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1、 病理科细胞学教学课件 细胞病理学与临床应用 概述一 细胞病理学概念细胞病理学又称诊断细胞学 是利用机体某些器官组织离体的细胞进行涂片检查 通过观察细胞的结构和形态来研究和诊断疾病的一门科学 是病理学分支学科之一 根据细胞标本来源不同分为脱落细胞学和细针穿刺吸取细胞学 二 细胞学检查的应用范围 细胞学标本的类型1 自然脱落细胞 脱落细胞 用于体腔积液 痰 尿 宫颈 阴道 乳头溢液 前列腺等排出物的检查 2 细针穿刺吸取细胞 普通细针穿刺主要用于体表肿块的诊断 如 甲状腺 皮肤肿物 肿大的淋巴结等 活检切割针在B超 CT引导下穿刺深部内脏器官 用于肿瘤的诊断 获取的组织主要用于切片 液体用于涂片
2、 三 细胞学检查的优点和不足 一 脱落细胞检查的优点 1 设备简便 操作简单 报告快 费用低廉 适用于大规模防癌普查 2 脱落细胞可来源于多个位点 能代表更大范围的病变 有时比组织病理学更利于早期肿瘤的诊断 3 病人痛苦少 易接受 可多次重复检查 4 对某些无法做活检的病例 细胞学诊断更显优势 5 恶性肿瘤诊断阳性率较高 二 脱落细胞检查的不足及局限性 有一定的误诊率 主要是假阴性率较高 即癌肿病人未能找到癌细胞 痰涂片的假阴性率可达 胃癌可高达 左右 假阳性率则较低 约 左右 不能对肿瘤进行定位 无法了解肿瘤的浸润情况 分型困难 影响阳性率的因素 影响细胞学诊断的因素很多 包括标本采集 涂片
3、的制作以及医生的诊断水平 其中最常见的原因就是涂片固定不及时 造成细胞退变而影响诊断 尤其是妇科涂片 气管刷片以及临床医生所制的针吸涂片等 如果当时不固定送到病理科 细胞多数都会发生退变 给诊断带来影响 四 细胞学检查基本技术 一 细胞标本采集方法 肿瘤表面直接压片 印片 或刮片法 宫颈 阴道 口腔 肛管 皮肤等 自然分泌液涂片 痰液 前列腺液 乳头溢液等 穿刺抽吸物涂片 粗针穿刺或细针穿刺 体腔积液涂片 穿刺抽液至少50ml以上 最好是200ml 病变细胞采集器 一次性使用 病变细胞采集器是对脱落于体液或其他液体中的肿瘤及病变细胞进行浓缩制样的一种器具 优点 简单 方便 快捷 无需电源 离心
4、机等设备 可大量采集液体中的肿瘤或病变细胞 利于提高阳性率 降低漏诊率 二 涂片制作 很重要 涂片要求和涂片制备方法 1 涂片要求 1 标本要新鲜 2 操作要轻柔 涂片均匀 厚薄适度 避免重叠 防止挤压 3 玻片要清洁 4 涂片要粘附牢固 5 至少涂两张以上 2 涂片常用制备方法 1 推片法 2 涂抹法 3 压拉涂片法 4 吸管涂抹法 5 喷射法 6 印片法 细胞涂片方法 涂抹法 用棉签或针头将标本单向 均匀地涂抹于载玻片上 拉片法 将一滴检材置于一张载玻片上 再用另一张载玻片叠加其上并予轻压 再将该两张载玻片朝反向拉动 从而获得两张涂片 推片法 将一滴检材置于载玻片的右端 再用另一张窄边光滑
