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1、脓液伤口标本细菌学检验标准操作规程1. 目的规范脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。2.适用范围脓液培养或涂片检查。3.标本3.1 标本类型 脓液。3.2 标本采集3.2.1 开放性脓性和脓性分泌物 用无菌盐水或75%酒精擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡处采集2支拭子，1支为涂片检查用，1支作培养用。3.2.2 大面积烧伤的创面分泌物 用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内（注明采集部位）送检。3.2.3 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。3.3 标
2、本拒收标准3.3.1 标本标识与化验申请单不符。3.3.2 标本不是无菌留取。3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过2小时。4. 试剂、仪器4. 1革兰染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦克凯平板、相关生化试剂等。4.2 VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡（GNI+）、革兰阴性菌药敏卡（GNS）、革兰阳性菌鉴定卡（GPI）、革兰阳性菌药敏卡（GPS）、真菌鉴定卡（YBC）、药敏纸片、TBA板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2培养箱等。5. 细菌鉴定和药敏质控参见质量管理程序6. 检验步骤接收标本后，立即对标本进
3、行编号、登记。6.1 涂片检查 革兰染色镜检，报告“查见革兰性菌，形似菌”或报告“未查见细菌”。6.2 培养6.2.1 一般细菌培养 标本接种于接种于血琼脂平板、巧克力琼脂平板和麦康凯（或EMB、中国蓝）琼脂平板，置于5%-10%CO2环境中，35C培养18-24小时，根据菌落及染色形态特点，作出初步判断，作出初步判断，再按各类细菌的生物学特性进行鉴定。6.2.2 厌氧菌培养 取脓液标本接种于厌氧血琼脂平板及其他选择平板，置于厌氧菌环境培养，根据生长情况及涂片染色结果，按厌氧菌生物学特性进行鉴定。6.2.3 嗜血杆菌及奈瑟菌培养 接种于巧克力琼脂平板，置5%-10%CO2环境中培养。6.2.4
4、 结核分枝杆菌培养 参见结核分枝杆菌检验标准操作规程。6.2.5 真菌培养 可用沙氏培养基。7.结果报告查见致病菌，报告菌名和药敏结果。8.注意事项8.1 对于某些特殊病人（如气性坏疽病人），在菌种鉴定及药敏试验结果尚未报出之前，根据涂片镜检情况，采取治疗措施。8.2 厌氧菌培养取得样本后，拭子应立即置于厌氧运送管，尽可能少让样本暴露于空气中。穿刺时最好以针筒直接抽取，避免接触环境中氧气。9. 临床意义从脓液及创伤标本中能检出的病原菌微生物种类很多，最常见的由葡萄球菌和链球菌引起的局部化脓性感染，包括有毛囊炎、疖、痈、甲沟炎、扁桃体炎、乳腺炎、中耳炎、外耳道疖肿、外耳道炎、细菌性结膜炎、脓疱疮
5、、外科切口及创伤感染等。化脓性骨髓炎、化脓性关节炎的主要致病菌是金黄色葡萄菌。慢性骨髓炎和慢性化脓性关节炎病原菌中，除上述细菌外，主要为结核分枝杆菌。脓液标本中可检出铜绿假单胞菌、变形杆菌和类白喉棒状杆菌等，常为继发感染或污染所致。气性坏疽主要致病菌为产气荚膜梭菌，其次为水肿梭菌、败毒梭菌和溶组织梭菌等。坏疽常继发葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌或其他需氧菌感染。器官脓肿和机体深部组织的脓肿多为厌氧菌感染。危急值报告培养出产气荚膜梭菌及时按传染病报告。参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL32:2008医学实验室质量和能力认可准则在微生物学检验领域的指南.20082 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，20073 叶应妩，王毓三，申子瑜主编全.国临床检验操作规程第.三版.南京：东南大学出版社，20064 Murray PR. Manual of Clinical Microbilogy.9th ed.Washington：ASM Press，20075ISO15189:2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007 编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：
