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1、第七章细菌各论 2019 1 第一节葡萄球菌属葡萄球菌分布广泛 致病性葡萄球菌常引起各种化脓性疾患 败血症或脓毒败血症 当污染食品时 可引起食物中毒 一 一般特征圆形 直径0 5 1 5um 排列葡萄串状 革兰氏阳性 需氧或兼性厌氧 无芽孢 有的有荚膜 无运动力 可在普通培养基 血琼脂等生长 致病性菌株多能产生黄色或柠檬色素 二 分类葡萄球菌属分为3种 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 2019 2 葡萄球菌 streptococcus 2019 3 电镜下的葡萄球菌很像新疆的马奶葡萄 2019 4 三 金黄色葡萄球菌常见的致病菌多为金黄色葡萄球 1 培养及生化特性在普通琼脂平板形成
2、湿润 光滑 隆起的圆形菌落 直径1 2mm 有时可达4 5mm 菌落颜色依菌株而异 初呈灰白色 继而为金黄色 在血液琼脂平板形成的菌落较大 产溶血素的菌株多为病原菌 在菌落周围呈现明显的 溶血 2019 5 2 抗原及变异葡萄球菌细胞壁上的抗原构造比较复杂 含有多糖及蛋白质两类抗原 多糖抗原具有型特异性 蛋白抗原人源菌株都含有葡萄球菌蛋白A SPA 来自动物源菌株则少见 SPA能与人 猴猪 犬及几乎所有哺乳动物的免疫球蛋白的Fc端结合 结合后的IgG仍能与相应抗原特异性反应 用于免疫学及诊断技术 协同凝集试验 SPA与IgG结合形成的复合物在机体内具有生物学作用 趋化性 抵抗吞噬 损伤血小板等
3、 2019 6 3 抵抗力及药物敏感性在无芽孢菌中 葡萄球菌的抵抗力较强 在干燥的脓汁或血液中可存活2 3个月 80 30min才能杀死 对龙胆紫 洗必泰 消毒净 新洁尔灭 度米芬等敏感 对磺胺类 青霉素 金霉素 红霉素 新霉素等抗生素敏感 但易产生耐药性 4 致病性及毒力因子金色葡萄球菌可产生多种毒素和酶 故致病性强 常引起化脓性疾病 创伤感染 脓肿 乳腺炎 败血症 脓毒败血症等 及毒素性疾病 被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物的食物中毒性疾病 2019 7 毒力因子 葡萄球菌蛋白A 荚膜 毒素及酶 毒素 溶血素 与牛羊的坏疽性乳腺炎有关 它还导致白细胞等崩解 毒素是不耐热的蛋白质 对
4、多种哺乳动物红细胞有溶血作用 而从动物分离的菌株常见 溶血素 肠毒素引致人类食物中毒 表现呕吐 腹泻 肠毒素是结构相似的一组蛋白质 耐热抗酸 能经受100 30min或胃蛋白酶的水解 2019 8 凝固酶多数致病株能同时产生两种凝固酶 一种分泌于菌体外 游离凝固酶 另一种结合在菌体表面 结合凝固酶 它们能使含有抗凝剂的家兔或人的血浆凝固 称为凝固酶 凝固酶耐热 经100 30min或高压灭菌仅降低少量活性 凝固酶有助致病菌株抵御宿主体内吞噬细胞和杀菌物质的作用 同时也使感染局限化 检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标 致病株多数为凝固酶阳性 另外还有耐热核酸酶 溶纤维蛋白酶 透明质酸酶 又
5、称为扩散因子 2019 9 5 微生物学诊断 1 涂片染色镜检取脓汁 渗出液 乳汁 血液 中毒症取剩余食物等 将病料涂片染色镜检 2 分离培养鉴定将病料划线接种于5 绵羊或兔血液琼脂平板 37 培养18 24h 菌落金黄色 周围呈溶血圈者多为致病菌株 进一步鉴定还要做凝固酶试验 分解甘露醇试验 阳性者多为致病菌 必要时可做动物试验 2019 10 第二节链球菌属链球菌种类多 分布广 有些可致人或动物的各种化脓性疾病 肺炎 乳腺炎 败血症等 一 分类按溶血性分为 3类 型溶血链球菌在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环 红细胞未完全溶解 血红蛋白变成绿色 此菌致病力不强 多为条件性菌 型溶血链球菌菌
6、落周围形成完全透明的溶血环 红细胞完全溶解 这类菌致病力强 常引起人及动物各种疾病 型溶血链球菌菌落周围无溶血现象 一般为非致病菌 2019 11 二 形态与染色链球菌呈圆形或卵圆形 直径小于2 0um 常排列成链状或成双 肉汤内生长的链球菌常呈长链排列 革兰氏阳性 多有荚膜 三 培养及生化特性多为兼性厌氧菌 致病菌营养要求较高 普通培养基中生长不良 需添加血液 血清 葡萄糖等 在血液琼脂平板上长成直径0 1 1 0mm 灰白色 表面光滑 边缘整齐的小菌落 多数致病菌株有溶血性 2019 12 2019 13 四 致病性致病性链球菌可产生多种毒素或酶 可致人及多种动物的很多疾病 化脓感染 肺炎