5、的载玻片作为推片 并以与滴液载玻片成400夹角 自右向左均匀推动检液 形成涂片 液基细胞学制片 超薄宫颈涂片 液基细胞学制片技术是一种薄层细胞制片新技术 与传统制片方法对比具有操作简便 可读细胞丰富 细胞薄而均匀 背景清晰 细胞形态清楚 便于观察 易于检出阳性细胞 标本可长期保存等特点 如果加用计算机扫描辅助细胞学检测系统 自动筛查 捕捉异常细胞 效果会更好 超薄宫颈涂片 传统涂片 三 涂片的固定 很重要 固定目的 防止细胞自溶 细菌繁殖 保证染色结构清晰 固定愈及时染色效果愈好 1 固定液 95 酒精 乙醇 2 固定方法 浸入法 滴加法 1 带湿固定涂片后立即 几秒钟内 固定 适于粘稠标本
6、2 干燥固定自然干燥后固定 适于稀薄标本 3 固定时间 15 30min 分钟 四 涂片常用染色方法 1 巴氏染色法 细胞核深蓝色 腺癌胞浆呈灰蓝色 鳞癌细胞浆呈粉红色或橘黄色 炎细胞胞浆为蓝色 2 苏木精 伊红染色 HE染色 细胞核蓝色 胞质淡红色 3 瑞士 吉姆萨染色 细胞核紫红色 胞质淡蓝色 主要用于血液涂片 第二节显微镜检查 细胞学诊断报告方式 一 直接法 二 分级法改良巴氏五级分类法 三 描述性诊断报告方式 TBS 一 阅片前了解病史注意结合临床表现 二 阅片时认真 仔细 全面 防止遗漏 有效标记阳性细胞 细胞学的诊断方法与应用 1 有无炎症或特异性炎症 2 有无核异质细胞 轻 中
7、重 3 有无恶性细胞4 提出建议或提供参考意见 复查 随访 取活检 直接法细胞学诊断内容应包括 改良巴氏五级分类法 多用于宫颈 阴道涂片 级 涂片内未见异常细胞 基本正常 级 涂片内见异常细胞 但均为良性 a轻度核异质细胞 b中 重度核异质细胞 属癌前病变 级 可疑癌 须随访观察或复查 级 有癌细胞 但不典型 尚须证实 级 有癌细胞 形态典型 细胞形态变化 一 正常上皮细胞形态 一 鳞状上皮 内底层 基底层细胞 12 15um为立方 低柱状细胞 脱落后呈圆形卵圆形 核浆比1 0 5 1 宫颈内基底细胞和炎细胞 外底层 深棘层细胞 2 3层细胞构成 细胞稍大 15 30um 圆形卵圆形 有棘状突
8、起 核圆 居中 一般不见核仁 核浆比1 1 2 宫颈外 内基底细胞 宫颈外基底细胞和炎细胞 宫颈外基底细胞与炎细胞 中层 上皮中部的棘细胞 有棘状突起 体积较大 30 40um 卵圆 菱形 胞浆丰富 核居中 核浆比1 2 3 表层 中层 外基底层 宫内膜腺细胞 各层上皮细胞 角化前细胞 角质层 梭形 多边形 40 50um 胞浆丰富 核小 居中 圆形 核浆比1 3 5 宫颈角化 部分角化细胞 不全角化细胞 最浅层细胞 胞浆内角化蛋白 形态 大小同角化前细胞 但胞浆鲜红 核固缩 居中 核浆比1 5以上 渐成为无核的完全角化细胞 二 柱状上皮 纤毛柱状上皮 圆锥形 顶宽有纤毛 核位于中下部 可见1
9、 2个小核仁 黏液柱状上皮 卵圆形 圆柱状 胞浆淡而透明 核位于中下部 如细胞内含大量黏液时 核被压至底部呈半月形 呈杯状细胞 纤毛柱状上皮 宫颈涂片黏液柱状上皮 核异质细胞指细胞异型性超过炎症变性程度 但尚不足以诊断为癌细胞的异型细胞 表现为 核大小不等 形态异常 核染色质增多 分布不均 核膜增厚 边界不整 但核浆比例增大不明显或轻度增大 根据异型性大小 将核异质细胞分为轻度 中度和重度 核异质细胞 又称非典型增生细胞 核异质细胞的意义 核异质细胞是介于良性和恶性之间的细胞 常见于慢性炎症 易与恶性肿瘤细胞混淆 核异质细胞提供的信息包括 炎症变性上皮细胞 癌变前期细胞 形态不够典型的癌细胞
