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1、TORCH的检测 检验科李彩 一 TORCH的定义二 TORCH的感染三 TORCH的检测 一 TORCH的定义 TORCH是指可导致先天性宫内感染及围产期感染而引起围产儿畸形的病原体 它是一组病原体微生物的英文名称缩写 其中TO 弓形虫 TOX R 风疹病毒 RV C 巨细胞病毒 CMV H 单纯疱疹病毒 HSV 这组病原体感染有着共同的特征 即可造成母婴感染 孕妇由于内分泌改变和免疫力下降易发生原发感染 既往感染的孕妇体内潜在的病毒也容易被激活而发生复发感染 孕妇发生病毒血症时 病毒可通过胎盘或产道传播感染胎儿 引起早产 流产 死胎或畸胎等 以及引起新生儿多个系统 多个器官的损害 造成不同
2、程度的智力障碍等症状 特别在怀孕初的三个月胚胎处于器官形成期 此时受病毒感染 可破坏细胞或抑制细胞的分裂和增殖 器官形成期以后感染病毒 可破坏组织和器官机构 并形成持续感染 出生后继续排毒 能引起相应的病变 TORCH检测的意义 由于成人TORCH感染的临床症状不明显 无法自我感觉到是否收到感染 因此孕前几孕早期诊断对优生优育十分重要 目前 国际上公认的最方便 最先进的早期诊断方法是检测人体血清中的特异性IgM IgG抗体 以判断受到感染的情况 世界上许多发达国家已经将TORCH列为孕期常规检查项目 在优生优育方面发挥着重要作用 在国内 随着科学技术的发展和人民生活水平的提高 人们对优生优育的
3、认识逐步提高 TORCH检测越来越受到重视 二 TORCH的感染 弓形虫感染风疹病毒感染巨细胞病毒感染单纯疱疹病毒感染 弓形虫感染 弓形虫感染主要是摄入被猫粪中卵囊污染的食物和水 或摄入含有组织包囊的未煮熟肉引起的获得性感染 由于弓形虫可以通过胎盘 胎儿在孕期经胎盘传播感染 引起先天性弓形虫病 孕早期感染 多可导致死胎 流产 早产 畸胎和无脑儿 脑积水 小头畸形等孕中 晚期感染 出生婴儿多呈隐性感染 以后可出现脑钙化灶 视网膜脉络膜炎 精神运动障碍等 流行病学 弓形虫人群感染相当普遍 血清学调查国外人群抗体阳性率为25 50 少数地区可达80 以上 我国较大规模调查显示 人群血清抗体阳性率为0
4、 329 11 793 平均5 3 家畜阳性率可达10 50 风疹病毒感染 风疹病毒主要通过呼吸道感染引起风疹 风疹病毒易发生垂直感染 若孕妇妊娠早期感染风疹病毒 病毒可通过胎盘感染胎儿 引起流产或死胎 还可导致胎儿发生先天性风疹综合征 CRS 引起胎儿畸形 畸形主要表现为先天性心脏病 白内障 和耳聋 妊娠月份越小 CRS出现的频率越高 第1个月感染率为58 第2个月感染率为35 第3个月感染率为15 第4个月感染率为7 流行病学 隐性感染或感染风疹病毒后机体可产生特异性IgM和IgG IgG能持续多年 可获得持久免疫力 调查表明 我国育龄妇女血清中抗风疹病毒IgG阳性率为76 98 巨细胞病
5、毒感染 巨细胞病毒可由唾液 尿液及子宫颈分泌物中排出 密切接触 飞沫 经口 输血等都可以感染 巨细胞病毒是能引起先天性感染 胎儿的宫内感染 的主要病毒之一 先天性感染妊娠早期原发感染可能垂直传播给胎儿 造成胎儿先天性感染 巨细胞包涵体病 CID 表现为黄疸 肝脾肿大 血小板减少性紫癜 溶血性贫血和不同程度的神经系统损害 包括小儿畸形 智力低下 耳聋 脉络膜视网膜炎等 重者可导致流产或死产 围产期感染妊娠后期 产妇泌尿道和宫颈排出CMV 分娩时新生儿经产道亦可受到感染 多数症状轻微或无临床症状 若有为轻度呼吸障碍 肝功能损害 通常全身症状轻 无神经损伤 流行病学 巨细胞病毒在我国人群中的感染极为
6、普遍 初感染大多在2岁以下 通常呈隐性感染 少数人有临床症状 90 以上成人已有巨细胞病毒抗体 单纯疱疹病毒感染 单纯疱疹病毒所引起的生殖系疱疹已成为一种常见的性传播疾病 孕妇处于免疫抑制状态 易受感染 一旦感染 可引起垂直传播 使胎儿先天性感染 引起畸形 智力低下 流产等 HSV有两种血清型 HSV 和HSV HSV 主要通过呼吸道 皮肤和粘膜密切接触传播 感染腰以上部位的皮肤粘膜和器官 HSV 主要通过性行为传播和母婴传播 感染腰部以下部位的皮肤粘膜和器官 原发感染主要引起生殖器疱疹 流行病学 人群中HSV感染非常普遍 其中 HSV 的抗体阳性率为90 100 HSV 的抗体阳性率为3 5
7、 三 TORCH的检测 目前 在我国最方便 最常用的早期筛查方法是采用ELISA方法 定量检测采用化学发光法 TORCH的检测项目 弓形虫IgM抗体弓形虫IgG抗体风疹病毒IgM抗体风疹病毒IgG抗体巨细胞病毒IgM抗体巨细胞病毒IgG抗体单纯疱疹病毒 型IgM抗体单纯疱疹病毒 型IgG抗体 其中本科室对单纯疱疹病毒 型IgM抗体 单纯疱疹病毒 型IgG抗体的检测是采用ELISA方法 其余六项则是采用化学发光法定量检测 全自动化学发光仪 酶联免疫吸附试验 ELISA HSV 型IgM抗体检测原理 采用鼠抗人IgM抗体包被微孔板加入待测标本 捕获标本中的相应抗体 当存在该抗体 则与包被的鼠抗人I
8、gM抗体结合加入辣根过氧化物酶 HRP 标记的HSV抗原 与之结合 形成鼠抗人IgM 抗HSVIgM抗体 HSV抗原 HRP复合物加入A B底物显色 显色程度直接反映标本抗体的量 酶联免疫吸附试验 ELISA HSV 型IgG抗体检测原理 采用HSV 型重组抗原包被微孔板加入待测标本 当标本中存在HSV 型IgG抗体时 该抗体与包被的HSV 型抗原结合加入辣根过氧化物酶 HRP 标记的抗人IgG结合 形成HSV 抗原 HSV 抗体 HRP 抗人IgG复合物加入A B底物显色 显色程度直接反映标本抗体的量 酶联免疫吸附试验 ELISA 操作步骤 加入样品稀释液100 L 待测标本5 L37 孵育30分钟洗板 加酶100 L37 孵育30分钟洗板 加显色剂A B各50 L显色37 孵育10分钟加终止剂50 L 450nm读取吸光度值判定结果 结果判定 实验操作过程中的注意事项 1 操作过程的安全防范2 试剂盒使用前的30分钟室温平衡3 实验操作过程中避免交叉污染4 洗板要洗干净5 同一家试剂公司 显色剂 终止剂可互用 提高效率 谢谢
