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1、目录天然药物化学实验须知2天然药物化学实验项目7实验一 黄柏中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定7实验二 槐米中芸香苷的提取、分离与鉴定11实验三 八角茴香中挥发油的提取、分离与鉴定15实验四 茶叶中咖啡因的提取、分离与鉴定19天然药物化学基本操作技能2325天然药物化学实验天然药物化学实验须知（一）实验目的1.验证理论，加深对理论知识的理解。2.掌握回流提取、连续回流提取、两相溶剂萃取（分液漏斗法）、溶剂回收、薄层色谱等基本操作技能。3.熟悉结晶法、柱色谱法、化学成分预试验等实验技术。4.了解四大光谱（紫外、红外、核磁共振、质谱）的基本操作规程。5.培养观察、分析和解决问题的实际工作能力以及科研动手
2、能力。（二）实验要求1.实验前，认真阅读实验内容及其相关知识，掌握实验原理、各步操作方法以及实验注意事项。2.天然药物化学实验时间长及操作多，实验前应作好有关实验内容在时间上的计划，尽量做到实验紧凑有序。3.尊重实验指导老师，听从实验安排。4.不迟到，不早退。因急事中途离开实验室，必须向老师请假。6.以科学的实事求是态度，认真及时记录操作步骤、实验现象、有关数据、实验结果等。7.认真如实地填写实验报告，及时上交。（三）实验室规则1.进实验室必须穿工作服。2.进实验室后，首先清点本次实验所用仪器设备、溶剂、试剂，熟悉存放位置。3.实验室严禁吸烟、饮食。不做与实验无关的事情。4.实验室应保持安静，
3、不许在实验室大声谈笑、嬉戏打闹。5.严格遵守安全规则和各种仪器操作规程。对性能和操作不熟悉以及与本次实验无关的仪器设备，不要随便安装使用，贵重仪器设备，未经老师允许，不得随意动用。6.正确取用药品、溶剂和试剂，避免交叉污染，确保实验的准确性。7.实验药品、试剂以及仪器，用后及时归还原位，不要乱拿乱放。8.保持实验室的干净整洁，实验药渣以及纸屑等固体废弃物投入垃圾箱，易污染环境的废弃液倒入废液缸，有毒、易燃、易挥发的废弃液倒入指定的有盖废液瓶中，一般废弃液冲入下水道。9.爱护公物，注意节约水电和能源，不浪费药品、试剂。损坏仪器设备，及时向老师报告，并登记。10.实验完毕后，将所用仪器设备洗涤或擦
4、拭干净，摆放整齐，清点数目。11.安排值日生打扫实验室。检查关闭水、电、煤气、门窗。（四）实验室安全规则1.实验前，熟悉本次实验所用仪器设备的安装、操作方法、注意事项以及药品、试剂、溶剂的有关性能。熟悉有关消防器材的存放位置和使用方法。2.药品、试剂应远离火源。使用易燃溶剂时，实验室应避免有明火。3.在实验过程中，应检查仪器管道是否畅通，连接部位是否牢固。温度控制是否适宜。电器及开关是否发热，有无漏电或煤气泄漏现象。4.实验室应保持空气流通。做有害气体产生的实验，应在难风橱内进行。嗅闻气体要注意正确的方法。5.不要正面俯视正在加热的物质。加热的容器管口不要对着别人或自己。不要在加热溶液中加放沸
5、石或活性炭。玻璃仪器不要骤冷或骤热，防止爆裂。6.吸取有害液体，应使用吸球（不能直接用口吸取），使用有毒害药品、溶剂、试剂后，要及时洗手。7.配制易产热溶液时，应将药品或试剂缓慢向溶剂中加入，边加边搅拌。8.不要用湿手开闭电闸或电器开关。9.实验完毕后，及时切断电源，关闭酒精灯，关闭煤气。（五）实验室安全事故天然药物化学实验，常以电、煤气、酒精作能源，经常接触对人体有毒害作用的试剂，难免发生一些安全事故。下面介绍几种实验室事故处理措施：1. 中毒 中毒有呼吸道吸入中毒、口服中毒、皮肤接触中毒三种情况。如发生中毒现象，应迅速将中毒者扶离现场至通风良好的地方，解开衣领，松开裤带，作深呼吸，轻者可慢
