【最新】组织培养实验有关试剂的配制

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1、组织培养实验有关试剂的配制:MS 培养基储备液的配制成分 1 升储备液用量(mg)每升培养基取用量(ml)20*储备液 1(大量元素)NH4NO3KNO3CaCl2.2H2OMgSO4.7H2OKH2PO4330003800088007400340050200*储备液 2(微量元素)KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OCuSO4.5H2OCoCl2.6H2O16612404460172050555200*储备液 3(铁盐)FeSO4.7H2ONa2.EDTA.2H2O556074605200*储备液 4(有机成分)肌醇烟酸盐酸吡哆醇盐酸硫胺素甘氨酸20

2、000100100204005次氯酸纳消毒液:取 30ml 次氯酸纳溶液,用蒸馏水定容至 100ml。现配现用。75%的酒精:75ml 的 95%的酒精加水定容至 95ml。0.2的升汞溶液:称取 HgCl2 20 克,加蒸馏水至 4000ml。1N 盐酸:取 8.25ml 的浓盐酸,加蒸馏水定容至 100ml。1N NaOH:称 8g NaOH,用蒸馏水定容至 200ml。0.1mg/ml 的 2,4-D 溶液:取 25mg 的 2,4-D,加入少量 95%的酒精和 1N 的NaOH 溶解,再加蒸馏水定容至 250ml。0.1mg/ml 的 6-BA 溶液:取 25mg 的 6-BA,用少量

3、 1N 的盐酸溶解,再加蒸馏水定容至 250ml。遗传转化与 GUS 基因检测的试剂配制LB 培养基的配制:将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g如果需要用 1N NaOH(10 15ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L10ml 的 10mmol/l 的 AS(乙酰丁香酮)母液(100x)配制:称 19.6mg 的AS,先溶于少量甲醇中,然后慢慢加蒸馏水定容至 10ml,过滤除菌,分装成200ul/管(每组 1 管) ,使用时将 200ul 的 AS 母液加入 20ml 的 MS 液体培养基中。50mmol/l 的磷酸钠缓冲液(pH 7.0):

4、A 液:取 NaH2PO4.2H2O 3.12g 溶于蒸馏水,定溶至 100ml。 B 液:取 Na2HPO4.12H2O 7.17g 溶于蒸馏水,定溶100ml。取 A 液 39ml 与 B 液 61ml 混合,定容至 400ml,调 PH 至 7.0。50mmol/L 铁氰化钾母液:称 3.295g,用蒸馏水定容至 200ml50mmol/l 亚铁氰化钾母液:称 4.224g ,用蒸馏水定容至 200ml。0.5mol/l EDTA 母液(pH8.0):药品 分子量 100ml 500mlEDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g双蒸 H2O 80ml 400ml用

5、 NaOH 调 PH 至 8.0 6g 10gDdH2O 定容至 100ml 500mlGUS 检测液的配制 :100mgGluc,先溶于 1ml 的 DMF。取 80ml 50mmol/l 的磷酸钠缓冲液(pH 7.0) ,加入 1ml 50mmol/L 铁氰化钾、 1ml 50mmol/L 亚铁氰化钾和 2ml 0.5mol/l EDTA(PH 8.0) ,再加入已溶解的 Gluc,再加 20ml 的甲醇,混匀。 (配制方法参考现代植物生理学实验指南p348)将配好的 GUS 检测液分装于 1.5ml 的小管中(1ml/管,1 组 1 管) ,20C 保存备用。鲜 花 保 鲜 及 超 氧

6、物 歧 化 酶 活 性 测 定50mmol/l 的磷酸钠缓冲液(pH 7.0):A:NaH 2PO4.2H2O 3.12g 溶于蒸馏水,定溶至 100ml。B 液: Na2HPO4.12H2O 7.17g 溶于蒸馏水,定溶至 100ml。取 A 液 39ml 与 B 液 61ml 混合,定容至 400ml。PH7.0。50mmol/l 的磷酸钠缓冲液(pH 7.8):取 A 液 8.5ml 与 B 液 91.5ml 混合,定容至 400ml。PH7.8。SOD 提取液:50 mmol/L 磷酸缓冲液 含 0.1mmol/L EDTA;0.3%(w/v) Triton X-100;4%(w/v)

