绪论临床免疫学和病原学检查 ppt医学课件

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1、1 实验诊断学的概念 以临床检验学为基础 将检验学提供的结果或数据 由医师结合临床病史 家族史 症状 体征 影像资料 病例检查等 应用于临床诊断 鉴别诊断 疗效观察和预后判断 也可以为科学研究 预防疾病 健康普查和遗传咨询等提供实验依据 基础医学向临床医学过度的桥梁课程 2 实验诊断学的应用范围和局限性 应用范围 随着医学模式由疾病诊治单一模式向多方向转化而逐渐拓宽和不断充实1 为临床医学服务 1 确定诊断 白血病的血细胞和骨髓象检查病毒的核酸和某些抗体的检查寄生虫查到虫卵 成虫 2 鉴别诊断 细菌和病毒感染的鉴别等 3 辅助诊断 肝 肾 内分泌功能的检查 4 疗效观察 预后判断和复发监测等

2、3 实验诊断学的应用范围和局限性 应用范围 2 为预防医学服务 通过流行病学调查 及时发现传染源 制定预防和控制措施3 为健康普查服务 早期发现 早期诊断 早期治疗4 为遗传咨询服务 优生优育 杜绝遗传性疾病 4 实验诊断的影响因素 实验诊断学的影响因素1 实验 分析 前的影响因素 75 以上 生理因素 人种 民族 性别 年龄等生活状态 运动 体位 进食等环境因素 居住条件 地区和海拔高度等标本的采集 保存和运送药物的影响2 实验 分析 中的影响因素3 实验 分析 后的影响因素 5 实验诊断学的质量管理 室内质量控制 控制精密度 由实验室自己实施针对实验室内部影响质量的所有环节室间质量评估控制

3、准确性 可比性 由权威机构组织全面质量控制就建立全面的质量管理体系参加实验室认可 15189 CAP 6 分析前的质量管理 患者的准备标本的控制 7 标本因素对检验质量的影响 标本的类别1 血标本 全血 血浆和血清等 全血 临床血液学检查血浆 血栓和止血检查血清 生化和免疫检查静脉血 动脉血和毛细血管血 分别适合不同的检测真空采血管 8 标本因素对检验质量的影响 标本的类别2 尿液标本 尿液检验的检查结果是否准确与标本正确收集直接相关随机尿 门急诊患者的常规检验首次晨尿 浓缩尿 细胞和管型等形态完整 适合有形成分的检测24小时尿 定量分析中段尿 培养用的尿液3 粪便 应新鲜 干净的容器以免污染

4、 常规5 10g 寄生虫留取全部或24小时粪便 培养应留取可疑阳性部分 9 标本因素对检验质量的影响 标本的类别4 脑脊液 收集三份于无菌小瓶中 每瓶1 2ml第一瓶常混有血液 培养第二瓶做化学检查第三瓶做细胞检查5 浆膜腔液 胸腔 腹腔 心包腔和关节腔等6 羊水 不同的检查目的采取不同的穿刺时间和量诊断胎儿性别和遗传病 16 20周 20 30ml了解胎儿成熟度 晚期妊娠 10 20ml 10 标本因素对检验质量的影响 标本的类别7 前列腺和精液 8 痰液和支气管灌洗液9 其他 胃及十二指肠液等 11 标本因素对检验质量的影响 标本的采集1 患者的准备及患者身份识别 饮食状态 精神状态 运动

5、状态等条形码 身份证等2 采集时间清晨空腹标本 受各种因素影响小 减少昼夜节律影响 重复性好随机或急诊标本 无法限定时间 体内代谢比较稳定 影响因素少指定时间标本 糖耐量 培养等 12 标本因素对检验质量的影响 标本的采集3 采血的体位 当人体从卧位到直立或者坐位时会导致液体从血管内向组织间隙扩散约12 许多指标影响较大4 止血带的使用 13 标本因素对检验质量的影响 标本的采集5 正确使用添加剂6 采集标本的顺序 通常血常规的管子是最后采集的排除EDTAK2对生化检查的污染7 充分混匀8 避免溶血 14 标本因素对检验质量的影响 标本的运送尽早送检 特殊样本还需冰浴 不能及时检测应妥善保存标

6、本的保存不同的检测项目采用不同的保存条件大多项目在4 可保存三天 20 可保存1个月 80 或液氮可保存3个月以上 甚至长期保存标本的及时分离和检测 15 分析中的质量控制 方法的选择标准操作规程的的制定和执行室内质控室间质评 16 分析后的质量控制 分析后的质量管理是检验全面质量管理的最终环节 是检验结果转化为临床诊疗信息的过程数据的处理 制式的改变 图形的处理等检验结果的审核 复查 危急值的处理等报告单的发放 应注意疫情 患者的隐私临床咨询 报告解释和抱怨处理等 持续改进的输入 17 实验诊断的临床应用和评价 正确选择实验室检查项目1 满足临床诊断 治疗和预防的需求 筛选 诊断 鉴别诊断