7、 乳房炎等 溶血素分为对氧敏感溶血素O SLO 和对氧稳定溶血素S SLS 两种 呈溶血性 致热外毒素旧名红疹毒素 主要由A群链球菌产生 致人猩红热 小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹 大剂量注射可致全身红疹 其他不同致病菌株 可产生链激酶 溶纤维蛋白酶 透明质酸酶等 其性质作用类葡菌 细胞壁脂磷壁酸 LFA 与菌体吸附于宿主黏膜有关 其荚膜成分 M蛋白等具有抗吞噬作用 2019 14 五 抵抗力本属细菌的抵抗力不强 对青霉素 磺胺类药物敏感 易产生耐药性 六 免疫性链球菌的抗原结构比较复杂 机体感染后有多种抗体产生 已知抗M蛋白的抗体具有保护作用 M蛋白有多种抗原型 各型间缺乏有效的交叉保护
8、我国研制的猪 羊链球菌疫苗有较好的免疫效果 2019 15 七 微生物学诊断病料 脓汁 乳汁 血液 组织 涂片染色镜检 见革兰氏阳性 具荚膜 成对或链状排列的球菌 可作初步诊断 确诊需用血液琼脂平板分离培养 观察菌落 溶血等特征 并进行生理生化试验 用群 型特异性血清作血清学试验 对病原菌定群或定型 2019 16 八 主要致病菌无乳链球菌 停乳链球菌 乳房链球菌 三种链球菌是牛 山羊和绵羊的急性 慢性乳腺炎的病原菌之一 其中最常见的是无乳链球菌 马链球菌兽疫亚种 旧称兽疫链球菌 可致多种家畜的炎症及败血病 包括马的创伤感染 败血症 子宫炎 流产 功驹脐带炎 牛乳腺炎 子宫炎 猪败血症 关节炎
9、 羊败血症 心包炎 胸膜炎 肺炎 鸡败血症等 2019 17 马链球菌马亚种 旧称马腺疫链球菌 是引起马腺疫的病原体 感染马下颌淋巴结形成脓灶 肺炎链球菌 又名肺炎球菌 肺炎双球菌 常引起人大叶性肺炎或脑膜炎 亦可致幼畜肺炎或败血症 猪链球菌 是猪链球菌病的重要致病菌 并可感染人而致死 2019 18 马腺疫链球菌 肺炎链球菌 2019 19 第三节埃希菌属本属现有5个种 其中最重要的种是大肠埃希菌 E coli 俗称大肠杆菌 下分血清型 本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一 大肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指标 本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象 2019 2
10、0 一 形态染色特性大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌 大小0 4 0 7um 2 3um 两端钝圆 散在 周生鞭毛可运动 多有菌毛 二 培养及生化特性本菌为兼性厌氧菌 在普通培养基上生长良好 在营养琼脂上 形成圆形凸起 光滑 湿润 半透明 灰白色菌落 径约2 3mm 本菌大多可以发酵乳糖产酸产气 麦康凯琼脂上形成红色菌落 在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落 一些致病性菌株在绵羊血平板上呈 溶血 2019 21 2019 22 三 抗原及血清型大肠杆菌抗原主要有O K和H三种 是本菌血清型鉴定的物质基础 已确定的大肠杆菌O抗原有173种 K抗原有80种 H抗原有56种 大肠杆菌血清型可高达
11、数万种 但致病性大肠杆菌的血清型数量是有限的 1 O抗原121C加热2h不破坏其抗原性 LPS的特异多糖侧链 每个菌株只含有一种O抗原 用单因子抗O血清做玻板或试管凝集试验鉴定之 2 K抗原热不稳定抗原 为被膜或荚膜 菌毛抗原 具有K抗原菌株不被抗O血清凝集 称为O不凝集性 一个菌落可含1 2种不同K抗原 也有无K抗原的菌株 2019 23 3 H抗原是一类不耐热的鞭毛蛋白抗原 加热至80 或经乙醇处理后即破坏其抗原性 每一有动力的菌株仅含有一种H抗原 大肠杆菌抗原可用O K H排列表示其血清型 如O8 K23 L H19 表示该菌具有O抗原8 L型K抗原23 H抗原为19 2019 24 四
12、 致病性条件性大肠杆菌 病原性大肠杆菌与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类 产肠毒素大肠杆菌 ETEC 产类志贺毒素大肠杆菌 SLTEC 肠致病性大肠杆菌 EPEC 败血性大肠杆菌 SEPEC 及尿道致病性大肠杆菌 UPEC 2019 25 1 产肠毒素大肠杆菌 ETEC ETEC系一类致人和幼畜 初生仔猪黄痢 犊牛 羔羊及断奶仔猪腹泻 腹泻的最常见的病原性大肠杆菌 其毒力因子主要由黏附素性菌毛和肠毒素两类构成 初生幼畜被ETEC感染后常因剧烈水样腹泻和迅速脱水死亡 发病率和死亡率均很高 2019 26 黏附性菌毛能黏附于宿主的小肠上皮细胞 故又称其为黏附素或定居因子 对其抗原称作黏附素抗
