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1、 实验室的生物安全与防护 BIOHAZARD生物危害标识 严重生物安全事故案例 2003年9月新加坡实验室人员感染SARS病毒2003年9月台湾实验室人员感染SARS病毒2004年4月我国国家CDC的SARS实验室研究生感染SARS病毒并传染给别人 生物安全事件 1999年广州中医药大学博士后张某从事 九五 国家攻关课题 补肾法治疗老年性痴呆 的实验时接触大鼠 3个月后感染流行性出血热 2003年被诊断为肾功能衰竭 2006年进行肾移植手术2002年 湖北省药检学校的一名毕业生在某药厂从事动物实验工作 由于接触了带出血热病毒的实验动物而感染流行性出血热不治死亡 生物安全 1实验室生物污染的原因
2、及种类临床实验室的生物污染可由不同种属的致病因子造成 包括细菌 病毒 真菌以及寄生虫等 1 1对空气的污染1 1 1气溶胶 是悬浮于气体介质中的粒径一般为0 001 m 100 m的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系 1 1 2当气溶胶不能被安全有效地限定在一定范围内时 便成为导致实验室内空气污染的重要原因 1 1 3下述操作可能产生气溶胶 a 使用涡旋震荡器 b 用力拍干反应板c 超声波处理d 试管开盖e 开启冰箱和离心机f 舍弃离心后的上清液时g 另外清洗注射器 调整液量也可产生气溶胶h 有人认为振荡试管也会发生气溶胶 1 2对水的污染1 2对水的污染实验过程中产生的污水不经处理直
3、接排入江河 池塘 或者直接用于灌溉 可严重污染环境和水源 当人们接触或食用致病因子污染的水或食物时 就可能使人致病或引起传染病的暴发流行 1 3对人体的感染1 3 1实验室工作人员在实验过程中受到实验室生物污染而发生的感染 称为实验室感染 1 3 2当实验工作人员缺乏特异性的免疫力时 特别是妊娠或免疫功能降低时 人体对疾病的易感性增加 更易发生实验室感染 1 4对物体表面的污染感染性物质的溢出和溅出后处理不当 实验室内经常性清扫和擦洗工作以及穿用污染的工作服和鞋等可造成实验室物体表面的污染 包括对墙壁 地面 台面 仪器和其他物体表面的污染 人的皮肤 黏膜和鞋底是常造成实验室内地面及其他物体表面
4、污染的原因 Aerosolgenerating 临床实验室 对取自人体的各种标本进行生物学 微生物学 免疫学 化学 血液免疫学 血液学 生物物理学 细胞学等检验 并为临床提供医学检验服务的实验室 适用于二级 涵盖一级 生物安全防护水平的病原体检验 不适用三级生物安全防护水平的病原体检验 临床实验室生物安全 保证临床实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平 避免实验室人员 来访人员 社区及环境受到不可接受的损害 符合相关法规 标准等对临床实验室保证生物安全责任的要求 法律法规国家标准 中华人民共和国传染病防治法 病原微生物实验室生物安全管理条例 人间传染的病原微生物名录 实验室生物安全通用要求
5、GB19489 2008 病原微生物实验室生物安全通用准则 WSS 2017 危害程度分级 根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级 1 1危害等级I 低个体危害 低群体危害 不会导致健康工作人员和动物致病的细菌 真菌 病毒和寄生虫等生物因子 1 2危害等级II 中等个体危害 有限群体危害 能引起人或动物发病 但一般情况下对健康工作人员 群体 家畜或环境不会引起严重危害的病原体 实验室感染不导致严重疾病 具备有效治疗和预防措施 并且传播风险有限 1 3危害等级III 高个体危害 低群体危害 能引起人类或动物严重疾病 或造成严重经济损失 但通常不能因偶然接触而在个体间传播 或能使用抗生素
6、抗寄生虫药治疗的病原体 1 4危害等级IV 高个体危害 高群体危害 能引起人类或动物非常严重的疾病 一般不能治愈 容易直接或间接或因偶然接触在人与人 或动物与人 或人与动物 或动物与动物间传播的病原体 临床实验室的生物污染可由不同种属的致病因子造成 包括细菌 病毒 真菌以及寄生虫等 根据病原微生物的传染性 感染后对个体或者群体的危害程度 将病原微生物分为四类 a 第一类病原微生物 是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物 以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物 b 第二类病原微生物 是指能够引起人类或者动物严重疾病 比较容易直接或者间接在人与人 动物与人 动物与动物间传播的微生物 c 第