7、特异性 敏感性 2 符合询证医学和实验项目优化组合的要求3 减轻患者的负担和痛苦4 必须在详细询问病史 全面的体格检查的基础上 18 实验诊断的临床应用和评价 诊断性实验的评价指标 如定性和细菌培养等 金标准疾病非疾病 a 真阳性 b 假阳性 a b诊断性实验 c 假阴性 d 真阴性 c d总数a c n1b d n2n1 敏感度或者真阳性率 金标准诊断为有病的人中 诊断性试验阳性者的比例 a a c 2 特异度或者真阴性率 金标准诊断为无病的人中 诊断性试验阴性者的比例 d b d 3 阳性预测值 诊断性试验阳性者中有病者所占的比例 即患者诊断性试验阳性 其患病的可能性 a a b 4 阴性

8、预测值 诊断性试验阴性者中 无病者所占的比例 即诊断性试验为阴性时 不患病的可能性 d d c 19 实验诊断的临床应用和评价 常用诊断性实验的评价指标1 诊断灵敏度指某检验项目对某种疾病具有鉴别 确认的能力 为所有病人中获得真阳性结果的百分数 2 诊断特异性指某检验项目确认无某种疾病的能力 为非病人中获得真阴性结果的百分数 20 实验诊断的临床应用和评价 常用诊断性实验的评价指标3 诊断准确度指某检验项目在实际使用中 所有检验结果中诊断准确结果的百分比 4 使用检验项目临床性能评价的ROC曲线寻找最佳判断限界及其诊断灵敏度和特异性 21 实验诊断的临床应用和评价 ROC曲线的临床应用ROC为

9、 信号接受特性图 receivingoperatingcharateristics 是最常用有效的对检验项目临床性能评价的定量资料进行归纳分析的统计学方法 1 病人和非病人的定量数据以分布图形式表示2 所有数据列表以不同的的限值为判断限 计算各组数据的真阳性率和假阳性率 3 假阳性率为横坐标 真阳性率为纵坐标 将数据点于图上并连接各点 绘制ROC曲线 4 常用于两种以上诊断性检验的诊断价值比较和寻找界点 22 实验诊断的参考值范围与医学决定水平 参考范围参考值 是指在特定条件下 健康人群 抽样的个体进行某项目检测所测得的值参考范围 95 抽样所测值的平均值 x 加减其标准差 s 而构成 影响因

10、素多 应建立自己的参考值 或进行验证医学决定水平指不同于参考值的另一些限值 通过观察测定值是否高于或者低于这些限值 可在疾病诊断中起排除或确认的作用危急值 是指某些结果出现异常 超过这一界定值可危及患者生命 医生必须紧急处理 报告 23 实验诊断学的学习重点和方法 以常见病为基础 以重点器官为中心 重点抓住反映他们的实验诊断项目学习以检验项目为中心 深入联系理论基础 广泛联系临床疾病 原理 机制 临床意义和一些重要的概念 24 临床免疫学测定前言 生活水平提高改变生活方式两大新兴产业 保健 提高免疫力 和美容如何评判免疫力 太低 感染 肿瘤太高 自身免疫性疾病最主要的因素 机体的免疫系统怎样从

11、实验室的角度来衡量 25 临床常用免疫学和病原学检查福建医科大学附属协和医院 26 随着现代免疫学理论和技术的飞速发展 临床免疫学的检测项目也日趋增多 某些检测项目可为临床诊断 鉴别诊断 疗效观察和预后判断提供特异的和敏感的信息 以下就一些常用的免疫学检查作一些介绍 27 第一节体液免疫检查 一 免疫球蛋白的检测 一 概念 免疫球蛋白是指具有抗体活性和 或抗体样结构的球蛋白 由浆细胞产生 存在于机体的血液 体液 外分泌液和某些细胞的膜上 按其重链性质分为IgG A M D和E五大类 在血清中IgG A M的含量为g L水平 而IgD IgE和血清以外的IgG A M仅为mg L 因此不同类的免