6、慢恢复。较重者可饮服高锰酸钾（1：5000）或1硫酸铜溶液后，压舌催吐，呕吐后，再根据毒物性质不同，选择饮服鸡蛋清、牛奶、淀粉糊、桔子汁、咖啡碱、浓茶等。如发生昏迷、休克，应进行人工呼吸或给氧，并及时送往医院急救。2. 灼伤 火焰、高温液体、炽热物体、溶剂蒸汽、电热物、化学药品直接作用于人体，引起皮肤或机体的烧、烫伤，称为灼伤。如为火灼伤，忌水洗，可局部涂抹苦味酸、甘油、鸡蛋清、烧（烫）伤膏等。药物灼伤应先用大量水冲洗，再根据药物的性质，采用适宜的方法处理。如酸碱灼伤，先用大量水冲洗后，再用弱碱或弱酸水溶液冲洗，并局部涂凡士林。溴灼伤，用酒粗以及2硫代硫酸钠分别清洗，接着用蘸有甘油的棉球轻轻擦
7、洗，最后涂抹甘油或烫伤油膏等。酚类灼伤，用温水和5酒精洗后，用饱和硫酸钠水溶液湿敷。如果试剂溅入眼内，先用在量水淋冲，再点入可的松眼药水等。3. 触电 如有人发生触电事故，设法使触电者脱离电源是当务之急，方法有：（1）迅速切断电源（2）用木棍或竹竿拨开电线（3）穿胶底鞋或踏木板，戴橡胶手套拉开触电者（切忌不采取措施，徒手直接拉触电者，以免连环触电）。脱离电源后，触电轻微者可立即自行恢复，轻严重者（数秒钟未恢复知觉）须进行人工呼吸，并立即送医院急救。4. 燃烧 一旦发生燃烧事故，要沉着冷静，切忌手忙脚乱。首先迅速切断电源，关闭煤气，移走火源附近易燃、易爆物品，再根据燃烧物的理化性质，选用适宜物质
8、和方法法扑灭。常用的灭火物质与器材有水、砂土或泡沫、惰性气体、四氯化碳灭火器等。比水轻，与水不混溶的溶剂燃烧，用砂土或泡沫、二氧化碳、四氯化碳灭火器扑灭，切忌用水，以免火势蔓延。比水重，与水不混溶的有机溶剂燃烧，可用喷水的方法扑灭。水溶性溶剂的燃烧，可用砂土、喷水或泡沫、二氧化碳、四氯化碳灭火器等扑灭。不能用水和泡沫灭火器灭火的物质有：钾、钠、钙、锌粉、镁粉、铝粉、硼氢化钠（钾）、氢氧化钠（钾）、五氯化磷、五氧化二磷、过氧化钠（钡）、发烟硫酸等。电器起火，必须迅速切断电源，切忌在有电情况下使用水或泡沫灭火器。5. 爆炸 产生爆炸的原因一般有三种情况：（1）易爆物在一定条件下发生剧烈的化学反应而
9、爆炸，如多硝基化合物。（2）某物质的蒸气与空气达到一定浓度时，遇火星产生爆炸。（3）加热液体物质时，容器因内压增大而爆炸。爆炸不仅直接伤害人体，损坏仪器设备，而且往往伴随燃烧，危害极大。万一发生爆炸事故，不要惊慌，应根据情况，采取适当方法处理。因爆炸而受伤者，小伤可自行处理，重伤及时送往医院救治。对因爆炸而产生的燃烧，按上述燃烧灭火的方法处理。天然药物化学实验项目实验一 黄柏中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定目的要求通过提取分离和鉴定黄柏中的小檗碱，掌握渗漉法、盐析法、结晶法和薄层色谱法的基本操作过程及注意事项，熟悉小檗碱的化学鉴定方法。实验内容（一）主要成分的结构黄柏为芸香科植物黄皮树Phello