7、三类病原微生物 是指能够引起人类或者动物疾病 但一般情况下对人 动物或者环境不构成严重危害 传播风险有限 实验室感染后很少引起严重疾病 并且具备有效治疗和预防措施的微生物 d 第四类病原微生物 是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物 注1 第一类 第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物 根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平 并依照实验室生物安全国家标准的规定 将实验室分为一级 BiosafetyLevel1 BSL 1 二级 BSL 2 三级 BSL 3 四级 BSL 4 生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物 生物安全防护水平为二
8、级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病 但一般情况下对人 动物或者环境不构成严重危害 传播风险有限 实验室感染后很少引起严重疾病 并且具备有效治疗和预防措施的微生物 按照实验室是否具备机械通风系统 将BSL 2实验室分为普通型BSL 2实验室 加强型BSL 2实验室 生物安全防护水平为三级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病 比较容易直接或者间接在人与人 动物与人 动物与动物间传播的微生物 生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物 第一类病原微生物 级风险等级生物因子第二类病原微生物 级风险等级生物因子第三类病原微生物 级风险等级生物因子
9、第四类病原微生物 级风险等级生物因子 统称为 高致病性病原微生物 P4 BSL4 P3 BSL3 P2 BSL2 P1 BSL1 对应关系 化学品危害火和电的危害辐射的危害 放射性核素 传染性危害 我国法定的传染性疾病有三类 甲类 鼠疫 霍乱 乙类 传染性非典型肺炎 艾滋病 病毒性肝炎 脊髓灰质炎 人感染高致病性禽流感 麻疹 流行性出血热 狂犬病 流行性乙型脑炎 登革热 炭疽 细菌性和阿米巴性痢疾 肺结核 伤寒和副伤寒 流行性脑脊髓膜炎 百日咳 白喉 新生儿破伤风 猩红热 布鲁氏菌病 淋病 梅毒 钩端螺旋体病 血吸虫病 疟疾 丙类 流行性感冒 流行性腮腺炎 风疹 急性出血性结膜炎 麻风病 流行
10、性和地方性斑疹伤寒 黑热病 包虫病 丝虫病 除霍乱 细菌性和阿米巴性痢疾 伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病 传染病的报告按 传染病疫情报告制度 在检验过程中发现甲类传染病及乙类传染病中的肺炭疸 传染性非典型肺炎 人感染高致病性禽流感 脊髓灰质炎的病人 病原携带者或疑似病人 应立即上报感染管理科 最迟不得超过2小时 发现其余乙类 丙类传染病及其它按规定需上报的传染病应在24小时内报至感染管理科 同时及时与开单医师或所在科室联系并做好相关记录 实验室生物安全防护的基本原则 实验室生物安全防护的内容包括安全设备 生物安全柜 紫外灯 高压灭菌器等 个体防护装置和措施 一级屏障 实验室的特殊设计和建设 分
11、区 单向气流 要求 二级屏障 严格的管理制度和标准化的操作程序及规程 三级屏障 应将每一特定实验室从立项 建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入各实验室的生物安全手册中 必须设有专职的生物安全负责人生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别 我科属于二级生物实验室 管理制度 实验室内设置和准入在主实验室内应合理设置清洁区 半污染区和污染区非实验有关人员和物品不得进入实验室实验室工作人员 外来合作者 进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准 个人防护用品 实验室防护服手套呼吸防护鞋面部及身体保护紧急防护装置 洗眼装置 紧急喷淋装置
