T-紫外可见分光光度计应用案例--普析.docx

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1、紫外可见分光光度计应用案例案例1.肉制品中亚硝酸盐的测定前处理方法:称取5g(精确至0.01g)制成匀浆的试样,置于50mL烧杯中,加12.5mL饱和硼砂溶液,搅拌均匀,以70左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中,于沸水浴中加热15min取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。在振荡上述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置30min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表1):表1 测量参数测量波长(nm)538比色皿光程

2、(cm)2检测界面(见图1):图1 肉制品中亚硝酸盐的检测界面上图标准曲线中,亚硝酸钠标准系列的质量依次为:0.0g、2.0g、4.0g、6.0g、8.0g、10.0g、15.0g、20.0g、25.0g (100mL容量瓶中)。方法检出限:该方法检出限为1mg/kg,能够满足GB 5009.33-2010 食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定 第二法 分光光度法的检测要求。参考标准:GB 5009.33-2010 食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定 第二法 分光光度法案例2.啤酒中甲醛的测定前处理方法:吸取已除去二氧化碳的样品25.00mL移入500mL蒸馏瓶中,加20

3、0g/L磷酸溶液20.00mL于蒸馏瓶,接水蒸气蒸馏装置中蒸馏,收集馏出液于100mL容量瓶中(约100mL),冷却后加水稀释至刻度。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表2):表2 测量参数测量波长(nm)415比色皿光程(cm)1检测界面(见图2):图2 啤酒中甲醛的检测界面上图标准曲线中,甲醛标准系列的质量依次为:0.0g、0.5g、1.0g、2.0g、3.0g、4.0g、8.0g(25mL比色管中)。方法检出限:该方法检出限为0.8g,能够满足GB/T 5009.49-2008 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法 (4.4甲醛)的检测要求。参考

4、标准:GB/T 5009.49-2008 发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法 (4.4甲醛)案例3.食用植物油中过氧化值的测定前处理方法:精密称取约0.01g1.0g试样(准确至刻度0.0001g)于10mL容量瓶内,加三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂溶解并稀释至刻度,混匀。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表3):表3 测量参数测量波长(nm)500比色皿光程(cm)1检测界面(见图3):图3 食用植物油中过氧化值的检测界面上图标准曲线中,铁标准系列的质量依次为:0.0g、2.0g、5.0g、10.0g、20.0g、30.0g、40.0g(10mL

5、比色管中)。方法检出限:该方法检出限为0.4g,能够满足GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法 (4.2过氧化值 第二法 比色法)的检测要求。参考标准:GB/T 5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法 (4.2过氧化值 第二法 比色法)案例4.棉籽油中游离棉酚的测定前处理方法:称取1.000g(精确至0.001g)精制棉油,置于100mL具塞锥形瓶中,加入20.0mL丙酮(70%),并加入玻璃珠3粒5粒,在电动振荡器上振荡30min,然后在冰箱中冷藏,放置过夜。取此提取液之上清液过滤,滤液供测定用。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责

6、任公司)仪器条件(见表4):表4 测量参数测量波长(nm)378比色皿光程(cm)1(石英)检测界面(见图4):图4 棉籽油中游离棉酚的检测界面上图标准曲线中,棉酚标准系列的质量依次为:0.0g、5.0g、10.0g、20.0g、40.0g、80.0g、120.0g(10mL具塞比色管中)。方法检出限:该方法检出限为0.3g(当测定试样1.000g时,最低检出浓度为0.06mg/100g),能够满足GB/T 5009.37-2003 (4.4.1紫外分光光度法)的检测要求。参考标准:GB/T 5009.37-2003 (4.4.1紫外分光光度法)案例5. 油脂中没食子酸丙酯的测定前处理方法:称

7、取10.00g(精确至0.001g)试样,用100mL石油醚溶解,移入250mL分液漏斗中,加入20mL乙酸铵溶液(16.7g/L),振摇2min,静置分层,将水层放入125mL分液漏斗中(如乳化,连同乳化层一起放下),石油醚层再用20mL乙酸铵溶液重复提取两次,合并水层。石油醚层再用水振摇洗涤两次,每次15mL,合并水层,振摇,静置。将水层通过干燥滤纸滤入100mL容量瓶中,用少量水洗涤滤纸,加入2.5mL乙酸铵溶液(100g/L),加水至刻度,摇匀。将此溶液用滤纸过滤,弃去20mL初滤液,收集滤液供测定。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表5):

8、表5 测量参数测量波长(nm)540比色皿光程(cm)1检测界面(见图5):图5 油脂中没食子酸丙酯的检测界面上图标准曲线中,没食子酸丙酯标准系列的质量依次为:0g、50g、100g、200g、300g、400g、500g(25mL具塞比色管中)。方法检出限:该方法检出限为18.1gPG。(测定试样相当于2g时,最低检出浓度为9.1mg/kg。),能够满足GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯(PG)的测定的检测要求。参考标准:GB/T 5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯(PG)的测定案例6. 果汁饮料中总磷的测定前处理方法:称取一定量经混合均匀的果汁样品5.00 g10

