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1、1.2 基因工程的基本操作程序教学内容基因工程的基本操作程序教师个案学生笔记学习目标1基因工程原理及基本操作程序。(重点)2获取目的基因的途径及基因表达载体的模式结构。3目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。(重点)学 习重 点1 基因工程原理及基本操作程序。2 目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法学习难 点1.基因工程原理及基本操作程序。2.目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法学习方 法自主合作探究学习过程学习过程一、探究新知一：基因工程的第一步目的基因的获取1目的基因：主要是指_的基因，也可以是_。2获取方法：(1)从基因文库中获取：基因文库
2、的含义：将含有某种生物不同基因的许多_ _，导入 _ 的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。基因文库的类型：a_：含有一种生物所有的基因；b_：含有一种生物的一部分基因，如_(2)利用PCR技术扩增目的基因：含义：PCR是_的缩写。它是一项在生物体外_的核酸合成技术。 原理：_。前提条件：_，是根据已知目的基因的核苷酸序列合成的。条件：DNA模板(上有目的基因)、引物、能量、_和4种脱氧核苷酸。 扩增过程：变性复性延伸循环。结果：每次循环后目的基因的量增加一倍，即呈_形式扩增。(3) 人工合成法：条件：基因比较小，_已知。方法：通过 _用化学方法直接人工合成。二：基因工程的第二
3、步(核心)基因表达载体的构建1构建目的：使目的基因在受体细胞中_，并且可以遗传给下一代。2组成 启动子：位置：_，功能：_识别和_的部位，驱动基因_。终止子： 位置：_，功能：_，本质：_。 标记基因：鉴别受体细胞中是否含有_，从而将含有_的细胞筛选出来。 三：基因工程的第三步将目的基因导入受体细胞1转化：目的基因进入_内，并且在受体细胞内_和 _的过程。2转化方法 (1)导入植物细胞：_法(最常用)：主要适应于双子叶植物和裸子植物。_法：常用于单子叶植物。_法：目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。(2)导入动物细胞：方法：技术。常用受体细胞：_。(3)导入微生物细胞：原核生物特点：_、多为_
4、、遗传物质相对_等。_方法：Ca2+处理法。即用_处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为_细胞)。四：基因工程的第四步目的基因的检测与鉴定检 测方 法现 象分子水平检测检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了目的基因_技术是否出现杂交带检测目的基因是否转录出了mRNA_技术是否出现杂交带检测目的基因是否翻译成蛋白质_技术是否出现杂交带个 体 水 平 鉴 定_实验等是否抗虫抗病二、新知应用1基因工程的主要技术环节依次是( )筛选获得含有目的基因的受体细胞 制备重组DNA分子 使目的基因表达获得目的基因 转化进入受体细胞A B C D2番茄营养丰富，是人们喜爱
5、的一类蔬菜。普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶破坏细胞壁，使番茄软化，不耐储藏。科学家通过基因工程将一种抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞，获得了抗软化番茄。下列关于培育抗软化番茄的叙述中，错误的是( )A运载工具是质粒 B受体细胞是番茄细胞C目的基因为多聚半乳糖醛酸酶基因 D目的基因的表达延缓了番茄的软化32010年8月，世界卫生组织宣布，肆虐全球的甲流大流行结束。在与甲流做斗争的过程中，科研工作者研制出了甲型H1N1流感病毒疫苗。其过程是从甲型H1N1流感病毒体内提取了必要的“基因”RNA片段，在体外通过反转录合成了目的基因，然后与载体结合成重组DN
6、A分子，再利用大肠杆菌发酵生产出了大量疫苗。下列有关甲型H1N1流感病毒疫苗的制作过程，说法错误的是( )A目的基因中无内含子 C生产出的疫苗其实是抗原，该抗原的化学本质是蛋白质B受体细胞是大肠杆菌 D重组DNA分子导入受体细胞的过程中发生碱基互补配对三、当堂检测4将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是( )A追踪目的基因在细胞内的复制过程B追踪目的基因插入到染色体上的位置C追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构5为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（如上图）(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶作用于图中的_处，DNA连接酶作用于_处。(填“a”或“b”)(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_法。(3)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_作探针进行分子杂交检测，又要用_的方法从个体生物学水平鉴定水稻植株的耐盐性。四、反思置疑4