13、原或定居因子抗原 肠毒素是ETEC在体内或体外生长时产生并分泌到胞外的一种蛋白质性毒素 可分为不耐热肠毒素 LT 和耐热肠毒素 ST 二种 可使肠细胞分泌机能亢进 引起水样腹泻和迅速脱水 LT对热敏感 有抗原性 65 30min即被灭活 ST耐热 无抗原性 它耐100 加热30min而不失活 能抵抗多种蛋白酶作用 2019 27 2 产类志贺毒素大肠杆菌 SLTEC 系一类在体内或体外生长时可产生类志贺毒素 SLT 的病原性大肠杆菌 在动物SLTEC可致猪的水肿病 以头部 肠系膜和胃壁浆液性水肿为特征 常伴有共济失调 麻痹或惊厥等神经症状 发病率较低但致死率很高 发现SLTEC与犊牛出血性结肠
14、炎有关 在致幼兔腹泻的大肠杆菌菌株中也查到SLT 2019 28 毒力因子包括粘附性菌毛和致水肿病2型类志贺毒素 粘附性菌毛 F18菌毛 是猪水肿病的SLTEC菌株的一个重要的毒力因子 它有助于细菌在猪肠黏膜上皮细胞定居和繁殖 致水肿病2型类志贺毒素 SLT 2e或SLT 2v 由引起猪水肿病的SLTEC产生的一种蛋白质性毒素 SLT 2e是主要毒力因子 2019 29 五 微生物学诊断分离与鉴定程序可参见图16 1 1 采病料分离培养败血症病例采集内脏组织 肝脾肾等 对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各段小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结 分别在麦康凯平板和血平板上划线分离培养 2
15、 可疑菌落生化鉴定挑取麦康凯平板上的红色菌落或血平板上呈 溶血 仔猪黄痢与水肿病菌株 的典型菌落几个 分别转种三糖铁 TSI 培养基和普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养 2019 30 3 纯培养物抗原鉴定将TSI琼脂反应模式符合埃希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做O K抗原鉴定 4 检测毒力因子确定其属于何类致病性大肠杆菌 2019 31 六 防治目前已有菌苗 包括抗粘附素的含单价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗或亚单位苗 抗肠毒素的类毒素苗 表达一种或两种粘附素以及同时表达一种粘附素和肠毒素的基因工程菌苗等 用这些菌苗免疫怀孕母畜后 均能使其后代从初乳中获得抗体而被动保护 2019 3
16、2 用多种常见O抗原的鸡大肠杆菌灭活油佐剂菌苗 给各种日龄鸡注射后可获得较好的预防效果 免疫力可达3 5月不等 对猪水肿病预防 用由几种常见O抗原菌株制成的灭活菌苗 小试结果表明 此苗能较显著减少仔猪群中该诉的发病率 保护率约60 70 生物学方法微生态制剂 抗菌药物耐药菌株产生 药敏试验 2019 33 第四节沙门氏菌属沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌 通常都以周生鞭毛运动 在三糖铁琼脂上常产生H2S 大多沙门氏菌不发酵乳糖 绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性 能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病 并为人类食物中毒的主要病原之一 在医学 兽医和公共卫生上均十分重要 沙门氏菌血清复杂 有2500种以上 几乎包括所有对人和动物致病的血清型菌株 2019 34 一 形态及染色特性形态染色特性与同科其他菌属相似 呈杆状 0 7 1 5umX2 0 5 0um 革兰氏阴性 除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外 其余均有周生鞭毛可运动 大多数有菌毛 二 培养及生化特性本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属相似 沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠 形成较小的菌落 在肠道菌鉴别或选择性培养基上