9、. 00 g于500 mL凯氏烧瓶中,加入2粒3粒玻璃珠、10 mL15 mL硝酸(分析纯)、5 mL硫酸(分析纯),浸泡约2h。先用微火加热,待剧烈反应停止后,加大火力。溶液开始变为棕色时,立即滴加硝酸(分析纯),直至溶液透明,颜色不再变深为止。继续加热数分钟至浓白烟逸出,冷却,小心加入20 mL水,再加热至白烟逸出,冷却至室温。将溶液转移到50 mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,备用。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表6):表6 测量参数测量波长(nm)400比色皿光程(cm)1检测界面(见图6): 图6 果汁饮料中总磷的检测界面上图标准曲线

10、中,磷标准系列的质量依次为:0.0mg/L、2.0 mg/L、4.0 mg/L、6.0 mg/L、8.0 mg/L、10.0 mg/L(50mL容量瓶中)。方法检出限:该方法检出限为0.1mg/L。能够满足GB/T 12143-2008饮料通用分析方法 (9.5.3总磷)的检测要求。参考标准:GB/T 12143-2008饮料通用分析方法 (9.5.3总磷)案例7. 茶饮料中茶多酚的测定前处理方法:称取均匀透明的样液1g5g(精确至0.001g)于25mL容量瓶中,加水4mL、酒石酸亚铁溶液5mL,充分摇匀,用pH7.5磷酸缓冲溶液定容至刻度。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪

11、器有限责任公司)仪器条件(见表7):表7 测量参数测量波长(nm)540比色皿光程(cm)1检测界面(见图7):图7 茶饮料中茶多酚的检测界面上图中,A1=0.9598,A2=0.0092。结果计算:X = 式中:X样品中茶多酚的含量(mg/kg);A1试液显色后的吸光度;A2试液底色的吸光度;1.957用10mm比色皿,当吸光度=0.50时,1mL茶汤中茶多酚的含量相当于1.957mg;K稀释倍数;m测定时称取试液的质量(g)。参考标准:GB/T 21733-2008茶饮料 (6.2.1 茶多酚)案例8. 白砂糖色值的测定前处理方法:称取样品100.0g于200mL烧杯中,加入pH7.00的

12、三乙醇胺-盐酸缓冲溶液135mL,搅拌至完全溶解。倒入已预先铺好0.45m孔径微孔膜的过滤器中,在真空下抽滤,弃去最初50mL左右的滤液,收集滤液应不少于50mL。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表8):表8 测量参数测量波长(nm)420比色皿光程(cm)5检测界面(见图8):图8 白砂糖色值的检测界面上图中,A=0.1755。结果计算:C = 式中:C 色值,单位为国际糖色值单位(IU);A 在420nm波长测得样液的吸光度;b 比色皿光程,单位为厘米(cm);c 样液浓度由20的折光锤度乘上一系数(白砂糖0.9862,绵白糖0.9854),然

13、后查表求得,单位为克每毫升(g/mL)。参考标准:GB 317-2006白砂糖(4.7色值的测定)案例9. 鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的测定前处理方法:准确称取均匀的样品2g4g(精确至0.0001g),用少量0.01mol/L的盐酸溶液溶解并定容于100mL容量瓶中,混匀。将此溶液用滤纸过滤,弃去初滤液20mL。吸取滤液5.00mL于100mL容量瓶中,用0.01mol/L的盐酸溶液定容,混匀,此溶液即为测试液。检测仪器:T9型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)仪器条件(见表9):表9 测量参数测量波长(nm)250比色皿光程(cm)1(石英)检测界面(见图9):图9 鸡精调

14、味料中呈味核苷酸二钠的检测界面上图中,A=0.6021。结果计算:X = 式中:X样品中呈味核苷酸二钠的含量(含7.25分子结晶水)(g/100g);A样品在波长250nm处的吸光度;m样品质量(g); 530含7.25分子结晶水呈味核苷酸二钠的平均分子量;2000样品的稀释倍数;11950呈味核苷酸二钠的平均摩尔吸光系数。参考标准:SB/T 10371-2003 鸡精调味料(5.2.4呈味核苷酸二钠)案例10. 食品中二氧化硫的测定前处理方法:称取适量(510g)粉碎混匀后的样品,浸泡提取生成稳定络合物后过滤,取适量滤液与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫色络合物,使用T9通过与标准系列比较定量。检测仪器:北京普析通用仪器有限责任公司 T9型紫外可见分光光度计。仪器条件: 具体参数见表1。表1 仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度(Abs)吸收波长550nm比色皿光程10mm检测谱图(见图1): 图1 标准曲线谱图上面谱图显示R=0.9999。样品检出限:该方法检出限为0.001g/kg,能够满足GB 5009.34-2003的检测要求。参考标准:GB 5009.34-2003案例11.食品中的氰

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