7、聚乙烯聚吡咯烷酮(pvpp,polyvinylpolyrrolidone), pH7.8 pvpp 比较难溶,多晃动几次,再静置一会,慢慢就会溶解。14.5 mmol/L dl甲硫氨酸:即 2.163 克/L,称 2.163g,用蒸馏水定容至1L(较难溶,需稍微加热) 。3umol/L EDTA: 每 500ml 中加 3ul0.5mol/L 的 EDTA 母液,用 50 mmol/L 磷酸缓冲液配制。2.25mmol/L NBT(1.84 克/L): 称 0.092 克,溶于 50ml 的 50 mmol/L 磷酸缓冲液磷酸缓冲液中。避光保存,现配现用.60 umol/L 核黄素:称 2.2

8、5mg 溶于 100ml 的 50 mmol/L 磷酸缓冲液中,避光保存,现配现用。10000ppm6BA:即 0.01 克/L,称 25mg6-BA,先加少量酒精和 1mol/L 的 NaOH溶解。再用蒸馏水定容至 250ml。0.25mg/ml 的 GA 母液:称 25mg 的 GA,先用少量 95%的酒精溶解,再用水定容至 100ml。3%的 8-羟基奎林(8-HQ):难溶于水,用柠檬酸溶液配制。生成 8-羟基喹林柠檬酸盐(羟基喹林:柠檬酸摩尔数比为 3:1) ,该盐能溶于水。先将所需柠檬酸溶于 50ml 左右的水中,然后将所需 8-羟基喹林溶于其中,不断搅拌 10-20min。待溶解后

9、再稀释至所需倍数。1mg/ml 2,4D:取 25mg 的 2,4-D,加入少量 95%的酒精和 1N 的 NaOH 溶解,再加蒸馏水定容至 250ml。5 克/L 柠檬酸溶液:称 5g 柠檬酸,用蒸馏水定容至 1L。阿斯匹林、VitC、蔗糖、葡萄糖、AgNO 3 、Na 2S2SO4、K 2HPO4、Ca(NO 3) 2、 KAL(SO4)2、Nacl、水杨酸(25mg/ml) 、硼酸纳、CuSO 4、KNO 3、MgSO 4 、 (NH4)2SO4、高锰酸钾、乙醇等试剂,根据学生各自设计的保鲜液需要,由学生自己配制。叶绿素理化性质的鉴定和含量测定实验试剂30%KOH-甲醇溶液:用 250m

10、l 的烧杯称 60gKOH,慢慢加入甲醇,在通风厨中进行,沸腾,不断搅拌,待完全溶解后,最后加甲醇至烧杯 200ml 刻度线即可。该试剂要现配现用。6N HCl(HCl:H 2O1:1):等量的浓 HCl等量的蒸馏水。10%醋酸:10ml 的冰醋酸中加入 90ml 的蒸馏水。10%氨水:10ml 的氨水中加入 90ml 的蒸馏水。NaCl ,石油迷(60-90 。 C) 、丙酮,MgCO 3、石英砂,醋酸铜 Cu(Ac)2 等试剂由学生根据具体情况添加。植物形态解剖实验的试剂配制1%的番红水溶液:称 1g 番红,溶解于 100ml 的蒸馏水中。1%的碘碘化钾溶液:碘、碘化钾各 1g 溶于 10

11、0ml 的蒸馏水中。0.02%的硼酸溶液:0.1g 硼酸溶解于 500ml 的蒸馏水中。10%的蔗糖溶液:10g 蔗糖用 80ml 的蒸馏水溶解,最后用蒸馏水定容至100ml。土壤全磷分析实验的试剂配制钼锑储存液:浓 H2SO4(98%-99% )153ml 缓慢倒入约 400ml 水中,搅拌,冷却。10g 钼酸铵溶解于约 60的 300ml 的水中,冷却。然后将浓 H2SO4 溶液缓缓倒入钼酸铵溶中,再加入 100ml0.5%的酒石酸锑钾溶液,最后用水稀释至 1升,避光储存。此储存液含 1%的钼酸铵,5.5mol/l 的 1/2 H2SO4 。钼锑抗显色剂:1.5g 抗坏血酸溶解于 100ml 的钼锑储存液中。二硝基酚指示剂:0.2g 2,6-二硝基酚或 2,4-二硝基酚溶解于 1000ml 水中。5 ppm P 标准溶液: 0.4390g KH2PO4 (二级, 105烘过 2 小时)溶解于200ml 水中,加入 5ml 浓 H2SO4 转入 1 升容量瓶中,用蒸馏水定容。此为100ppm P 标准溶液,可以长期保存。取此溶液稀释 20 倍,即为 5ppmP 标准溶液,只溶液不宜久存。浓硫酸(98%-99%)高氯酸 HClO4(70-72%)

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