10、dendron Chinese Schneid.或黄檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥树皮。前者习称“川黄柏”，后者习称“关黄柏”。川黄柏主产于四川、贵州、湖北等地。关黄柏主产于辽宁、吉林等地。黄柏具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮等功效。黄柏中主要含有小檗碱（berberine），基结构如下：川黄柏含小檗碱约1.375.8，关黄柏含小檗碱约0.601.64。（二）主要成分的性质小檗碱异名黄连素，分子式C20H18NO4+，分子量336.37。自水或稀乙醇中结晶得到的小檗碱为黄色针状结晶，盐酸小檗碱为黄色小针状结晶。小檗碱能缓溶于冷水（1：20），易溶于热水和热乙醇
11、 ，难溶于丙酮、氯仿、苯。盐酸小檗碱微溶于冷水，易溶于热水，不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。（三）基本原理利用小檗碱可溶于水，盐酸小檗碱几乎不溶于水的性质，先将药材用石灰乳润湿，使药材吸水膨胀，小檗碱游离，同时可使黄柏中含有的粘液质沉淀。用水渗漉提取小檗碱，再将其转化成盐酸盐而沉淀析出，结合盐析法得到盐酸小檗碱。（四）操作步骤1.提取黄柏粗粉（100g），置1000mL烧杯中，加入15gCa(OH)2,800mL水，静置1小时，用棉花抽滤。滤液加入7氯化钠，装广口瓶中过夜析出沉淀，抽滤。沉淀即为盐酸小檗碱粗品3.鉴定（1）取盐酸小檗碱（自制）约50mg于10mL试管中，加纯化水5mL，加热溶解，加入
12、2滴10氢氧化钠，显橙色。溶液放冷后，漏斗滤过，滤液中加入数滴丙酮即产生黄色丙酮小檗碱的沉淀。（2）取盐酸小檗碱（自制）少许于10mL试管中，加稀硫酸2mL振摇半分钟溶解后（不会全溶），加漂白粉少许，显樱红色。（3）盐酸小檗碱的薄层色谱鉴定吸附剂：中性氧化铝（软板）展开剂：氯仿-甲醇（9：1）显色剂：紫外灯下观察荧光或自然光下观察黄色斑点试样：0.1%盐酸小檗碱乙醇液（自制）对照品：0.1盐酸小檗碱乙醇液基本操作注意点1.实验原料尽可能选用小檗碱含量较高（1.375.8）的川黄柏。2.加入氯化钠的目的是将小檗碱转化成盐酸盐并利用其盐析作用，降低盐酸小檗碱在水中的溶解度。其用量不宜超过10,否则
13、溶液的比重增大，使盐酸小檗碱结晶呈悬浮状态而难以沉淀，要趁热滤过，防止盐酸小檗碱在滤过时析出结晶，使滤过困难，产量降低。3.中性氧化铝板自行制备，3g氧化铝加入7mL CMC-Na，铺成两块板思考题1. 怎样从黄柏中提取分离盐酸小檗碱？原理是什么？2. 用薄层色谱法检识盐酸小檗碱时，为什么常选用氧化铝作吸附剂？如果选用硅胶作吸附剂，怎样操作才能达到较准确的结果？实验二 槐米中芸香苷的提取、分离与鉴定目的要求1. 通过芸香苷的提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理及操作。2. 通过芸香苷结构的鉴定，了解苷类结构研究的一般程序和方法。3. 要求得到芸香苷、槲皮素产品。实验内容（一） 主要成分的结构及性质槐米为豆科植物槐Sophora japonica的花蕾，其有效成分为芸香苷，又称芦丁（rutin），芸香苷是由苷元槲皮素与芸香糖（rha16glc）连接而成的二糖苷，结构及性质见教材第六章第六节“黄酮类化合物提取分离实例”。（二） 基本原理提取芸香苷的方法很多，目前我国多采用碱溶酸沉法，提取原理是依据芸香苷结构中含有酚羟基，能与碱成盐而溶于水中，向此盐溶液中加入酸，则芦丁游离析出。芦丁的精制是利用它可溶于热水，难溶于冷水的性质进行的。（三） 操作步骤1. 芸香苷的提取 称取槐米粗粉20g，置500mL或1000mL烧杯中，加入0.4%硼
