【最新】原始记录02-犬粪棘球绦虫抗原检测

上传人:油条 文档编号:1303179 上传时间:2017-06-06 格式:DOC 页数:3 大小:37KB
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1、犬粪棘球绦虫抗原检测原始记录受控号: NIPD-10-TR-2013-02 检 测 编 号 联系地址 瑞金二路 207 号样 品 性 质检 验 依 据 犬粪棘球绦虫抗原检测细则 其他试剂生产单位 批号 有效期实验用仪器设备 酶标仪、恒温培养箱检测方法与结果方法:1 洗涤液配制:用去离子水水将浓缩洗涤液(2 号液)按 1:10 稀释,充分混匀即为工作洗涤液。2 样品处理:犬粪样品需要预先低温(-70 以下)冷冻 7 天以上,以灭活虫卵。称取 1g 犬粪,加入 1mL 已用等体积去离子水稀释的样本稀释液,充分搅拌混匀,静置 10 分钟,再经 3000rpm 离心 10 分钟,取上清液检测。3 加样

2、反应:每次试验设阴性对照 2 孔、阳性及空白对照各 1 孔(分别加入阴性、阳性对照及样本稀释液 100L) 。样品检测孔每孔分别取犬粪上清液 100L 加入。37 避光反应 30 分钟。甩去孔内液体,用已稀释的洗涤液洗涤 6 次,每次停留 1 分钟,最后一次甩净,拍干。4 加酶反应:除空白对照孔外,其余每孔加酶结合物(1 号液)100L,37避光反应 30 分钟。甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。5 显色反应:加底物(3 号液)和显色剂(4 号液)各 50L,混匀,37下避光显色 10 分钟。6 终止反应:加终止液(6 号液)50L,以空白对照调零,用酶标仪于 450nm 波长(630nm 作为参考波长)读取 OD 值。结果:阴性对照 1: 阴性对照 2: 阳性对照: 空白:实验 有效 无效Cut-off 值(COV)=检测人 审核人 检测日期 审核日期

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