正常家兔磺胺嘧啶钠药动学参数的测定ppt医学课件

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1、1 正常家兔磺胺嘧啶钠药动学参数的测定 中国医科大学药学院药理教研室孙也之 掌握家兔动脉插管的手术过程 2 熟悉磺胺嘧啶钠血药浓度测定原理与测定方法 3 了解药动学参数的计算方法 实验目的 实验药品 20 磺胺嘧啶钠30mg 磺胺嘧啶钠 标准液 5 三氯醋酸0 5 麝香草酚 用20 NaOH溶液配制 0 5 亚硝酸钠6 2N盐酸7 1 肝素 1ml kg 8 20 乌拉坦 5ml kg 实验动物家兔 2 0 2 5kg 实验设备家兔操作台手术器械 手术刀大镊子止血钳弯头小镊子眼科剪刀玻璃钩 实验设备 3 动脉插管4 722型可见光分光光度计 实验设备 5 离心机 实验步骤 1 取家兔 称重 通

2、过耳缘静脉给20 乌拉坦 5ml kg 耳缘静脉注射 如何确定家兔已经被完全麻醉呢 家兔同时出现以下三种体征 1 肌张力减弱 2 呼吸速率逐渐减慢 3 角膜反射消失 2 颈动脉剖开固定家兔头部 绑四肢 用弯剪清理颈部毛发 沿家兔解剖学正中线摸到颈部甲状软骨 用手术刀沿甲状软骨向下切开颈部皮肤5 7cm 血管钳钝性分离 暴露气管 游离气管一侧的颈总动脉 与周围组织及迷走 交感神经分离 为了防止凝血 由耳缘静脉注射1 肝素 1ml kg 颈总动脉下穿过两根手术线 一根线头端结扎 另一根线备用 心端用动脉夹夹住 眼科小剪刀近头侧结扎处下剪小口 插动脉插管 结扎 固定 3 空白血样品收集 从动脉插管放

3、空白血0 5ml 用离心管收集 并摇匀 4 给药 向一侧耳缘静脉内注入20 的磺胺嘧啶钠 1ml kg 5 血样品收集 在给药后每个时间点收集0 5ml血样 时间点 1 3 5 15 30 60 90 120min 每次取血前 要先放2滴血再取 以免不同时间点的血样间产生污染 注意事项 动脉插管后 由耳缘静脉注射肝素 1ml kg 采血试管取血前一定要用肝素浸润 每次取血之前要先将残血放掉 每吸取一个血样时 必须更换枪头 加样时枪头不要碰到三氯醋酸液面 将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀 否则易出现血凝块 加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱 注意各比色杯要清洗干净 擦干并匹配 取药液要准确 离

4、心时要注意离心管的配平 注意严格按照722型分光光度计操作方法进行操作 试管实验本实验测定磺胺嘧啶钠的原理 显色原理 磺胺类药物在酸性溶液中 可使苯环上的氨基 NH2 离子化生成铵类化合物 NH3 进而与亚硝酸钠起重氮反应 产生重氮盐 N N 此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应 生成橙红色的偶氮化合物 偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关 可用光度计测出其吸光度 通过与标准品吸光度的比较及运算 即可推算出磺胺的浓度 计算公式如下 脱蛋白取空白血样与各时间点血样0 2ml 放入各离心管中并标记 每个离心管分别加水1 8ml 标准管加水1 6ml 另取30mg 磺胺嘧啶钠标准液0

5、2ml加入到标准管中 以配置标准血样品 各试管分别加入5 三氯醋酸4ml 并摇匀 然后1000rpm离心5min 2 重氮化及偶联呈色从各离心管提取上清2 0ml并转移至玻璃试管中试剂按照如下顺序添加 0 5ml2NHCl0 5ml0 5 NaNO21 0ml0 5 麝香草酚 然后摇匀 注意 加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒 3 分光光度计分析 每个样品的吸光度值由722型分光光度计测定 最大吸收波长设定于480nm 以空白血样品作为空白对照进行分光光度计调零 计算血药浓度偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关 可用光度计测出其吸光度值 通过与标准品吸光度值的比较及运算 即可推算出磺胺的浓度 计算公式如下 实验结果 Table1 结果记录表 实验结果1 以时间为横坐标 浓度的对数为纵坐标 在半对数图上绘制磺胺嘧啶钠的药时曲线 以lgC对t做直线回归 得方程 lgC a bt 按lgC t图判断房室数 如果基本上为一条直线则按一室模型处理 一室模型图 问题 1 测定半衰期有何意义 2 根据Vd D Co 当用药剂量400mg kg D 你能计算出零时血药浓度Co及表现分布容积Vd吗

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