12、生物安全柜Biologicalsafetycabinets BSCs 生物安全柜分三级 级 设计简单 目前仍广泛使用保护操作者和环境 不保护操作对象 级 保护操作者和操作对象操作危险度2级和3级微生物穿正压防护服可处理危险度4级微生物 级 对操作者防护最好操作危险度4级微生物适用于三级和四级生物安全水平实验室 一级生物安全柜气流形式 二级生物安全柜气流形式 三级生物安全柜气流形式 实验室工作人员资格和培训实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员 在独立工作前须在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训 达到合格标准 方可开始工作实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育
13、 自愿从事实验室工作实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度 规定和操作规程 生物安全柜的使用 生物安全柜使用时应注意以下事项 4 1 1生物安全柜运行正常时才能使用 4 1 2生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板 4 1 3安全柜内应尽量少放置器材或样品 不能影响后部压力排风系统的气流循环 4 1 4安全柜内不能使用酒精灯 否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器 允许使用微型电加热器 4 1 5所有工作必须在工作台面的中后部进行 并能够通过玻璃观察挡板看到 生物安全柜的使用 4 1 6尽量减少操作者身后的人员活动 4 1 7操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流 4 1 8不要使实
14、验记录本 移液管以及其他物品阻挡空气格栅 因为这将干扰气体流动 引起物品的潜在污染和操作者的暴露 4 1 9工作完成后以及每天下班前 应按照要求对生物安全柜消毒 4 1 10在安全柜内的工作开始前和结束后 安全柜的风机应至少运行5min 4 1 11在生物安全柜内操作时 不能进行文字工作 生物安全柜的消毒程序 4 2 1每日工作前以及完成工作以后 至少让生物安全柜工作5min 将污染的空气排出生物安全柜 4 2 2每次使用前后 紫外线照射30min 使用75 酒精擦拭工作台面进行消毒 4 2 3每日工作后 紫外线照射30min 使用75 酒精擦拭工作台面 四周及玻璃内外侧进行消毒 4 2 4生
15、物安全柜内使用的物品在移出生物安全柜前用75 酒精清除表面污染 实验室消毒措施 检验科的工作场所可分为清洁区 半污染区和污染区 清洁区包括办公室 休息室 会议室 资料室 半污染区为更衣室 污染区包括样品接收区 样品处理区 样品存放区和样品检测区 4 1每周应用含有效氯500mg L的消毒剂 地面消毒浓度应加倍 消毒桌 椅 门 窗和地面1次 所有清洁消毒器材 抹布 拖把 容器 不得与污染区或半污染区混用 4 2半污染区4 2 1空气 桌 椅 门 窗 地面消毒同污染区 4 2 2工作衣每周换洗1次 工作衣若有明显致病菌污染或从事烈性传染菌样品检验后 应随时更换 并用含有效氯2000mg L的消毒剂
16、浸泡1小时或压力蒸汽灭菌消毒 结核病专业检验室工作人员 每次连续佩戴口罩不得超过4h 4 3污染区4 3 1空气消毒通常紫外灯照射消毒 照射时间一般均应大于30min 4 3 2门窗 桌面 贵重仪器表面等物体表面消毒通常用500mg L有效氯擦拭一次 地面用有效氯2000mg L的消毒剂消毒1次 若被明显污染 如具传染性的样品或培养物外溢 溅泼或器皿打破 洒落于表面 应立即用消毒液消毒 用有效氯2000mg L的消毒剂洒于污染表面 并使消毒液浸过污染物表面 保持30分钟以上 再擦 抹布和拖把用后浸于上述消毒液内1小时 手的消毒 4 4 1洗手与卫生手消毒应遵循以下原则 a 当手部有血液或其他体液等肉眼可见的污染时 应用肥皂 皂液 和流动水洗手 b 手部没有肉眼可见污染时 宜使用速干手消毒剂消毒双手代替洗手 4 4 2在下列情况下 医务人员应根据4 4 1的原则选择洗手或使用速干手消毒剂 a 直接接触每个患者前后 从同一患者身体的污染部位移动到清洁部位时 b 接触患者黏膜 破损皮肤或伤口前后 接触患者的血液 体液 分泌物 排泄物 伤口敷料等之后 c 穿脱隔离衣前后 摘手套后 d 接触患者
