半连续灌注培养中杂交瘤细胞的生长和代谢

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1、!卷!期#$年!月生 物 工 程 学 报!#$%&%()*$+,(-.#(/%0$(,(12%&(!)&(!*+,-+./!#$收 稿 日 期 :!0012!$2$1, 修 回 日 期 :!0002$32#。基 金 项 目 : 国 家 “ 九 五 ” 科 技 攻 关 课 题 资 助 ()&4052$#2$32$5) 。通 讯 联 系 人 。半 连 续 灌 注 培 养 中 杂 交 瘤 细 胞 的 生 长 和 代 谢史 亚 玲 张 元 兴张 立 沈 红 张 嗣 良( 华 东 理 工 大 学 生 物 反 应 器 工 程 国 家 重 点 实 验 室 上 海#$#36)摘 要 考 察 了 在 半 连 续

2、 灌 注 培 养 中7-83杂 交 瘤 细 胞 在 不 同 灌 注 速 率 下 细 胞 生 长 的 动 态 变 化 , 培 养 基 中 主 要 基质 的 消 耗 和 代 谢 物 的 生 成 。 当 灌 注 速 率3从!4$9升 高 到#4$9时 , 乳 酸 得 率 系 数4+:;-降 低!1$作 为 诊 断 试 剂 及 治 疗 用 途 的 单 克 隆 抗 体 有 着 很大 的 市 场 。 据 报 道 , 在!00#年 , 单 抗 在 美 国 的 年 销售 额 达亿 美 元 , 预 计 在!001年 将 达$亿 美 元 。正 是 这 样 的 前 景 驱 使 人 们 开 发 单 克 隆 抗 体 的

3、 高 产 量系 统 , 以 减 少 生 产 设 备 投 资 和 操 作 费 用 。 在1$年 代和0$年 代 初 , 人 们 主 要 致 力 于 新 型 反 应 器 的 开 发 ,但 随 着 以 搅 拌 罐 、 静 止 单 层 培 养 及 中 空 纤 维 为 主 的培 养 系 统 的 建 立 , 新 型 反 应 器 开 发 的 热 浪 已 经 降温!。 由 于 最 终 单 抗 的 产 量 决 定 于 细 胞 的 密 度 、 培养 时 间 和 单 抗 的 比 分 泌 速 率 , 故 越 来 越 多 的 研 究 着重 于 细 胞 代 谢 和 生 理 状 况 , 保 证 产 品 质 量 和 浓 度

4、。杂 交 瘤 细 胞 生 产 单 克 隆 抗 体 有 很 多 种 方 式 , 灌注 培 养 和 补 料 培 养 是 发 展 的 主 流 , 然 而 也 有 很 多 其他 可 供 选 择 的 方 式 , 如 半 连 续 灌 注 培 养#,3( 重 复 批培 养 ) , 循 环 批 培 养 , 恒 化 培 养 等 。 本 文 采 用 半 连 续灌 注 培 养 方 式 , 考 察 了 在 不 同 灌 注 速 率 下 杂 交 瘤 细胞 的 代 谢 情 况 。!材 料 与 方 法!细 胞 株 和 培 养 基7-83鼠 鼠 杂 交 瘤 细 胞 株 由 卫 生 部 武 汉 生 物 制品 研 究 所 建 立

5、并 提 供 , 其 生 产 的 单 克 隆 抗 体 用 于 预防 与 治 疗 肾 移 植 的 排 斥 反 应 。 本 文 采 用 的 自 制 的 无血 清 培 养 基 (ABC!) , 是 在DECF!$的 基 础 上 添加 氨 基 酸 、 维 生 素 、 转 铁 蛋 白 、 一 些 无 机 离 子 及 其 他成 分 形 成 的 。!#培 养 方 法杂 交 瘤 细 胞 静 态 培 养 采 用#5$=G方 瓶 , 装 液 量#$=G, 培 养 箱 温 度341H,IJ#浓 度 为5?!.C$C5D4638,-.$.%&*$/$+-,(*&,#$:(E0!(E*03.%4%5678F%3%4!$G

6、?$/?HI%C$C#,:J=CK!HH4%?5LC7?%?L4HM?N4H4%?,(*9,(9;!(:0&7!.L!7O,1?!LIG38011/#$%&(#$.%&*$/,(*;,%#:(!*; 沈 红8华 东 理 工 大 学 硕 士 学 位 论 文 ,(*:,9!*)2?!%5/G,1.-28234(*.#$*+,(*E,&:&(!&;97$!HD?%M-,P$?45HI!D?=Q6,M!554?O8#$.%&*$/#$*+,(*:),(:(09)!(0:*:M4$?=-M,O$!%HI1-8#$.%&*$/#$*+,(*:,!(:*&9!*);*14$?=7-,G$!=D497?,1.

7、71,8A4+:87,1=6.+4821FA!S$4%# T13U7A.!%SV4%# T13U74 21WU1C%# T13U724S$4!%#(8.9.:-;9*#?47#.-$=8%#*%9*65%&*$/$+-,8&9*+&9#EE09)B58.+0?. /I?#=CXLI!%N?L!YC$45CJ-./0I,Y=4NC!H?$5X?=?5L.N4?N4%5?4HC%L4%.C.5?=J.54C%H.$L.=?58/I?#=CXLICJH?$5,.L4$4Z!L4C%CJ#$.HC5?,=CN.HL4C%CJ$!HL!L?,!C%4!%NC%CH$C%!$!%L4YCN,X?=?4%?

8、5L4#!L?N835LI?=J.54C%=!L?4%H=?!5?NJ=C(8ENLC8EN,LI?$!HL!L?,4?$NHC?J4H4?%LJ=C#$.HC5?!$!H#$.N?H=?!5?N(:+,LI?!CS%4!,4?$NHC?J4H4?%LJ=C#$.L!4%?!#$%N?H=?!5?N&E+,LI?!$!%4%?,4?$NHC?J4H4?%LJ=C#$.L!4%?!$!#$%4%H=?!5?N;:+,LI?#$,H4%?,4?$NHC?J4H4?%L=?!4%?N!$C5LHC%5L!%L8/I454%N4H!L?LI!LH?$5XC.$N=?#.$!L?NLI?4=?L!YC$4HJ$.V!LI4#I?=H?$N?%54L,,!%N#$.L!L?=CN.H?N4%.!%L4L,!%N,=.!L?XC.$NL.=%4%LC!$!%4%?=!LI?=LI!%#$,H4%?Y,L=!%5!4%!L4C%835!=?5.$L,CL?%L4!$,LCV4H?J?HL5X?=?=?N.H?NY?H!.5?$?55!C%4!%N$!HL!L?X?=?=CN.H?N8C4?=J.54C%,?=J.54C%=!L?&;生 物 工 程 学 报()卷

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