【医学免疫学知识学习】_免疫学检测技术+疫苗及防疫接种

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1、第二十二章免疫学检测技术的基本原理 第一节体外抗原抗体反应 血清学反应 1 高度特异性 抗原抗体反应的特点 http www med sc edu 85 chime2 lyso abfr htm 2 表面化学基团之间的可逆结合 结合 非共价键氢键 静电引力 范德华力 疏水键解离 抗体亲和力受温度 酸碱度和离子强度的影响 亲和力 affinity 亲和力 亲合力 3 适宜的抗原抗体浓度和比例 4 抗原抗体反应的两个阶段抗原抗体特异性结合阶段可见反应阶段 抗原抗体反应的影响因素 电解质温度 37 酸碱度 pH6 8之间 第二节检测抗原和抗体的体外实验 检测抗原或抗体的方法 凝集反应 颗粒性抗原与相

2、应抗体在电解质存在的条件下结合 出现肉眼可见的凝集团块 直接凝集反应 颗粒性抗原 相应抗体间接凝集反应 可溶性抗原 颗粒载体 相应抗体 直接凝集反应 间接凝集反应 沉淀反应 可溶性抗原与相应抗体结合出现肉眼可见的沉淀物 速率散射比浊法 免疫比浊法 可检测样品中多种分子 并进行精确定量单向琼脂扩散 可用于检测血清中Ig或其他可溶性抗原的定量测定双向琼脂扩散 抗原抗体的定性分析免疫电泳 分析样品的成分及其性质 常用于血清蛋白的组分分析 单向琼脂扩散 双向琼脂扩散 补体参加的反应 原理 抗体 红细胞补体红细胞裂解 免疫标记技术将抗原抗体反应与标记技术结合 提高了抗原抗体反应的灵敏度 可定性 定量 定

3、位 酶免疫测定法 enzymeimmunoassay EIA 酶标记抗体进行的抗原抗体反应酶联免疫吸附试验 ELISA enzymelinkedimmunosorbentassay ELISA 将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面 使抗原抗体反应在固相表面进行 它将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用相结合 通过酶作用于底物后显色来判定结果 直接法间接法双抗体夹心法 双抗体夹心法 sandwichELISA 免疫荧光法 荧光素与抗体连接荧光抗体直接免疫荧光 荧光素标记的抗体直接作标本染色间接免疫荧光 一抗与标本中的抗原结合 再用荧光素标记的二抗染色 既可检测抗原 也可检测抗体 直接免疫荧光

4、间接免疫荧光 放射免疫测定法 用放射性核素标记抗原或抗体进行的免疫测定 化学发光免疫技术 将化学发光分析和免疫反应相结合 免疫胶体金技术 用胶体金颗粒标记抗体或抗原 以测未知抗原或抗体的方法 免疫印迹技术 Westernblotting 转膜 第三节免疫细胞功能的检测 免疫细胞的分离与类型鉴定外周血单个核细胞的分离 密度梯度离心 淋巴细胞及其亚群的分离 磁珠分离 抗体与磁珠交联流式细胞术 FACS Cytofluorimetry 磁珠分离法 免疫细胞功能测定 T细胞功能测定B细胞功能测定 T细胞功能测定 T细胞增殖试验细胞毒试验细胞因子检测迟发型超敏反应 DTH 的检测 淋巴细胞转化 杀伤实验

5、 产生细胞因子的细胞频数的检测 ELISPOTAssay 迟发型超敏反应的检测DTH Delayed TypeHypersensitivity 检测抗原肽特异的T细胞频数 Tetramer 四聚体 Biotin B细胞功能测定 B细胞增殖试验抗体形成细胞测定 溶血空斑试验 第二十三章疫苗及预防接种 第一节免疫预防 特异性免疫的获得 自然免疫和人工免疫 人工免疫 人工主动免疫人工被动免疫 种类 抗毒素 免疫球蛋白 细胞因子与单克隆抗体 人工主动免疫 artificialpassiveimmunization 用疫苗接种机体使之产生特异性免疫 从而预防感染的措施 人工被动免疫 artificial

6、activeimmunization 给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂 以治疗或紧急预防感染的措施 EdwardJenner1749 1823 1796 Localmilkmaid SarahNelmes diagnosedwithcowpox Jennerscratchedmaterialfrompocksontothearmof8 year oldJamesPhipps Showedmildsymptoms recovered Sixweekslater JennerinoculatedJameswithsmallpox hedevelopednosymptomsofdis

7、ease 疫苗的起源 EdwardJennerinoculatingJamesPhippswithcowpox 1796 天花的流行情况 Theprinciplebehindthesmallpoxvaccine 安全 灭活疫苗应彻底灭活 避免无关蛋白和毒素污染 活疫苗无回复突变 无致癌性 有效 疫苗具有很强的免疫原性 在大多数人引起保护性免疫 保护性免疫的类型免疫记忆实用 接种程序简化 价格低廉 疫苗的基本要求 疫苗种类 现代疫苗种类 减毒活疫苗 脊髓灰质炎 麻疹 风疹 腮腺炎疫苗灭活疫苗 死疫苗 狂犬病 伤寒 流感疫苗亚单位疫苗 有效免疫原成分制成的疫苗 如乙型肝炎病毒表面抗原制成的乙型肝炎

8、疫苗 类毒素疫苗 细菌的外毒素经0 3 0 4 甲醛处理白喉类毒素 破伤风类毒素疫苗结合疫苗 细菌夹膜多糖 白喉类毒素 脑膜炎球菌 肺炎球菌疫苗已获准使用 联合疫苗 白百破三联疫苗重组载体疫苗 病毒载体疫苗 疫苗的现状 常规使用的疫苗的成功率 脊髓灰质炎 麻疹 风疹 腮腺炎疫苗BCG百日咳疫苗 我国计划免疫程序 许多疾病无有效疫苗 病毒 HIV 疱疹病毒细菌 葡萄球菌 A组链球菌真菌 假丝酵母原生动物 疟疾 利什曼病蠕虫感染 血吸虫病 新疫苗的研制 合成肽疫苗 生产方便 安全 多价疫苗DNA疫苗 用编码有效免疫原的基因与细菌质粒构建重组体直接免疫机体 主要问题 抗DNA抗体 癌变治疗性疫苗 治疗性乙肝疫苗 临床试验阶段 疫苗的应用 传染病抗肿瘤计划生育自身免疫病 思考题 1 什么是TAA 什么是TSA 什么是CT抗原 机体如何发挥免疫监视作用 肿瘤逃逸免疫系统攻击的机制有哪些 肿瘤的免疫治疗有哪些方法 2 何谓HVGR GVHR 同种异型移植排斥反应的机制是什么 同种异型抗原直接识别与间接识别有何区别 同种异型移植排斥的防治原则有哪些

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