10、不足以诊断为癌 根据细胞异型性大小分为 轻度核异质细胞 多见于炎症 中度核异质细胞 多见于炎症 重度核异质细胞多见于癌前病变或原位癌 中度核异质细胞 宫颈鳞状上皮内基底细胞 鳞状上皮重度核异质细胞 宫颈鳞状上皮内基底细胞 二 宫颈 阴道细胞学描述性诊断报告方式 TBS 由于核异质细胞的概念比较模糊 包括了炎症性核异质细胞 亦可以是癌前病变或癌 与临床难沟通 使临床无法采取适当的相应处理措施 常导致临床过度治疗 因此目前提倡使用TBS描述性诊断报告方式 TBS报告方式的意义 宫颈 阴道细胞学描述性诊断报告方式 TBS 自推出临床应用已有10多年 已得到基本肯定 其优点是 内容直观 易懂和具体 能
11、为临床提供更多的信息 临床医生易理解 更能准确 及时地决定对所检病人的进一步处理 TBS报告方式的内容 向临床提供的信息 1 标本类型 巴氏涂片或液基 2 标本质量评估 3 描述性诊断内容 感染 滴虫 霉菌 上皮增生情况 非典型增生的程度 轻 中 重 4 恶性肿瘤 鳞癌 腺癌 其它 浆膜腔积液脱落细胞检查 抽取的体腔积液必须在1小时内完成检查 以防细胞退变 注意不要将退变的间皮细胞误诊为恶性细胞 而提高胸水脱落细胞检查的阳性率 需要注意以下几方面 第一 对大量胸水者留取最后一管胸液标本送检胸液量不少于200ml 应及时送检 胸液易凝者加入肝素抗凝 第二 反复数次抽取胸液送检可提高阳性率 第三
12、送检人员提高对癌细胞的辨认水平是关键 胸水中恶性肿瘤细胞常有核增大且大小不一 核畸形 核深染 核浆比例失常及异常有丝分裂等特点 应注意鉴别 一 良性病变脱落细胞1 脱落的正常间皮细胞间皮细胞被覆于胸膜 心包膜 腹膜面 属于单层扁平上皮 脱落的间皮细胞呈圆形或椭圆形 核居中央或略偏位 多为单核 少数为双核或多核 分散排列 无聚集现象 可见正常核分裂象 正常间皮细胞 2 退化变性 退变 的间皮细胞 细胞退变有 1 肿胀性退变2 固缩性退变退变的细胞易误诊为癌细胞 细胞退变的原因 1 标本固定不及时 放置时间过长 体腔积液抽取后要在1小时内完成检查 2 由于疾病间皮细胞脱落退变 间皮细胞空泡变性 肿
13、胀退变 体积大 胞浆有空泡 核质比正常 3 异型间皮细胞 反应性不典型间皮细胞 异型间皮细胞见于慢性炎或肿瘤放疗后须与癌细胞鉴别 异型间皮细胞核质比仍属正常范围 核染色质细颗粒状 分布均匀 核仅有轻度异型 退变间皮细胞 异型间皮细胞 成团脱落退变的间皮细胞 癌细胞团 腹水异型间皮细胞 核大 深染 二 恶性病变脱落细胞 浆膜腔积液中98 的癌细胞是转移性的 例 肺癌 鳞癌或腺癌 乳腺癌 胃癌 大肠癌 卵巢癌 肝癌 胆囊癌等 腺癌占80 少数为鳞癌 未分化癌 原发性恶性间皮瘤少见 浆膜腔各种脱落癌细胞示意图 鳞癌 腺癌 未分化癌 三 癌细胞团 癌细胞体积增大 细胞大小不等 排列紊乱 失去极性 具有成巢倾向 群集 成堆出现 互相拥挤 堆叠或镶嵌状 细胞之间界限不清 由于癌细胞间的粘着力差 较易脱落 穿刺时癌组织较易被吸出 高分化腺癌细胞 排列呈腺腔样结构 核大小不等 腺细胞癌形态 高分化腺癌细胞 癌细胞排列呈腺腔样
