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1、三重四极杆液质联用仪基础知识 液相色谱 泵 脱气机 进样器 色谱柱 洗脱液 检测器 废液 信号 数据系统 液相色谱连接管路 材料不锈钢 Teflon PEEK 聚醚醚酮 尺寸 液相色谱连接管路 不锈钢 可用于所有连接 能承受几百MPa压力酸性或高浓度盐环境中易腐蚀 尤其在pH小于2时 PEEK 可用于所有连接 能承受高达25MPa压力可在整个pH范围 pH1 14 内使用不适用于高溶解性溶剂如氯仿 丙酮 THF等Teflon 用于柱后阻尼管 反应管和排液管 化学惰性大能承受0 5MPa压力 LC 20AD的概要 柱塞往复泵 单向阀工作原理 单向阀结构 色谱柱 较小的流量可获得较高的离子化效率
2、所以在条件允许的情况下最好采用内径较小的色谱柱不同色谱柱保证良好分离的流量0 3mmi d 10 L min1 0mmi d 30 60 L min2 0mmi d 200 500 L min4 6mmi d 700 L min 色谱柱 2 质谱基础知识 质谱是什么 特殊的天平 称量离子的质量 质 质谱能做什么 定性 化合物的分子量和结构定量 混合物中目标组分的含量领域 化学 生物学 医学 药学 环境 物理 材料 能源等 分子离子分子离子是样品分子失去或得到一个电子而形成的 分子离子代表完整的样品分子 是其所有碎片离子的终极前体 由分子离子的m z值可得到该化合物的相对分子量 分子离子如为阳离
3、子则以M 表示 代表该离子具有一个正电荷 代表游离基 故此离子为游离基阳离子 如为阴离子则以M 表示 为游离基阴离子 M 及M 均含未成对电子 又称奇电子 oddelectron 离子 分子离子提供了最有价值的质谱信息 包括相对分子量 元素组成与碎片离子相关的结构信息 准分子离子取决于化合物的性质和质谱离子化方法及条件 可生成质子化或去质子的分子 即 M H M H 及加合物离子 如 M Na M Cl 等 这些均为偶电子 evenelectron 离子 目前国际上有将两种离子统称分子离子的趋势 经常观测到的加合离子 DiketometribuzinC7H12N4O2ExactMass 184
4、 0960NominalMass 184 质谱常用概念 同位素 同位素具有相同质子数 不同中子数 或不同质量数 同一元素的不同核素互为同位素 单同位素峰单同位素质量 最轻的稳定同位素的质量 也有说自然界中丰度最大的同位素的质量 单同位素峰 质谱图上单同位素质量所对应的峰 同位素峰质谱图中的一个峰 其元素组成中含有一个或多个非最高天然丰度的同位素 化学上 氯的原子量是35 5 质谱上 对于含有一个氯原子的离子 在A和A 2处各出一个峰 且相对强度为3 1 这是因为Cl35 Cl37 3 1 质谱测定的是微观离子 不是宏观上的平均的概念 元素分类情况 A H F P IA 1 C NA 2 O S
5、 Si Cl Br 质谱常用概念 同位素 质谱常用概念 同位素 例1 79Br100 81Br98 100 MM 2M 4M 6Br n 1 11Br2 n 2 121Br3 n 3 1331例2 35Cl100 37Cl32 5 MM 2M 4M 6Cl n 1 10 325Cl2 n 2 10 6500 106Cl3 n 3 10 9750 3170 034 质谱常用概念 同位素 单同位素质量 名义 整数 质量 平均质量 准确质量 质谱图 MassSpectrum 质谱仪产生的信息是离子的质量及其强度 这些数据可以列成表 最常用的是以质荷比 m z 为横座标 强度为纵座标制成的质谱图 三重
6、四极杆质谱议 最常用的MS MS实验中 第一级质量分析器用于选择一个前体离子 precursorion 或称为母离子 parention 然后 用适当的活化方法 常用碰撞诱导解离 collision induceddissociation CID 使这一离子裂解生成产物离子 productions 或称为子离子 daughterions 及中性碎片 mp mf mn式中 mp 为前体离子 mf 为产物离子 mn为中性碎片 SIM SelectedIonMonitoring选择性离子监测模式Scan 扫描模式MRM MultipleReactionMonitoring多反应监测子离子扫描 Pro
7、ductIonScan 母离子扫描 PrecursorIonScan 中性丢失扫描 NeutralLossScan 3 如何提高检测的灵敏度 如何提高检测灵敏度 1 质谱 影响离子化效果的因素 除喷雾针的位置外 其他参数均可以通过软件反控 因此可以使用批处理的方法进行优化 如何提高检测灵敏度 2 液相 色谱柱样品浓度流动相 种类和比例 与流速液相分离情况溶剂 样品纯度 系统的清洁度pH 甲酸 正离子模式 乙酸铵 负离子模式 4 维护 吸滤头 分玻璃材质 不锈钢材质去除流动相中不溶性颗粒 防止异物进入LC系统 三个月更换一次取下过滤头用25 的硝酸溶液超声清洗15分钟取出后蒸馏水超声清洗10分钟用吸球吹出过滤头中的液体再用蒸馏水超声清洗10分钟用吸球吹净过滤头中的液体将过滤头重新插入溶剂瓶中 谢谢