12、疫球蛋白需要选择不同敏感度的方法 二 常用的检测方法1 单向琼脂扩散法 2 免疫比浊法 3 酶联免疫吸附法 ELISA法 28 三 免疫球蛋白的分类 IgG 为人体中含量最多和最主要的免疫球蛋白 占总免疫球蛋白的70 80 属再次免疫应答抗体 也是唯一能通过胎盘的Ig 新生儿可被动获得免疫 IgA 分为血清型和分泌型 分泌型的IgA SIgA 由呼吸道 消化道 泌尿生殖道的淋巴样组织合成 参与这些部位的局部免疫 IgM 初次免疫应答反应中的Ig 最早出现的抗体 也是分子量最大的Ig 29 三 免疫球蛋白的分类 IgE 是血清中含量最少的一种Ig 与变态反应 寄生虫感染及皮肤过敏等有关 IgD

13、妊娠末期和吸烟者含量升高6 M蛋白 或称单克隆免疫球蛋白 是一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片断 见于多发性骨髓瘤 巨球蛋白血症 重链病和轻链病等 30 三 检测的临床意义1 低Ig血症 1 先天性低Ig血症见于体液免疫缺陷和联合免疫缺陷 如先天性无丙种球蛋白血症 IgG 1g L A和M仅为正常值的1 先天性IgA缺乏症患者容易反复呼吸道感染 IgG缺乏易患化脓性感染 而IgM缺乏易引起革兰氏阴性杆菌败血症 2 获得性低Ig血症淋巴肉瘤 肾病综合征 中毒性骨髓瘤等可造成血清中Ig明显降低 2 高Ig血症 1 非特异性多株峰免疫球蛋白增高症慢性细菌感染

14、 结核 慢性支气管炎 风湿时IgG升高 急性感染早期可IgM升高 自身免疫性疾病 胶原病 类风湿 关节炎 SLE可见IgG A M升高 肝病和肝硬化时可呈现IgG A升高 2 特异性单株峰免疫球蛋白增高症 巨球蛋白血症IgM升高 31 3 IgD妊娠末期和吸烟者含量升高 IgD骨髓瘤患者血清IgD水平比正常人高10000倍 是唯一明确可作为确诊的证据 4 血清总IgE对特异性疾病的诊断 治疗和探索发病机制有重要意义 寄生虫感染时IgE升高 特异性哮喘 过敏性鼻炎等患者血清中IgE含量升高与发病和缓解呈平行关系 32 二 补体的检测 一 概念 补体是人或动物血清中的一组具有酶活性的蛋白质 在机体

15、免疫系统中发挥抗感染和免疫调节的作用 也参与免疫病理反应 33 二 常用的检测方法和临床意义1 血清总补体溶血活性 CH50 测定 主要反应补体经典激活途径的溶血功能 其结果与C1 C9各组分的量和活性均有关 但并非完全相关 一般以50 溶血作为检测终点 因此又称为CH50 此方法不能测定补体蛋白的绝对值 也不能测定备解素系统中的成分 临床意义 CH50增高见于急性肾炎 组织损伤 恶性肿瘤等 而降低见于急性肾小球肾炎 SLE活动期 类风关 亚急性细菌性心内膜炎 严重肝病尤其是肝坏死CH50降低甚至测不出来 有助于判断肝受损的程度 34 2 补体成分C3 C4的测定C3 C4是补体级联反应的关键

16、成分 其中C3是补体系统中含量最高的 1 C3 C4的含量测定 单向琼脂扩散法和免疫比浊法 2 C3 C4的活性测定 免疫溶血法 3 临床意义 补体C3 C4减低常见于 补体合成能力下降 慢性活动性肝炎 肝硬化 肝坏死等 消耗或丢失过多 大多数急性肾小球肾炎 链球菌感染后肾炎 狼疮性肾炎患者 还见于大面积烧伤 活动性SLE和类风湿关节炎活动期等 合成原料不足 如儿童营养不良性疾病 先天性补体缺乏 35 第二节细胞免疫检查 人体的淋巴细胞分为T B和NK等细胞群 它们又可以分为若干个亚群 各有其特异的表面标志和功能 临床上各种免疫疾病均可出现不同群淋巴细胞数量和功能上的变化 对它们进行检测可以判断细胞免疫功能 36 一 T淋巴细胞的检测 一 数量的检测 1 花环形成实验2 T细胞分化抗原测定 CD3 总T细胞 CD4 辅助性T细胞CD8 抑制性T细胞检测方法 免疫荧光法和流式细胞检测法 二 功能的检测 淋巴细胞转化试验1 形态学方法2 3H TdR掺入法 37 三 临床意义1 降低 见于免疫缺陷性疾病 如恶性肿瘤 免疫性疾病 某些病毒感染 大面积烧伤等 2 升高 见于甲亢 甲炎 重症肌无

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