照病情指数低于35.0时，鉴定无效。在病情调查记载中采用 5 级法表述病情。根据植株黄萎病发生严重程度分成 0、1、2、3、4共五个病级：0级 植株健康，无病叶，生长正常。1
8、级 植株三分之一以下叶片表现病状。2级 植株三分之一以上，三分之二以下叶片表现病状。3级 植株三分之二以上叶片表现病状，4级 植株枯死。7 结果的计算7.1 病株率（Ri）见公式（1）：式中：ni 发病株数；nt 总株数。7.2 病情指数（DI）见公式（2）：式中：dc 相应病级；nc 各病级病株数；nt 总株数。7.3 相对病情指数每次试验以及每次调查记载时感病对照的病情指数都不是确定的，因此，病情指数只能反映当次鉴定的情况。为实现鉴定试验结果重复间稳定和具有可比性，可将感病对照病情指数进行标准化，以标准病情指数（50.0）对试验品种病情指数进行校正，校正结果即为相对病情指数。感病对照病情指
9、数在 35.165.0 之间可采用相对病情指数，超出范围不宜采用相对病情指数。校正系数 （K ）：式中：50.0 感病对照标准病情指数；DICK本次鉴定感病对照病情指数。相对病情指数（RDI）：式中：DI 被鉴定品种病情指数；K 校正系数。8 黄萎病抗性评价8.1 相对病情指数均值向日葵黄萎病为全生育期病害，应采用多次结果的平均值，将整个生育期每次（不少于3次）调查结果的相对病情指数算术平均值，作为供试品种的最终相对病指。相对病情指数均值（ARDI）：式中：RDIi 第 i 次相对病情指数；n 整个生育期计算相对病情指数的次数。8.2 抗性鉴定结论根据被鉴定品种的相对病情指数均值（ARDL）的大小评定品种的抗性级别，抗性级别的划分标准见附表1。_附 录附表1 向日葵品种抗性级别的划分标准级别抗性类别英文缩写相对病情指数均值1免疫IARDI=02高抗HR0ARDI 10.03抗病R10.1 ARDI 20.04耐病T20.1 ARDI35.05感病SARDI35.0
